樊金萍
- 作品数:29 被引量:66H指数:5
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学更多>>
- 中国6省市人细小病毒B19流行病学调查
- 背景人细小病毒B19是细小病毒属的成员,是唯一对人类有致病性的细小病毒。B19的传播途径除了通常的呼吸道和母婴垂直传播外,也可通过输血或血液制品的输注而感染。2004年欧盟开始对生产人用抗D免疫球蛋白的血浆库以及经过病毒...
- 樊金萍林林李少春耿彦生李秀华孟淑芳
- 关键词:人细小病毒B19流行病学
- 文献传递
- 戊型肝炎病毒ORF2N-端和C-端多肽的抗原性分析被引量:7
- 2010年
- 目的分析戊型肝炎病毒(HEV)ORF2N-端和C-端多肽的抗原性。方法以纯化的4型HEVORF2N-端1~124aa多肽pS4-1和4型HEVORF2C-端385~674aa多肽pS4-6分别包被微孔板,采用间接酶联免疫法(EIA)检测感染HEV的猴系列血清中的抗HEVIgG抗体,分析两种多肽的抗原性,并与进口试剂的检测结果进行比较。结果在感染HEV的猴系列血清中,针对HEVORF2N-端抗原的抗体产生时间早,持续时间短,其峰值与转氨酶(ALT)的峰值几乎重叠;针对HEVORF2C-端抗原的抗体在HEV感染早期产生的滴度较低,但逐渐升高,在14周的观察期内,抗体滴度几乎无下降趋势。用两种多肽检测HEVIgG抗体的灵敏度均高于进口试剂。结论两种多肽均具有较好的抗原性,但在HEV感染的不同时期,其反应性不同。
- 马红霞宋晓国黄维金樊金萍赵晨燕孔维王佑春
- 关键词:戊型肝炎病毒ORF2多肽抗原性IGG
- 生物制品中猪细环病毒污染检测方法的建立和初步应用被引量:3
- 2015年
- 目的:建立生物制品中猪细环病毒( Torque teno sus virus,TTSuV)污染的检测方法,并进行方法学分析及初步的应用。方法针对TTSuV保守序列设计引物和探针,建立荧光PCR方法,对方法的特异性、线性、精密度、最低检测限等参数进行验证,并对试验样本对检测的干扰性进行分析。利用该方法对猪全血样品、生产用细胞及轮状病毒疫苗样品进行检测,通过建立TTSuV分型检测的PCR方法对阳性样品进行分型。结果荧光PCR法的特异性较好,与不同种属的细小病毒、猴SV40病毒及猪圆环病毒无明显的交叉反应,TTSuV1和TTSuV2荧光PCR分别在109~103拷贝/μl和109~102拷贝/μl范围内线性较好,R2值达到0.993以上,TTSuV1和TTSuV2的最低检测限分别为1×103拷贝/μl和1×102拷贝/μl,试验内和试验间的Ct的精密度CV值均小于7%,试验内病毒拷贝数的CV值小于25%,试验间CV值小于45%。细胞样品成分对病毒检测无明显的干扰性。对20份猪全血样品进行检测,8份为阳性,其中1份为TTSuV1阳性,4份为TTSuV2阳性,3份为TTSuV1/2混合感染。 TTSuV1和TTSuV2型与标准株序列同源性分别为98%~99%和98%。对细胞样品和轮状病毒疫苗进行检测,结果均为阴性。结论成功建立了TTSuV荧光PCR检测法,能够用于生物制品TTSuV污染的检测,进一步提高了生物制品的安全性。
- 吴雪伶赵龙冯建平樊金萍赵翔孟淑芳
- 关键词:荧光PCR细胞
- 戊型肝炎病毒4型ORF2片段在昆虫杆状病毒表达系统中的表达
- 戊型肝炎病毒(HEV)为无包膜的单股正链 RNA病毒,基因组全长约7200bp,有3个开放读码框架(ORFs):ORF1、ORF2和ORF3。感染哺乳动物的HEV主要有4个基因型,只有一个血清型。 昆虫杆状病毒表达系统...
