王海
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 供职机构：华中农业大学生命科学技术学院更多>>
- 发文基金：贵州省农业科学院专项资金项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 利用抑制性差减杂交技术鉴定谢瓦氏曲霉间型变种产孢相关的基因被引量：9
- 2013年
- 谢瓦氏曲霉间型变种Aspergillus chevalieri var.intermedius俗称"金花菌",是茯砖茶发酵中的优势菌种,该菌在不同的渗透压胁迫下产生不同类型的孢子。采用抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH),以低渗条件下产生的子囊孢子和高渗条件下产生的分生孢子为材料分别与营养菌丝体构建两个正反向文库。每个库随机挑选400个阳性克隆进行测序。然后将所得到的基因片段在GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对,筛选出的差异表达的基因涉及蛋白质代谢、细胞代谢、转录调控等多个方面,其中可能参与有性产孢调控的基因有13条,可能参与无性产孢调控的基因有10条。
- 谭玉梅王海刘永翔刘作易
- 关键词：茯砖茶子囊孢子
- 根癌农杆菌介导谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化被引量：2
- 2012年
- 利用根癌农杆菌对谢瓦氏曲霉间型变种进行了遗传转化。结果表明:遗传转化的效率为60～90个转化子/106个分生孢子,转化子的遗传性状比较稳定;谢瓦氏曲霉间型变种对潮霉素B比较敏感,20μg/mL就可以抑制真菌的生长。遗传转化体系的建立为后继基因功能的研究提供了重要工具。
- 王海谭玉梅刘永翔王阶平刘作易
- 关键词：根癌农杆菌
- G418抗性基因nptⅡ双元载体的构建及谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化被引量：5
- 2013年
- 为给谢瓦氏曲霉间型变种(Aspergillus chevalieri var.intermedius)多基因功能的研究提供新的选择标记,利用MYA培养基测G418敏感性后,以质粒pcDNA3.1(+)为中间载体构建nptⅡ基因表达元件,利用根癌农杆菌介导法转化至谢瓦氏曲霉间型变种。结果表明:用构巢曲霉PgpdA启动子、nptⅡ基因和构巢曲霉色氨酸C终止子TtrpC组成的G418抗性基因盒替换双元载体pDHt/sk-bar上的草丁膦抗性盒,成功构建双元载体pDHt/sknt,并且通过根癌农杆菌介导的转化获得的G418抗性转化子遗传稳定,nptⅡ基因主要以单拷贝形式插入谢瓦氏曲霉间型变种基因组DNA中。因此,双元载体pDHt/sknt适用于谢瓦氏曲霉间型变种的遗传转化。
- 曹旸刘永翔谭玉梅王海刘作易
- 关键词：双元载体
