冯秀亮
- 作品数：30 被引量：118H指数：6
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 大鼠成纤维细胞同步处理的流式细胞仪分析被引量：5
- 2002年
- 目的 :研究 SD大鼠成纤维细胞同步处理后的各细胞周期的变化 ,探讨供体细胞的细胞周期对核移植胚胎发育的影响。方法 :分离培养 SD大鼠皮肤成纤维细胞 ,传 3～ 5代 ,分别经血清饥饿 2～ 6d和 1 0 mg/ ml nocodazole处理 2 4 h,流式细胞仪分析处理组和对照组的细胞周期百分比。结果 :血清饥饿、nocodazole处理及对照组的 G0 + G1期成纤维细胞的百分比 ( % )分别为 74.5± 4.4、49.5± 4.65和 5 0 .1 2± 3.9;G2 / M期细胞的百分比 ( % )分别为 :1 9.2 5± 4.2、2 5 .98± 2 .7及 45 .9± 5 .2 1。结论 :血清饥饿能较好地使大鼠成纤维细胞同步于 G0 和 G1期 ;nocodazole处理则使细胞较大程度同步于 G2 和 M期。
- 刘志春李六金杨贵忠冯秀亮谢松涛朱华萍张生勇
- 关键词：成纤维细胞核移植流式细胞仪分析
- 放射性碘标记RC-160对A549-hSSTR2细胞受体内化及杀伤作用的研究被引量：7
- 2007年
- 目的研究^(125)I-伐普肽(RC-160)对转染人生长抑素2型受体(hSSTR2)基因的肺腺癌A549细胞(A549-hSSTR2)受体内化的规律,以及^(131)I-RC-160对 A549-hSSTR2细胞的杀伤作用。方法采用放射性配基结合分析法,以^(125)I-RC-160为放射性配基,测定 A549-hSSTR2细胞及未转染 hSSTR2基因的 A549(A549-pc3)细胞与^(125)I-RC-160在37℃温育不同时间(0.25,0.5,1,4,8,20和24 h)的内化率;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测不同浓度^(131)I-RC-160、Na^(131)I、RC-160对 A549-hSSTR2细胞及A549-pc3细胞作用24,48,72和96 h 的杀伤作用。结果 37℃条件下温育,^(125)I-RC-160迅速与 A549-hSSTR2受体结合并使受体发生内化。在温育1h 时,A549-hSSTR2细胞结合(膜结合+内化)的放射性计数为总计数的(18.2±1.9)%,明显高于 A549-pc3组[(5.7±1.4)%,P<0.01]。1 h 后,A549-hSSTR2细胞膜受体内化率(内化部分放射性计数与总放射性计数比)随时间的延长继续增加,膜结合率(膜结合部分放射性与总放射性计数比)随时间的延长逐渐减少。至24 h 时,受体内化率达(13.0±1.1)%,膜结合率为(3.9±2.2)%。^(131)I-RC-160对 A549-hSSTR2细胞的杀伤作用较对 A549-pc3细胞明显增强,并呈一定的剂量-效应和时间-效应关系,在96 h 时,3700 kBq/ml ^(131)I-RC-160对A549-hSSTR2的抑制率达(78.8±5.9)%。结论 ^(125)I-RC-160可以使转染 hSSTR2基因的细胞膜受体内化;^(125)I-RC-160对 A549-hSSTR2细胞的杀伤作用较强,这为外源性受体基因介导核素靶向性内照射治疗肿瘤提供了实验依据。
- 赵明玄汪静王喆冯秀亮张瑞林国成邓敬兰
- 关键词：生长抑素放射疗法
- 牛和人类胚胎干细胞的研究
- 窦忠英华进联钱永胜常万存雷安民高志敏李松安立龙杨奇杨春荣冯秀亮徐小明樊敬庄
- 课题建立了牛和人类胚胎干细胞分离克隆体系。在分离源于牛原始生殖细胞的胚胎干细胞的实验中，首次采用同源的牛胎儿成纤维细胞共培养的方法。在对牛胚胎干细胞进行体外分化实验，得到上皮细胞、软骨细胞、神经细胞和心脏跳动样细胞团。建...