- 樊金萍
- 关键词:戊型肝炎病毒昆虫杆状病毒表达系统结构蛋白病毒样颗粒
- 流感疫苗生产用新型细胞基质 MDCK细胞的质量控制研究被引量:6
- 2013年
- 目的:对流感疫苗生产用新型细胞基质MDCK细胞进行全面地质量控制检测,并对检测项目及结果进行汇总和分析。方法根据《中国药典》三部,对待检MDCK细胞进行细胞鉴别、内、外源因子和致瘤性检测,同时根据国际新要求对MDCK细胞的裂解物及细胞DNA的致癌性进行检测。结果待检MDCK细胞为贴壁、上皮样细胞形态,犬细胞来源,平均染色体数为80±1;未发现细菌、真菌、支原体污染,内、外源病毒的污染检测结果显示,待检细胞中未发现有致细胞病变、产生血吸附、血凝或致动物死亡的非特异性病毒,逆转录病毒、牛源性病毒和犬特异性病毒检测均为阴性;取107个活细胞接种每只裸鼠,观察12周后,接种部位未发现结节,大体解剖显示主要脏器亦未出现结节,病理检查显示与对照组无明显差异,细胞未显示具有致瘤性。以等量细胞的裂解物和细胞DNA接种裸鼠,均未致裸鼠产生结节,病理检查结果与对照组无明显差异,提示细胞未显示致癌性。结论待检MDCK细胞具有生产流感疫苗的潜在可能性。
- 吴雪伶冯建平樊金萍李秀华付瑞孟淑芳
- 关键词:MDCK细胞鉴别
- STR图谱分析方法扩大用于人源细胞的鉴别研究被引量:5
- 2010年
- 目的采用短串联重复序列(STR)图谱分析的方法,建立本所细胞库中所有人源细胞的鉴别图谱,并进行细胞交叉污染及细胞误判现状分析的研究。方法采用16个位点的STR图谱分析方法,检测本所细胞库中所有收集保存的及其他单位来源的共计61株人源细胞,并将STR图谱检测结果与目前国际细胞库公布的数据进行比对,分析细胞的正确性及交叉污染情况。对未检出信号的细胞株,采用同工酶法对细胞的种属进行鉴别。结果被检测的61株细胞中,41株细胞呈现特征性STR图谱,不存在与其他细胞的交叉污染现象,其中36株细胞与ATCC或JCRB保存的同一名称细胞在相应的9个STR位点的数据完全一致,5株细胞均仅在vWA位点与ATCC数据不完全相同,可判定为正确细胞;7株细胞尚无国际可比对数据,但STR图谱特异,可认定为新建细胞。11株细胞(占18.0%)被鉴定为错误的细胞,其中舌癌细胞Tca8113及肝癌细胞HHCC(现更名为FHCC98)的STR图谱数据分别与HeLa及HeLa S3细胞的数据完全一致;2株HuT-102的数据与ATCC的数据完全不同;4株细胞未检测到信号,同工酶结果显示均为鼠源细胞;同时还发现2株细胞为交叉污染细胞。结论细胞误判及细胞交叉污染现象较为严重,正确鉴别细胞,特别是对国内自建细胞重新鉴定,对保证科学研究的可信性及可重复性极为重要。
- 吴雪伶冯建平吴瑜樊金萍孟淑芳李德富
- 关键词:细胞鉴别交叉污染
- 广西地区野鼠戊型肝炎病毒感染情况调查被引量:8
- 2008年
- 从广西壮族自治区5个市采集256份野鼠肝脏和对应的血清211份,采用HEV抗体(HEV-Ab)酶联免疫试剂盒(双抗原夹心法)对血清样本进行抗-HEV检测,并对不同地区HEV抗体阳性率进行χ2检验。采用HEV核酸荧光PCR试剂盒对肝脏样本进行HEV核酸检测。结果显示,211份野鼠血清抗-HEV的抗体阳性率为6.6%,其中百色市的抗体阳性率最高,为14.1%,其他地区抗体阳性率均在10%以下。256份野鼠肝脏中未检测到HEV核酸。由此可见,广西壮族自治区5个市的野鼠中存在HEV感染,但其是否为HEV的自然宿主及在戊型肝炎传播中起何作用需进一步研究。
- 樊金萍李艳萍宋爱京李荣成杨进业王佑春
- 关键词:戊型肝炎病毒抗体阳性率野鼠
- 戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒及其制备方法和应用
- 本发明涉及一种戊型肝炎病毒的蛋白颗粒,具体的讲,涉及戊型肝炎病毒4型ORF2片段的病毒蛋白颗粒,肝炎病毒蛋白颗粒的重组表达载体、宿主细胞、抗体,肝炎病毒蛋白颗粒、抗体和核苷酸序列的应用,表达方法以及其制备方法和应用。本发...
