杨馥如
- 作品数：15 被引量：9H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划更多>>
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- 密码子优化的甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗在小鼠体内免疫保护效力研究
- 2012年
- 为了提高甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗的免疫原性,本研究将流感病毒rPan09（HA和NA来自A/California/04/09,其余6个片段来自PR8的重组病毒）的HA基因通过人工合成的方法将其密码子优化为哺乳动物体内偏嗜性密码子opti-HA,同未优化的rPan09的HA基因分别与真核表达载体pCAGGS连接构成重组质粒pCA-optiHA和pCA-HA转染293T细胞,48 h后采用间接免疫荧光的方法检测HA基因的体外表达情况,结果显示重组质粒pCA-optiHA的蛋白表达量明显高于pCA-HA。为评价这两种重组质粒的免疫及保护效力,选取6~8周龄雌性BALB/c小鼠,将质粒pCA-HA、pCA-optiHA以100μg/只的剂量,进行后腿肌肉多点注射,同时设立空载体pCAGGS对照,共免疫3次,每次间隔2周。结果表明DNA疫苗pCA-optiHA可显著提高小鼠的体液免疫和细胞免疫应答水平。三免2周后用107.45EID50的rPan09采用滴鼻方式进行攻毒,用Real-time PCR及制作肺组织石蜡切片检测DNA疫苗的保护效力。结果表明,pCA-optiHA免疫组的保护效力明显高于pCA-HA免疫组。本研究为进一步研究和设计有效的甲型流感病毒DNA疫苗奠定了基础。
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红温峰周艳君童光志
- 关键词：甲型H1N1流感病毒HA基因密码子优化DNA疫苗
- H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立
- 利用RT-PCR技术扩增猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)的8个基因片段，分别克隆到双向转录表达载体PBD上，构建出8个能在哺乳细胞中复制和表达的质粒，纯化质粒，将8个质粒共转染293T细胞...
- 黄梦于海周艳君李泽君马继红杨馥如童光志
- 关键词：猪流感病毒反向遗传操作技术致病机理疫苗
- H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立被引量：3
- 2011年
- 利用RT-PCR技术扩增猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)的8个基因片段,分别克隆至双向转录表达载体PBD上,构建出8个能在哺乳细胞中复制和表达的质粒。将8个质粒共转染293T细胞,收取转染48 h时的细胞上清并接种9～11日龄SPF鸡胚,成功拯救出有血凝活性的病毒。经序列测定,确定拯救病毒的8个基因片段均来自猪流感病毒A/swine/Shanghai/1/07(H1N2)基因组。H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的成功建立为猪流感病毒致病机理、传播机制及病毒基因功能的研究奠定了基础;同时,为H1N2亚型猪流感新型疫苗的研制开辟了新的途径。
- 黄梦于海周艳君李泽君马继红杨馥如童光志
- 关键词：猪流感反向遗传操作技术
- H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究
- 引言H1亚型猪流感(swine influenza,SI)是由隶属于正粘病毒科A型流感病毒属的猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)引起的猪呼吸道疾病,是目前危害全世界养猪业的重要呼吸道疾病之一...
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红周艳君童光志
- 文献传递
- H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究被引量：2
- 2011年
- DNA疫苗的免疫效果与抗原基因的表达量及表达抗原的免疫原性有直接关系。为了提高猪流感病毒（Swine influenza virus，SIV）HA基因DNA疫苗的表达量，增强其免疫效果，本研究通过人工合成的方法将H1亚型猪流感病毒A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）的HA基因密码子优化为猪体内偏嗜性密码子optiHA，同野生型A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）的HA基因分别与真核表达载体PCAGGS连接构成重组质粒PCAGGS—optiHA和PCAGGS—HA，然后分别转染293T细胞，48h后采用间接免疫荧光的方法检测Ⅲ基因的瞬时表达蛋白情况。将质粒PCAGGS—HA、PCAGGS—optiHA以100μg／只的剂量，采用后腿肌肉多点注射的方式，免疫6-8周龄雌性BALB／c小鼠，同时设立空载体PCAGGS对照。共免疫3次，每次间隔2周，三免2周后对每组以10^3.87 EID50的A／Swine／Guangdong／1／01（H1N1）进行攻毒。采用ELISA、血凝抑制试验、细胞因子检测和肺组织病毒含量测定等实验评价这两种DNA疫苗的免疫效果。结果表明，HA基因密码子优化的DNA疫苗可显著提高体液免疫和细胞免疫的应答水平，攻毒后免疫组PCAGGS—optiHA的保护效力明显高于免疫组PCAGGS—HA。这一结果为进一步研究和设计有效的SIVDNA疫苗奠定了基础。
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红周艳君童光志
- 关键词：猪流感病毒HA基因密码子优化
- 利用CRISPR-dCas9系统促进脂肪干细胞的成骨诱导分化
- 2019年
- 为了建立一种快速促进脂肪间充质干细胞成骨诱导分化的方法,本研究利用CRISPR-dCas9系统快速激活成骨前体基因的表达,通过对细胞内前体基因转录的检测和诱导分化后茜素红染色来确定成骨诱导分化的效率。结果可见,通过CRISPR-dCas9系统可以快速地启动RUNX2和OSX基因的转录;经成骨诱导分化后茜素红染色显示,基因编辑过的细胞成骨诱导更快。本研究结果表明,通过CRISPR-On系统可以有效地促进成骨前体细胞相关基因RUNX2和OSX的表达,从而使得骨前体细胞相关基因可以被快速地内源性激活,使得脂肪间充质干细胞快速进入成骨诱导分化状态,促进成骨分化的潜能。
- 杨馥如杨馥如王学智
- 关键词：脂肪干细胞成骨诱导分化
- H1亚型猪流感病毒HA基因密码子优化的DNA疫苗免疫保护效力研究
- 目的：采取对免疫原基因进行密码子优化来提高DNA疫苗的免疫原性。方法：免疫6-8周龄雌性BALB/c小鼠，对小鼠进行免疫，共三次，每次间隔 2w，三免二周后以103.87E1D50的A/Swine/Guangdong/1...
- 杨馥如于海王斌黄梦马继红周艳君童光志
- 关键词：免疫效力
- M2e合成肽猪流感病毒通用疫苗及其应用
- 本发明公开了一种M2e合成肽猪流感病毒通用疫苗，该疫苗用分支肽将A型流感病毒M2蛋白N端保守的23个氨基酸序列与通用型辅助性T细胞表位进行连接。本发明还公开了该疫苗在制备预防或治疗猪流感的药物中的应用。本发明的M2e合成...
- 童光志于海杨馥如马继红周艳君
- 文献传递
- H1N2亚型猪流感病毒反向遗传操作系统的建立
- 引言猪流感(swine influenza)是由A型流感病毒引起的,广泛存在猪群中的一种严重的猪呼吸系统疾病。一直以来,由于猪流感单独感染不会在猪群大规模的流行和也不引起猪群的死亡,猪流感的在临床上一直没有引起广泛的重视...
- 黄梦于海周艳君李泽君马继红杨馥如童光志
- H1亚型流感病毒通用疫苗的构建及免疫保护效力研究
- 猪流感（swine influenza, SI）是由隶属于正黏病毒科的猪流感病毒（swine influenza virus, SIV）引起的猪急性高度传染性疾病。主要临床症状表现为体温升高、食欲不振、呼吸困难、咳嗽、流...
- 杨馥如
- 关键词：HA基因密码子优化
- 文献传递
