喻小兰
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
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- 黄芩素对宫颈癌细胞凋亡的影响被引量：3
- 2015年
- 目的观察不同浓度的黄芩素干预宫颈癌He La细胞后细胞迁移及细胞周期的变化,观察细胞培养基中具有活性的金属基质蛋白酶-2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)的变化,及MMP-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP2)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2 m RNA及蛋白水平表达的变化。方法体外黄芩素干预Hela细胞株24 h,分不含黄芩素的无血清DMEM高糖培养基培养的细胞为空白对照组,无血清DMEM高糖细胞培养基中加入终浓度为100μmol/L的黄芩素为100μmol/L组,无血清DMEM高糖细胞培养基中加入终浓度为200μmol/L的黄芩素为200μmol/L组,共3组。镜下观察各组细胞形态及数量的变化、细胞迁移实验检测细胞迁移的改变、流式细胞技术法检测细胞周期发生的变化、RT-PCR法及Western blot法检测MMP-2、MMP-9、TIMP2、Cyclin D1、Bax、Bcl-2 m RNA及蛋白水平的表达变化。结果黄芩素干预24 h后,与空白对照组比较,两干预组细胞周期G1期受阻滞,阻滞程度与黄芩素干预浓度一致(P<0.05),细胞迁移受抑制,随着黄芩素浓度逐渐增加,迁移距离逐渐减少(P<0.05),MMP-2、MMP-9活性受到抑制,抑制程度与黄芩素浓度呈正相关(P<0.05),MMP-2、MMP-9、Cyclin D1、Bcl-2的m RNA及蛋白表达随黄芩素干预浓度增加,呈逐渐降低的趋势(P<0.05),TIMP2、Bax的m RNA及蛋白表达趋势随黄芩素浓度增加而逐渐增强(P<0.05)。结论黄芩素干预宫颈癌He La细胞,通过阻滞细胞周期G1期,抑制MMP-2、MMP-9活性,上调TIMP2、Bax的表达,下调MMP-2、MMP-9、Cyclin D1、Bcl-2的表达,促进He La细胞的凋亡。
- 卢科莲喻小兰夏纪毅张宇骄毛熙光
- 关键词：黄芩素宫颈癌HELA细胞金属基质蛋白酶-2金属基质蛋白酶-9细胞周期蛋白D1
- 黄芩素通过抑制ERK通路下调HeLa细胞中基质金属蛋白酶的表达被引量：4
- 2014年
- 目的观察不同浓度黄芩素处理宫颈癌细胞后,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)与基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9 mRNA及蛋白水平表达的变化。方法体外培养HeLa细胞株,分为空白对照组、100μmol/L、200μmol/L黄芩素处理组,培养24 h。明胶酶谱法检测上清液中MMP-2、MMP-9的活性变化。反转录PCR法检测ERK1/2及MMP-2、MMP-9的mRNA水平的表达变化。Western blot法检测ERK1/2、p-ERK1/2及MMP-2、MMP-9的蛋白水平的表达变化。结果黄芩素处理24 h后,与空白对照组相比较,MMP-2、MMP-9的活性变化逐渐降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白表达随着黄芩素浓度的增强逐渐降低(P<0.05)。结论黄芩素通过激活ERK1/2信号通路下调MMP-2、MMP-9的表达。
- 喻小兰卢科莲夏纪毅毛熙光
- 关键词：黄芩素宫颈癌细胞MMP-2细胞外信号调节激酶1
- 黄芩素对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用及机制探讨被引量：9
- 2014年
- 目的观察黄芩素对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用,并探讨其可能机制。方法体外培养的宫颈癌Hela细胞分为3组,A组加入100μmol/L黄芩素,B组加入200μmol/L黄芩素,C组加入不含黄芩素的无血清DMEM高糖培养基,处理24 h。相差显微镜观察细胞形态及数量,流式细胞技术检测细胞周期,明胶酶谱法检测细胞培养基中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9活性,RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9、大鼠肉瘤蛋白(Ras)、细胞周期素D1(CyclinD1)、整合素β1(Integrinβ1)mRNA,Western blotting法检测MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrinβ1蛋白。结果与C组相比较,A、B组细胞数量减少,细胞形态从不规则类圆形转变为多角梭形。