- 王佑春樊金萍黄维金赵晨燕
- 文献传递
- 湖北地区人畜共患病戊肝病毒在不同人群中的流行病学研究
- 2008年
- 目的调查湖北地区不同人群中戊型肝炎病毒(HEV)感染情况和流行特征,为控制HEV在人畜间的传播提供依据。方法采集养猪场从业人员472人,屠宰场从业人员313人,农民168人,农民工300人,义务献血员500人和学生98人的血清样品共计1 851份。用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测抗-HEV IgG抗体,用统一制定的流行病学调查表进行分析。结果养猪场从业人员和农民中抗-HEV抗体阳性率分别为55.72%和53.57%,明显高于屠宰场从业人员、农民工、学生和义务献血人员中的阳性率,分别为31.63%,30.67%,27.55%和33.40%,且差异有统计学意义,(x^2=44.19,P<0.01)。养猪场和屠宰场从业人员从业年限在10年以下和10年以上的抗- HEV抗体阳性率差异均有统计学意义(P<0.05)。养猪场和屠宰场从业人员、农民及农民工的抗-HEV抗体阳性率均与年龄有关,其中养猪场从业人员、农民和农民工的抗-HEV抗体阳性率均随年龄的增长呈上升趋势。结论与猪特别是与幼猪接触越密切以及强度越大的人群,其抗-HEV抗体阳性率也越高,提示猪是HEV的主要传染源之一。
- 刘小桂李秀纪陈平宋爱京罗静樊金萍罗一红刘利铭赵晨燕章金刚牛丽莉王汉华许四宏王佑春
- 关键词:戊型肝炎病毒抗体流行病学
- Q61R和V112A突变的HRAS基因在NIH小鼠体内诱发肿瘤的实验研究被引量:1
- 2019年
- 目的:分析含有HRAS(V112A)基因及其G12C、G13C、Q61R和G12C/G13C/Q61R突变体的质粒DNA在NIH小鼠体内的致癌性。方法:从人结肠癌DiFi细胞中扩增含有V112A突变的HRAS(V112A)基因,采用PCR点突变法在HRAS(V112A)中分别引入G12C[HRAS(V112A/G12C)]、G13C[HRAS(V112A/G13C)]、Q61R[HRAS(V112A/Q61R)]或3位点联合突变[HRAS(V112A/G12C/G13C/Q61R)],将HRAS(V112A)及上述突变基因克隆入真核表达载体pCDNA3.1(+),Western blot确证HRAS(V112A)及各突变体可体外表达后,每种质粒按每只100μg剂量皮内注射6~8周龄雌性NIH小鼠,阴性对照组注射PBS,每组8只小鼠,持续观察小鼠致瘤情况。注射后4个月,取小鼠瘤样组织分别采用PCR和Western blot方法检测病变组织中的HRAS基因及其表达产物。结果:从DiFi细胞中成功扩增出含有V112A突变的HRAS(V112A)基因,并构建4个突变体,体外转染结果表明各HRAS均可在L929细胞中表达。重组质粒注射小鼠后,HRAS(V112A)组有4只小鼠注射后4个月于注射部位出现增生样改变,该病变在1个月后自愈;HRAS(V112A/Q61R)组有1只小鼠于注射后4个月出现明显的瘤样增生。至观察期末,HRAS(V112A/G12C)、HRAS(V112A/G13C)和HRAS(V112A/G12C/G13C/Q61R)组小鼠均未出现可见增生样结节。病变组织的PCR和Western blot检测结果表明HRAS(V112A)组小鼠增生样组织和HRAS(V112A/Q61R)组小鼠肿瘤组织中均有对应的HRAS基因存在和表达。结论:HRAS(V112A)可在NIH小鼠体内导致注射部位皮肤的增生样改变,含有Q61R突变的HRAS(V112A)可在NIH小鼠体内诱导肿瘤形成,含有G12C、G13C及G12C/G13C/Q61R突变的HRAS(V112A)在小鼠体内不会引起明显病变。
- 张峰赵龙樊金萍吴雪伶孟淑芳
- 关键词:HRAS点突变致瘤性