谭玉梅
- 作品数：39 被引量：117H指数：7
- 供职机构：贵州省农业生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金：贵州省农业科学院专项资金项目国家自然科学基金贵州省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 贵州茯茶散茶发花条件优化及微生物多样性分析
- 2023年
- 贵州是我国茶树品种资源最丰富的省份之一,茶园面积大,但经济产值低,夏秋茶浪费严重,品种结构单一。该研究以贵州省安顺市黑毛茶为供试原材料,人工接种茯砖茶“金花”发酵剂,优化散茯茶发花工艺条件,并开展了理化指标变化及真菌多样性研究。通过单因素试验及正交优化试验分析不同因素对黑毛茶散茶发花的影响。结果表明,其最佳发花条件为:含水量30%、温度24℃、发酵时间9 d及接种量1:100(m/m)。在此发花条件下,成品散茯茶冠突曲霉孢子数为3×10^(8)CFU/mL,水分、总灰分、茶多酚、游离氨基酸、水浸出物含量分别为3.0%、6.8%、12.0%、2.4%、42.6%。经过上述优化后,茶汤色明亮,金花茂盛,香气纯正,滋味醇和。通过高通量测序技术分析不同发酵时间下散茯茶的真菌多样性。结果表明,发酵3 d后,曲霉属(Aspergillus)相对丰度达到98.8%。该研究优化了贵州散茶发花的工艺条件,对提高茯砖茶品质具有重要意义,为其他茶叶散茶发花工艺提供参考。
- 张舟琼曹霞任锡毅黄永会刘永翔谭玉梅
- 冠突曲霉AN1类锌指蛋白zfpA基因的克隆及表达分析
- 2017年
- 本研究采用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆出冠突曲霉中zfpA基因的cDNA全长序列并进行生物信息分析。该序列全长1 443 bp,开放阅读框长度为924 bp,从312~1 235 bp,没有内含子序列。推测编码的蛋白质含有307个氨基酸,同源性分析显示该基因与米曲霉的AN1锌指蛋白(XP_001826567)相似性达71%。利用荧光定量PCR技术分析了zfpA基因在营养菌丝体阶段、无性产孢阶段及有性产孢阶段的表达量差异。结果表明,这个基因在在无性产孢时期的表达量最低,有性产孢时期的表达量最高,相比无性产孢时期上调了4倍。本实验为深入研究zfpA基因对冠突曲霉的产孢调控机制奠定了基础。
- 谭玉梅王亚萍葛永怡葛永怡任秀秀刘作易
- 关键词：茯砖茶RACE技术
- 响应面法优化“金花”菌培养基配方被引量：7
- 2018年
- 采用单因素试验和响应面法对冠突曲霉液体培养基进行优化,以子囊孢子浓度为响应值。通过单因素实验确定最佳含水量、氯化钠浓度、接种量分别是10 ml、5%、240μl。使用Design expert 8中的Box-Behnken design(BBD)进行试验设计,采用响应面分析法优化出液体培养基最佳配方是在10 g麸皮的基础上,添加Na Cl 6.13%(0.613 g),9.79 m L无菌水,接种246.48μl浓度为108个/ml"金花"菌孢子悬液,28℃条件下,培养7 d,发酵物浸泡过滤处理得孢子含量达3.51×10~7个/m L。优化后仅用简单、经济的麸皮培养基就能快速培养得到高浓度的金花菌孢子,这些孢子按需求洗脱稀释后即可用于人工接种,这促进了金花菌人工接种发花的普及,同时为培养基的优化提供了参考。
- 周国庆谭玉梅谭玉梅黄永会黄永会刘永翔刘永翔
- 关键词：茯砖茶响应面法发酵剂
- 竹黄菌veA基因全长克隆与序列分析被引量：1
- 2017年
- 为了研究ve A基因在竹黄菌中的调节机制,利用RT-PCR(reverse transcriptase-PCR)、RACE(rapid amplification of c DNA ends)及染色体步移技术克隆获得了ve A基因的全长序列。序列分析显示:该基因序列全长为1 780 bp,其开放阅读框长度为1 104 bp,编码367个氨基酸;其编码的蛋白质分子量为40.887 5 k D,理论等电点p I为8.95,含42个负电荷氨基酸和46个正电荷氨基酸,是一种弱酸性蛋白;序列同源性分析结果显示:该基因编码的蛋白序列与偃麦草核腔菌(Pyrenophora tritici-repentis)的ve A蛋白序列(XM_001933944.1)及异旋孢腔菌(Cochliobolus heterostrophus)的velvet-like protein(JF826791.1)的同源性最高,其identity分别为78%和79%;对该基因编码的蛋白质进行二级结构预测,结果显示:该蛋白α-螺旋(alpha helix)占11.72%,延伸链(extended strand)占24.52%,β-转角(beta turn)占9.54%,无规卷曲(random coil)占54.22%;对其保守结构域分析显示,该蛋白含有一个Velvet superfamily结构域;利用同源模建方法预测其三级结构,结果显示该蛋白的三级结构模型与隔孢腔菌目中其他物种的ve A异源二聚体的相似性为46%。
