林涛
- 作品数：11 被引量：4H指数：2
- 供职机构：南京工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程建筑科学更多>>
- 天冬氨酸转氨酶基因工程菌的活力与表达的比较
- ＜正＞ 酶法制备是L-苯丙氨酸生产的重要途径,高活力、耐高底物浓度的天冬氨酸转氨酶（AspAT）是高效转化的关键。常规菌株产酶表达量较低,本文采用基因工程的方法,构建出AspAT高表达的基因工程菌。本文以质粒pUC18为...
- 吴群林涛李霜何冰芳
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- 质粒高通量快检方法的改进
- ＜正＞ 质粒作为基因工程的重要载体,对它的鉴定和分析方法的探索一直吸引着许多科学家的注意。其中琼脂糖凝胶电泳的方法己成为快速鉴定和分析质粒的基本方法。在此基础上,Wayne M.Barnes发明了牙签法小量制各和鉴定质粒...
- 曹学松林涛李霜欧阳平凯何冰芳
- 文献传递
- 利用海因酶转化5-苄基海因制备D-N-氨甲酰苯丙氨酸的实验研究
- D-N-氨甲酰氨基酸是酶法制备具有光学活性的D-氨基酸的重要中间产物.本文利用自行筛选的Pseudomonas sp.js-01菌发酵产酶,得到具有高海因酶活性的菌体,以游离细胞进行了催化DL-苄基海因的水解制备D-N-...
- 林涛韦萍屠春燕姚忠欧阳平凯
- 关键词：海因酶D-氨基酸
- 文献传递
- 高渗漏型AspAT基因工程菌诱导表达的研究被引量：2
- 2007年
- 利用异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导有高渗漏表达现象的天冬氨酸转氨酶(AspAT)工程菌,研究是否可以在这一类基因工程菌中提高酶的产量及活性。在观察IPTG诱导后菌体生长的同时,观察不同的时间及条件下酶活性的变化,发现插入含有天冬氨酸转氨酶基因(AspC,1.2kb)的pUC18质粒的BL21(DE3)在较高渗漏表达的情况下,用IPTG 37℃诱导培养8 h后酶表达开始升高,12 h后趋于稳定表达;同时发现用0.1 mmol/L IPTG诱导后酶的活性提高最多,比未诱导前提高一倍以上。研究认为如果培养条件恰当这类菌应该可以用IPTG诱导高效表达目的酶蛋白。
- 张宏志林涛严明许琳
- 关键词：天冬氨酸转氨酶基因工程菌
- 天冬氨酸转氨酶在大肠杆菌中的分泌表达
- ＜正＞ L-苯丙氨酸（K-Phe）是氨基酸输液和氨基酸饮膳所必须的成分,也是合成一些抗癌药物的中间体和良好载体,特别是作为甜味剂阿斯巴甜的前体,具有巨大的市场潜力。L-苯丙氨酸的生产方式中酶法生产占有主导地位。天冬氨酸转...
- 李霜张宏志林涛何冰芳
- 文献传递
- L-苯丙氨酸酶法制备中的动力学研究
- 2007年
- 为研究酶法生产L-苯丙氨酸工艺中影响收率的主要因素，提高L-苯丙氨酸的收率，对该反应过程的动力学进行了研究。研究中采用实验检测和动力学模拟的方法获取了转化反应中的主要动力学参数。研究这些参数和L-苯丙氨酸收率间的关系发现，达到L-苯丙氨酸最大收率的前提条件是草酰乙酸的浓度趋近于0。在此前提条件下，将苯丙酮酸的浓度选在0．10～0、15mol／L，提高体系中酶活性，降低苯丙酮酸的降解常数，可以提高体系中L-苯丙氨酸的收率。以此规律为指导，构建了合适的基因工程菌，其转氨酶活性提高4．6倍，苯丙酮酸的降解常数降低到0．0158h^-1，选择c（苯丙酮酸）=0．137mol／L充N2的条件下进行反应，其L-苯丙氨酸收率提高到90．2％。
- 林涛张宏志严明欧阳平凯许琳
- 关键词：动力学天冬氨酸转氨酶L-苯丙氨酸生物工程
- 分子改造方法提高大肠杆菌天冬氨酸转氨酶热稳定性的研究
- 酶具有反应活性高、专一性强、反应条件温和的特点，因而被广泛应用于工业和医药领域。但是它自身稳定性差和来源有限等缺点，限制了它进一步的开发和利用，所以需对天然酶分子改造，以满足实际应用的需要。目前通过分子改造来改善酶的性质...
- 林涛
- 关键词：大肠杆菌天冬氨酸转氨酶热稳定性生物技术
- 建筑工程项目安全评价技术体系研究
- 建筑业是我国国民经济的支柱产业之一，我国经济发展迅速，建筑工程项目为国民经济的发展奠定了物质基础。近几年随着国民生活水平的提高，对生活品质的要求不断加大，我国的基础设施建筑工程项目、住宅建筑工程项目的数量逐年上涨。但是由...
- 林涛
- 关键词：建筑工程项目安全评价事故预防
- 一步法快速质粒鉴定方法被引量：2
- 2005年
- 对《分子克隆实验指南》(第三版)中的牙签法小量制备质粒DNA的方法做了改进,减少了 加样次数,免去冰浴、离心等步骤,改进后的方法在琼脂糖凝胶电泳前仅需一步加样和加热过程, 提高了实验效率。同时结合使用多孔道移液器和96孔板,更适合于在高通量筛选中鉴定阳性克 隆。实验对改进后的方法与《分子克隆实验指南》上的方法进行了比较,表明“一步法”的检测效 果、准确率与重复性均有到较好的结果。
- 林涛曹学松李霜何冰芳
- 关键词：高通量筛选
- 一种提高蛋白质生物学功能的方法
- 本发明涉及一种提高蛋白质生物学功能的方法。该方法采用常规的蛋白质合理设计的方法确定与蛋白质生物学功能相关的功能区；再用随机变化的引物片段替换与蛋白质生物学功能相关的功能区的基因，用常规基因工程方法构建突变基因库；然后进行...
- 严明许琳林涛欧阳平凯
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