刘丽华
- 作品数：30 被引量：50H指数：4
- 供职机构：通化师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省教育厅科研项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 白屈菜乙醇提取液对菜青虫体内保护酶活性的影响被引量：2
- 2015年
- 为利用白屈菜开发新型的植物源农药,采用分光光度法测定了白屈菜乙醇提取液对菜青虫体内保护酶活性的变化。结果表明:用白屈菜乙醇提取液处理菜青虫后,其体内SOD、CAT和POD活性都呈现先升高后降低的趋势,其中SOD酶活力在16h达到最大,而CAT、POD都在24h达到高峰,说明菜青虫在抵御逆境胁迫过程中,SOD是首先发生作用的保护酶,CAT和POD是继SOD之后发生作用的酶系。处理36h前,3种保护酶处理组均高于对照组,48h后,均低于对照组。说明,白屈菜乙醇提取液能有效干扰昆虫保护酶系,扰乱其正常的生理代谢,从而起到防治效果。
- 刘丽华关磊王双
- 关键词：白屈菜菜青虫保护酶
- 细胞周期蛋白家族基因在家蚕胚胎期的表达分析被引量：2
- 2016年
- 【目的】研究家蚕细胞周期蛋白家族基因（CyclinA、CyclinB、CyclinB3、CyclinE、CyclinLl）在滞育卵与即时浸酸处理的滞育卵发育过程中的转录活性，为家蚕胚胎发育及细胞周期调控机制研究提供参考。【方法】以家蚕品种大造为试材，取产后1-8d的滞育卵及产后20h即时浸酸的非滞育卵，提取其RNA反转录成cDNA，采用实时荧光定量PCR方法分析家蚕Cyclin家族基因在胚胎发育过程中的转录水平。【结果】在即时浸酸处理的家蚕非滞育卵中均能检测到Cyclin家族基因的表达，但不同发育阶段Cyclin家族基因表达量差异很大，在发育开始的1-3d，Cyclin家族基因变化显著，说明此期细胞分裂频繁，正处于组织和器官活跃形成时期。在胚胎发育晚期，除CyclinLl外的其他基因表达量都很低，表明此时幼虫器官发育几近完成，因此细胞分裂迟缓。而滞育卵从蛾体产下经过3d后，细胞分化停滞于G2期，Cyclin家族基因也进入沉默状态。【结论】Cyclin家族基因在家蚕胚胎发育过程中具有重的调控作用。
- 刘丽华沈卫德李兵秦佳梅刘涛
- 关键词：家蚕细胞周期蛋白胚胎发育基因表达谱
- 北乌头乙醇提取液对菜青虫体内保护酶活性的影响被引量：4
- 2015年
- 为探讨北乌头的杀虫作用机理,采用分光光度法测定了北乌头乙醇提取液对菜青虫体内保护酶活性的影响。由结果可知,用北乌头乙醇提取液处理菜青虫后,其体内SOD和CAT酶活性呈现先升高后降低的趋势,都在24 h时达到高峰,而POD酶活性则表现为先下降后上升再下降的趋势;在处理36 h前,3种保护酶处理组都高于对照组,48 h后,均低于对照组。结果说明,北乌头乙醇提取液能有效干扰昆虫体内保护酶系,扰乱其正常的生理代谢,从而起到防治效果。
- 刘丽华王双关磊
- 关键词：菜青虫保护酶
- 绿色荧光蛋白在秋黏虫细胞中的表达
- 2007年
- 将绿色荧光蛋白基因编码区克隆到转移载体pBacPAK8,与杆状病毒BacPAK6共转染昆虫细胞,通过同源重组和筛选,构建了整合有绿色荧光蛋白基因的重组病毒。在昆虫细胞中表达的绿色荧光蛋白,在荧光显微镜下呈现绿光。这样,就可在细胞内通过监测其表达情况,以了解病毒在不同细胞中的感染情况。
- 刘丽华沈卫德
- 关键词：绿色荧光蛋白基因表达
- 柞蚕多角体病毒的纯化和鉴定被引量：6
- 2005年
- 对柞蚕多角体病毒(ApNPV)的多角体颗粒进行了分离和纯化,并在显微镜下进行了形态观察.提取和纯化了柞蚕多角体病毒的基因组DNA,对DNA进行了部分限制性内切酶图谱鉴定.结果表明,在ApNPV基因组中只含少量的EcoRI位点,与家蚕核型多角体病毒差别很大,并提示这两种病毒的复制机制可能不同. 图 3参