- 关键词：
- 关键词：胚胎干细胞
- 注核方法对大鼠-小鼠种间体细胞核移植重组胚发育的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 :探讨胞质内直接注核法和电融合法对大鼠 -小鼠种间体细胞核移植重组胚发育的影响。方法 :采用血清饥饿法同步化处理的 SD大鼠成纤维细胞作为供体细胞 ,常规超排 KM小鼠获得卵母细胞 ,采用盲吸法去核 ,分别采用直接注核法和电融合法构建重组胚胎 ,6- DMAP+ CCB+乙醇激活重组胚 ,CZB培养液中培养。结果 :电场强度 ( V/cm)和脉冲 ( ms)为 :1 5 0 0 /30 ;1 5 0 0 /40 ;1 80 0 /30 ;1 80 0 /40时 ,融合率为 :81 .5 % ;83.3% ;77.6% ;82 .0 %。直接注核法和电融合法构建重组胚的卵裂率分别为 33.1 %和 2 8.9% ,桑椹胚发育率为 1 7.8%和 1 5 .5 %。结论 :电场强度为 1 5 0 0～ 1 80 0 V/cm,脉冲为 30 ms或 40 ms时 ,都能获得较高的融合率 ;直接注核法构建的核移植重组胚胎的卵裂率要比电融合法略高 。
- 朱德生谢松涛杨贵忠李华冯秀亮刘水冰
- 关键词：小鼠细胞核胚胎学卵母细胞
- 异种动物细胞核移植研究现状及相关问题的探讨被引量：5
- 2003年
- 随着体细胞核移植相继在多种动物中取得成功 ,异种细胞核移植技术在拯救濒危野生动物、人类干细胞克隆和细胞核质互作研究等方面具有特殊意义 ,受到广泛重视并取得了很大进展。文章对异种细胞核移植技术研究现状进行了综述 ,并对其应用前景和存在的问题进行了探讨。
- 冯秀亮雷安民杨春荣窦忠英
- 关键词：细胞核濒危野生动物细胞克隆
- 猪囊胚在饲养层上的生长行为
- 采用昆明品系小鼠胎儿成纤维细胞(PMEF)饲养层,培养7-9日龄猪孵化囊胚,对其生长行为进行研究.结果显示:1)猪7-8日龄孵化囊胚贴壁之前形态发生变化,不易区分滋养层细胞和ICM,贴壁后细胞增殖范围局限,未见滋养层细胞...
- 冯秀亮雷安民杨春荣高志敏安立龙杨奇窦忠英
- 关键词：囊胚饲养层
- 文献传递
- 由猪囊胚内细胞团分离胚胎干细胞的研究被引量：4
- 2003年
- 以 PMEF为饲养层培养猪 7～ 9日龄囊胚分离 ES细胞 ,ICM初次传代时间为 4～ 7d,ES细胞传代时间为 4～ 5 d,ES细胞传至 1～ 5代的胚胎数分别为 1 2 (1 8.8% ) ,8(1 2 .5 % ) ,5 (7.8% ) ,3(4 .7% ) ,2 (3.1 % ) ,并进行体外分化和 AKP染色鉴定。对影响猪 ES细胞分离与克隆的因素进行比较 ,结果表明 :(1 ) 9和 1 4日龄小鼠胎儿 PMEF饲养层培养 9日龄猪囊胚 ,贴壁率 (83.3% ,88,9% ) ,ICM形成率 (75 .0 % ,77.8% )和 1代 ES细胞克隆率(2 5 .0 % ,2 2 .2 % )无显著性差异 (P>0 .0 5 )。 (2 ) 7,8和 9日龄胚胎随胚龄增加 ,胚胎贴壁率 (5 .9% ,5 7.1 % ,87,9% )和 ICM形成率 (0 .0 % ,2 8.6 % ,81 .8% )升高 ,差异显著 (P<0 .0 1 )。