A、B、C组S期细胞百分比分别为24.58%、19.41%、34.05%,G1期细胞百分比分别为72.67%、79.17%、64.88%,A、B组与C组比较,P均<0.05。A、B、C组培养基中MMP-2活性分别为32.651±0.571、28.987±1.033、36.127±1.184,MMP-9活性分别为33.217±0.660、29.277±0.868、39.613±0.318,A、B组与C组比较,P均<0.05。A组MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrinβ1 mRNA表达水平分别为1.012±0.045、1.009±0.030、0.988±0.036、1.013±0.034、0.983±0.036,B组分别为0.849±0.026、0.914±0.027、0.626±0.029、0.806±0.037、0.799±0.037,C组分别为1.199±0.029、1.087±0.024、1.413±0.026、1.203±0.029、1.224±0.025,A、B组与C组比较,P均<0.05。A组MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrinβ1蛋白表达水平分别为0.693±0.025、0.886±0.032、1.127±0.028、1.061±0.028、1.159±0.031,B组分别为0.326±0.022、0.754±0.024、0.782±0.183、0.321±0.027、0.481±0.028,C组分别为1.914±0031、1.487±0.016、1.323±0.303、1.816±0.025、1.467±0.036,A、B组与C组比较,P均<0.05。结论黄芩素可抑制宫颈癌Hela细胞增殖,其机制可能为将细胞阻滞于G1期,降低细胞培养基中MMP-2、MMP-9活性,下调细胞MMP-2、MMP-9、Ras、CyclinD1、Integrinβ1 mRNA及蛋白表达。
- 卢科莲喻小兰夏纪毅毛熙光
- 关键词：黄芩素宫颈癌HELA细胞细胞周期素D1整合素Β1
- 黄芩素抑制宫颈癌HeLa细胞迁移作用机制的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:观察不同浓度黄芩素干预宫颈癌HeLa细胞后,细胞迁移、细胞培养基中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase,MMP9)活性的变化,以及MMP2、MMP9 mRNA和蛋白表达水平的变化。方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞,分空白对照(Control)组、50、100、200、300μmol/L干预组,培养12、24、48 h。镜下观察细胞形态及数量的变化;流式细胞技术法检测细胞周期的变化;细胞迁移实验观察细胞迁移的改变;明胶酶谱法检测细胞培养基中的MMP2、MMP9活性变化;RT-PCR检测MMP2、MMP9 mRNA表达水平的变化;Western Bloting检测MMP2、MMP9蛋白表达水平的变化。结果:黄芩素干预24 h后,与空白对照组相比较,各黄芩素干预组的细胞G1期均受阻滞,阻滞程度与黄芩素干预浓度成正向变化;黄芩素能有效抑制HeLa细胞的迁移,迁移距离与黄芩素干预浓度成反向变化;细胞培养基中MMP2及MMP9的活性受抑制,抑制程度与黄芩素干预浓度成正向变化;MMP2及MMP9 mRNA及蛋白表达随黄芩素干预浓度增加,呈逐渐降低的趋势(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芩素可有效抑制宫颈癌HeLa细胞的迁移,阻滞细胞周期中G1期、降低MMP2、MMP9活性,下调MMP2和MMP9的表达,发挥抑制宫颈癌HeLa细胞增殖的作用。
- 卢科莲喻小兰夏纪毅毛熙光
- 关键词：黄芩素宫颈癌HELA细胞MMP2MMP9
- Ras、CyclinD1在宫颈癌中的表达及黄芩素对其表达的影响被引量：4
- 2014年
- 目的观察通过使用不同浓度黄芩素干预宫颈癌细胞后,Ras及CyclinD1 mRNA及蛋白水平表达变化。方法体外培养Hela细胞株,分为空白对照(control)组、100μmol/L干预组、200μmol/L干预组。培养24 h后,相差显微镜下观察细胞形态及数量的变化;流式细胞技术检测细胞周期的变化;RT-PCR法检测Ras及CyclinD1 mRNA水平的表达变化。Western Blot法检测Ras及CyclcinD1蛋白水平的表达变化。结果黄芩素干预24 h后,与空白对照(control)组相比较,各黄芩素干预组细胞周期G1期受到阻滞,阻滞程度随黄芩素浓度增加而增强(P<0.05);Ras及CyclinD1的mRNA及蛋白表达与黄芩素干预浓度浓度相关,呈逐渐降低的趋势(P<0.05)。结论黄芩素可通过抑制Ras信号通路,阻滞细胞周期G1期,影响细胞周期D1(CyclinD1)的表达,致宫颈癌Hela细胞凋亡。
- 喻小兰卢科莲夏纪毅毛熙光
- 关键词：黄芩素HELA细胞RASCYCLIND1