- 刘丽华王利群李兵沈卫德王文兵
- 关键词：柞蚕杆状病毒多角体DNA
- 杆状病毒宿主域的研究进展被引量：6
- 2006年
- 刘丽华
- 关键词：杆状病毒昆虫病毒基因组大小宿主特异性甲壳纲蛛形纲
- 几种核型多角体病毒感染性的检测被引量：1
- 2007年
- 通过共转染法获得重组绿色荧光蛋白GFP基因的苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcMNPV,并通过检测荧光的产生来分析昆虫是否受到感染。观察多种病毒组合感染的BmN细胞,分析病毒对细胞的影响规律,从而了解不同病毒在同一宿主体内的相互作用情况。结果表明,亲缘关系较近的病毒之间更容易相互感染。该结论可以对宿主域拓展的研究提供有价值的信息。
- 刘丽华沈卫德
- 关键词：核型多角体病毒
- 从野桑蚕分离的NPV与BmNPV、ApNPV间的RAPD分析被引量：1
- 2003年
- 将野外收集的野桑蚕核型多角体病毒(w-BmNPV)进行空斑筛选,纯化后的病毒通过碱裂解法抽提基因组DNA,以家蚕核型多角体病毒(BmNPV)和柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)的基因组DNA为对照,用随机引物进行PCR扩增。结果表明:野桑蚕分离的NPV和BmNPV、ApNPV间存在较大的差异性,通过版本为1.3b的Treecomw软件分析,野桑蚕体内的NPV和BmNPV的同源关系较近,而与ApNPV的同源关系较远。
- 沈卫德李兵季平刘丽华
- 关键词：NPVBMNPVAPNPVRAPD分析柞蚕核型多角体病毒
- 家蚕细胞cyclinA基因的干涉对家蚕细胞增殖的影响被引量：1
- 2015年
- [目的]研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对家蚕卵巢细胞系(Bm N)细胞cyclin A基因表达及细胞周期的影响。[方法]通过脂质体转染试剂将针对cyclin A基因的特异性siRNA片段转入家蚕Bm N细胞,采用SYBR荧光定量PCR法检测cyclin A mRNA的表达,流式细胞技术检测细胞周期变化。[结果]转染siRNA-cyclin A可有效下调cyclin A基因的表达,转染48 h后,cyclin A mRNA表达量降低到对照的37.4%;流式细胞仪分析表明:与对照组相比,转染组G0/G1期细胞比例显著增加,细胞周期阻滞于G1期。[结论]靶向cyclin A基因的siRNA片段,通过下调cyclin A基因表达能有效抑制细胞增殖。
- 刘丽华沈卫德李兵秦佳梅郁有兰马鹏宇
- 关键词：CYCLINA基因
- siRNA-CyclinE对家蚕细胞增殖的影响被引量：4
- 2013年
- 【目的】研究小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)对家蚕卵巢细胞系(BmN)细胞CyclinE基因表达及细胞周期的影响。【方法】合成针对CyclinE基因1 252和568位点的siRNA片段,并利用脂质体法转染家蚕BmN细胞,于共聚焦荧光显微镜下观察转染情况;应用实时荧光定量PCR法检测CyclinE mRNA的表达情况,流式细胞仪检测细胞周期。【结果】siRNA对家蚕BmN细胞的转染效率达80%左右。转染1252-siRNA-CyclinE和568-siRNA-CyclinE 48h后,分别使家蚕BmN细胞CyclinE mRNA表达量降低了68%和90%;流式细胞仪检测结果显示,2个转染组G0/G1期细胞比例显著增大,S期和G2/M期细胞比例显著减小。【结论】在家蚕BmN细胞中导入针对CyclinE的siRNA,可有效抑制CyclinE基因的表达,使细胞周期阻滞于G1期,进而抑制细胞增殖。
- 刘丽华沈卫德李兵王文兵
- 关键词：RNA干扰细胞增殖细胞周期