(3) 9日龄囊胚直径 0 .8～ 1 .2 m m培养36～ 4 8h贴壁 ,贴壁率 1 0 0 % ,ICM形成率 1 0 0 % ;直径 >1 .2 mm囊胚贴壁时间为 4 8～ 72 h,贴壁率 5 7.1 % ,ICM形成率 5 7.1 % ,差异显著 (P<0 .0 5 )。去除直径 >1 .2 m m囊胚部分滋养层细胞培养 36～ 4 8h,贴壁率 91 .7% ,ICM形成率 83.3% ;(4 )添加外源 L IF没有提高贴壁率 (86 .4 % ,90 .9% ;P>0 .0 5 )和 ICM形成率 (81 .8% ,81 .8% ;P>0 .0 5 )
- 冯秀亮高志敏杨春荣雷安民樊敬庄窦忠英
- 关键词：囊胚内细胞团胚胎干细胞培养基
- 小鼠孤雌激活来源囊胚线粒体基因表达
- 2015年
- 为了探索孤雌胚胎和正常体外受精胚胎线粒体基因表达的差异,本研究用ICR小鼠孤雌和正常受精胚胎为研究对象。孤雌和正常受精的胚胎分别发育至2-细胞期和囊胚期的比率,用q PCR方法检测囊胚线粒体基因Cox2、tom40、tim23和cytochrome C,以及多能性囊胚质量相关基因Oct4、Sox2和nanog的表达水平。结果发现孤雌激活不影响小鼠卵母细胞的卵裂(95%vs 97.6%,p>0.05),但影响胚胎发育到囊胚(39.4%vs 75%,p<0.05),孤雌囊胚细胞线粒体Cyto C和Cox2显著高于体外受精组(p<0.05);正常受精囊胚多能性基因Oct4和nanog表达水平显著高于孤雌组(p<0.05),但Sox2表达水平显著低于孤雌组(p<0.05)。本研究表明孤雌激活可影响胚胎线粒体和细胞基因表达水平。
- 许春丽许婉璐霍莉慧李晶晶王爽郝俊冯秀亮严兴荣
- 关键词：孤雌胚胎线粒体小鼠体外受精
- 卵巢基质动脉血流与优质胚胎关系被引量：6
- 2010年
- 目的:探讨卵巢基质动脉血流与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)取卵周期优质胚胎的关系。方法:经阴道彩色多普勒B型超声,监测取卵周期月经第2d(M2)和HCG日卵巢动脉血流PI、RI和S/D。根据该周期优质胚胎的数量分成3组:组,无优质胚胎;组,1～3个优质胚胎;组,≥4个优质胚胎,并分析3个组的卵巢动脉血流超声学指标与优质胚胎的关系。结果:M2日和HCG日,3个组的卵巢动脉血流PI、RI和S/D值的波动范围是一致的。M2日、两个组的PI、RI和S/D均低于无优质胚胎组(组)。组与组之间的PI和S/D有显著差异(P<0.05),但组和组之间以及组与组之间的超声指标统计学差异不显著(P>0.05)。HCG日,组与组之间的RI和S/D有显著差异(P<0.05);组与组的PI、RI和S/D值亦有显著差异(P<0.05);但组和组的卵巢动脉血流超声指标差异不显著(P>0.05)。结论:卵巢动脉血流PI、RI和S/D与体外受精-胚胎移植周期胚胎的质量密切相关,可作为预测胚胎质量的有效指标。
- 杨贵忠王颖冯秀亮王蕴颍王丽萍
- 关键词：卵巢动脉局部血流胚胎发育
- 浅谈外科手术学教学体会被引量：5
- 2012年
- 外科手术学是培养医学生基本功和手术技巧的重要环节。针对外科手术学教学中面临的一些实际问题,笔者从提高对课程重要性的认识、强化教师的楷模作用、加强对教学设施的建设、建立规范化教学模式、利用现代化教学手段、加强学生的基本操作训练、完善课后考核制度等多方面进行了一系列探索,取得了一定的成效。
- 韩宇洪流冯秀亮邱建华
- 关键词：外科手术学实验教学教学质量
