王可耕
- 作品数：28 被引量：166H指数：8
- 供职机构：南华大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金湖南省普通高等学校教学改革研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- pcDNA3.1/SjDLC和pcDNA3.1/mIFN-γ重组质粒构建及表达
- 2017年
- 目的构建日本血吸虫动力蛋白轻链DNA疫苗和小鼠干扰素真核表达质粒,研究其在HeLa细胞及动物体内的表达。方法设计特异性引物,PCR扩增获取动力蛋白轻链(SjDLC)与干扰素-γ(IFN-γ)基因,克隆于pcDNA3.1真核质粒,经双酶切及测序鉴定。将两种重组质粒分别转染至HeLa细胞,Western blot鉴定其表达。真核质粒经左腿股四头肌免疫小鼠,在末次免疫2周后,PCR法检测小鼠肌组织内SjDLC和IFN-γ基因,免疫组织化学法检测基因的表达,MTT法检测T细胞增殖水平。结果 PCR和双酶切能检测到280 bp的SjDLC基因及480 bp的IFN-γ基因;Western blot显示在12 kDa和19 kDa处有阳性反应条带,与SjDLC和IFN-γ分子量大小一致,两种基因能在HeLa细胞中表达。PCR及免疫组化显示两种基因能在小鼠肌肉组织中存在和表达。MTT法显示两种质粒均能刺激T细胞增殖。结论成功构建pcDNA3.1/SjDLC和pcDNA 3.1/mIFN-γ真核质粒,两种质粒能在HeLa细胞和动物体内表达。
- 高勇强阳青兰胡丽胡丽梁瑜刘彦张愉快王可耕
- 关键词：DNA疫苗干扰素-Γ
- 日本血吸虫微管蛋白基因的获得和分析
- 2004年
- 目的从日本血吸虫(schistosoma japonicum，Sj)成虫cDNA文库中获得并分析日本血吸虫新的表达基因，为日本血吸虫病的防治提供药物靶标或侯选疫苗。方法构建日本血吸虫成虫cDNA文库，随机挑取重组阳性克隆进行测序，对部分序列进行步移法测序获取全长cDNA，并进行生物信息学分析和登录。结果获得了1个日本血吸虫新基因，全长1439bp，编码443个氨基酸，与肝片形吸虫微管蛋白基因具有79％的同源性。结论表达序列标签法、步移法测序和生物信息学技术三者相结合，有利于发现日本血吸虫新基因。
- 廖力肖建华王可耕曾桥梁瑜杨秋林
- 关键词：日本血吸虫公共卫生菌种基因序列
- 临床寄生虫学与检验课程三位一体教学平台的应用被引量：4
- 2014年
- 以教研室为中心,有机整合校内实验环节(实验室)和校外实践环节(实践基地),形成由校内、校外共同组成的、面向全体学生的、多角度、多层面的三位一体教学平台,增强学生主动获取知识、综合运用知识的能力,切实促进创新能力及实践能力的提高。
- 刘彦王可耕唐双阳张愉快邹菊梁瑜
- 关键词：实验教学
- 环介导等温扩增技术检测间日疟原虫的研究被引量：13
- 2008年
- 目的应用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术检测间日疟原虫(Plasmodi-umvivax,P.V)。方法酚氯仿法提取P.V基因组DNA,设计4条扩增P.V环子孢子蛋白基因的LAMP引物,以恶性疟原虫、弓形虫、人全血DNA为对照,进行LAMP,LAMP产物经显色、电泳鉴定。将P.V血样用健康人血稀释为1.5×10-3、1.5×10-4、1.5×10-5、1.5×10-6、1.5×10-7、1.5×10-86个浓度后进行LAMP,检测其敏感性。结果P.VLAMP扩增产物检测管显色后呈阳性,对照组均阴性。P.VLAMP产物电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组均无扩增条带。LAMP检测P.V的敏感度为1.5个疟原虫/107RBC。结论检测间日疟原虫的LAMP方法敏感、特异,简便。