- 任锡毅魏洪美谭玉梅谭玉梅黄青青
- 关键词：RACE染色体步移
- 冠突曲霉产孢相关基因的克隆及功能分析被引量：1
- 2017年
- 为探究冠突曲霉有性产孢调控的相关机制,从已构建的T-DNA随机插入突变体库中选取有性产孢突变株,采用Southern杂交鉴定T-DNA为单拷贝插入,并用Tail-PCR技术扩增获得T-DNA插入位点侧翼序列,分离获得突变基因。序列分析表明,该基因位于冠突曲霉基因组scaffold 7上,开放阅读框2 511 bp,含有4个内含子,预测编码666个氨基酸,含有NDT80_Pho G蛋白质超级家族保守结构域。BLASTp结果表明,该预测蛋白与Eurotium rubrum p53-like转录因子(EYE95652.1)相似性最高,identity=89%。显微观察发现T-DNA的插入影响了有性产孢结构的发育。本实验为进一步研究该基因在有性产孢过程中的分子功能及可能参与的调控途径奠定基础。
- 王亚萍谭玉梅谭玉梅刘作易
- 关键词：TAIL-PCR
- 运用双向电泳技术分离鉴定冠突散囊菌veA相关蛋白被引量：1
- 2014年
- 为探究冠突散囊菌与veA基因相关的差异表达蛋白,利用双向电泳-质谱技术对冠突散囊菌野生型菌株只产生有性孢子时期、△veA缺失菌株只产生无性孢子时期、△veA缺失菌株既产生无性孢子又产生有性孢子时期的蛋白进行分离和鉴定。结果表明:经检测得到107个功能各异的蛋白点,其中,大多数蛋白与代谢相关,最多的是具有氧化还原功能的蛋白。3种蛋白与产孢和发育有关,包括α-微管蛋白、蛋白磷酸酶2A、真核细胞翻译起始因子3。说明,用双向电泳-质谱技术可以有效地分析冠突散囊菌与veA基因相关的差异蛋白,有助于认识冠突散囊菌的产孢机理。
- 桑石磊谭玉梅葛永怡任秀秀刘永翔刘作易
- 关键词：双向电泳质谱差异蛋白
- 谢瓦氏曲霉间型变种esdC基因的功能分析被引量：4
- 2015年
- 为了研究谢瓦氏曲霉间型变种esd C基因的功能,构建该基因的敲除载体,通过农杆菌介导转化及筛选获得敲除突变体,并对突变体的形态进行了初步分析。生物学特性显示:△esd C突变子的子囊结构与野生型相似,子囊孢子均为球形或近球形,无性发育也与野生型无显著差异。但是,在MYA培养基上培养14d后,△esd C突变体菌落的渗出液相对野生型较少,且无皱褶,菌落表面干燥。这些结果表明esd C基因的缺失对孢子结构的影响不显著,为谢瓦氏曲霉间型变种有性调控机制的研究奠定了技术基础。
- 刘荣谭玉梅刘永翔刘作易
- 关键词：ESDC基因基因敲除功能分析
- 冠突散囊菌有性产孢相关基因的生物信息学分析被引量：3
- 2014年
- 为研究nsdD、esdC及flbA等基因在冠突散囊菌(Eurotium cristatum)中的功能,通过Augustus软件对这3个基因进行重新预测,并利用ExPASy网站中的生物信息分析工具及多序列比对构建系统发育树对这3个基因编码蛋白的性质、结构及其功能进行推测。结果表明:nsdD、esdC及flbA分别编码含有430个、274个和764个氨基酸的蛋白。3个蛋白均不具有信号肽,推测为非分泌蛋白;且均不具有跨膜结构,亚细胞定位发现NsdD和EsdC位于细胞核内,而FlbA可能位于线粒体上;3个蛋白在曲霉中均比较保守。nsdD、esdC和flbA 3个基因均参与冠突散囊菌有性发育的调控。
- 王玉臣谭玉梅刘作易刘永翔
- 关键词：冠突散囊菌NSDD生物信息学
- 香菇菌种生产中木霉侵染过程研究被引量：3
- 2021年
- 贵州香菇菌种生产过程中菌棒受侵染问题十分严重,为查清侵染香菇菌棒的病原及其对香菇菌丝的侵染过程,以贵州5个香菇菌种生产基地分离获得形态相似的菌株(编号:GZCC 21-0004)为实验材料,对其进行研究。结果表明,结合形态学特征和分子生物学将该菌株鉴定为哈茨木霉(Trichoderma harzianum)复合种下的Trichoderma lentinulae;通过平板对峙、载玻片对峙以及代谢物抑制作用等实验研究该木霉侵染香菇菌丝过程,发现T.lentinulae侵染香菇菌丝分5个步骤:贴附生长、缠绕包裹、分泌色素、顶端破裂、中空皱缩;代谢物抑制实验结果显示,T.lentinulae菌丝、代谢产物以及挥发产物对香菇菌丝的抑制率分别为51%、57%、82%,其中挥发性产物的抑制率最高。
- 王莹刘作易冯瑶刘永翔谭玉梅
- 关键词：木霉香菇侵染
- 曲霉生长发育相关基因及分子调控机制的研究进展
- 2016年
- 随着分子生物学,基因组学和生物信息学等的快速发展,近年来模式菌株构巢曲霉和其他曲霉生长发育的相关基因及分子机制研究逐步深入。为曲霉(Aspergillus)生长发育分子生物学研究提供参考,对曲霉的应答环境条件光、营养和渗透压、参与交配过程、信号传导通路、转录因子及其他调节蛋白、内源性生理学过程、有性发育晚期产生子囊孢子过程等7个方面生长发育的相关基因及分子机制的研究进行了综述。
- 余春芳王玉臣谭玉梅刘永翔吴文琴
- 关键词：曲霉基因敲除基因超表达