- 杨秋林许丽芳张愉快王可耕
- 关键词：环介导等温扩增技术
- 分层次开放实验室 优化实验课程体系 提高医学生科研创新能力被引量：22
- 2011年
- 分析传统病原生物学实验教学弊端,阐述了实验课程对医学生科研创新能力培养的重要性。以省级示范实验室建设为依托,充分利用现有实验教学资源,优化实验课程体系,分层次开放实验室,拓展实验教学内容,创新实验教学手段,促进医学生实验课程教学改革,培养学生创新意识和科研能力,积极探索新型科研创新型医学人才的培养模式。
- 唐双阳李乐余敏君张愉快胡四海王可耕粟盛梅
- 关键词：课程体系
- 灵芝孢子与肝吸虫卵的鉴别及意义被引量：1
- 2004年
- 南华大学附一医院检验科，在给一位直肠癌病人术后吻合口瘘引流液进行显微镜检查时，发现一些极似肝吸虫(华支睾吸虫)卵样的有形物，于是送我中心进行确诊。我们首先在显微镜下仔细观察和比较鉴别，然后查阅相关资料和询问病史(正在服用“中华灵芝宝”药物)，确认该“有形物”是未“
- 张愉快伍和平梁瑜廖力刘传爱王可耕杨秋林
- 关键词：灵芝孢子肝吸虫卵毛蚴灵芝孢子
- 阔叶丰花草的化学成分研究被引量：1
- 2017年
- 目的:研究阔叶丰花草的化学成分。方法:采用多种柱色谱方法进行分离纯化,运用ESI-MS、1HNMR、13C-NMR等波谱方法结合理化性质确定化学结构。结果:从阔叶丰花草中分离得到9个化合物,分别鉴定为:3-吲哚甲醛(1)、3-吲哚甲酸(2)、6-羟基-5-甲氧基吲哚(3)、吲哚-3-甲酸甲酯(4)、9H-pyrido[3,4-b]indole-1-methanol(5)、催吐萝芙木醇(6)、morindolide(7)、2,2-dimethyl-4-hydroxy-6-oxoheptanoic acid lactone(8)、黑麦草内酯(9)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。
- 申海艳罗应唐双阳唐双阳王五洲王可耕王可耕
- 关键词：分离纯化化学成分
- 日本血吸虫琼脂-石蜡双包埋纵向切片的制备被引量：4
- 2012年
- 将日本血吸虫用双层琼脂预包埋后制作琼脂块,利用乙醇、异丁醇和正丁醇脱水,石蜡包埋后常规切片、脱蜡,即可进行各种染色步骤。该法可获得完整的纵向虫体连续切片,且容易对预定切面进行准确定位。
- 王可耕曾庆仁张愉快周军蔡力汀梁瑜刘彦
- 关键词：日本血吸虫
- 弓形虫RH株膜蛋白P30的原核表达与鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的在E.coli中表达弓形虫RH株膜蛋白P30。方法将P30基因定向克隆到pET28b,构建含目的基因的pET28b-P30重组质粒,转化E.coliBL21(DE3),接种含pET28b-P30的BL21(DE3)单菌落于LB培养基,1∶100稀释后用0.2mmol/L的IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot鉴定诱导表达产物。结果1构建了重组质粒pET28b-P30,2在E.coli中表达了一分子量约为30kDa的融合蛋白,经Westernblot鉴定正确。结论在E.coli中高效表达了弓形虫RH株膜蛋白P30,并以包涵体形式存在。
- 蔡亮杨秋林伍和平刘传爱王可耕张愉快
- 关键词：弓形虫表面抗原P30
- PBL教学模式在人体寄生虫学理论教学中的运用被引量：11
- 2018年
- 问题中心式学习法(problem-based learning,PBL)是现代医学教育中不同于传统教学模式的一种全新的教学模式,该教学模式以其独特的优越性在国外医学教育改革中取得了重要成效。文章介绍了PBL教学模式在人体寄生虫学理论教学中的运用,研究并探讨在人体寄生虫学教学中推行PBL教学方法的可能性。
- 王可耕梁瑜邹菊李忠玉陈熙刘彦
- 关键词：人体寄生虫学教学模式
