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microRNA-140在乳腺癌细胞中对Nrf2及其下游抗氧化基因的表达调控: Nrf2基因属于转录因子CNC家族,含有碱性亮氨酸拉链/(bZIP/)结构,是细胞抗氧化反应中的重要转录因子。它通过与其下游基因启动子区的抗氧化反应元件ARE结合,诱导抗氧化蛋白和Ⅱ相解毒酶的表达,在氧化应激和外源性有毒...; 于影; 关键词：NRF2 ARE 细胞生长; 文献传递

基于双荧光素酶报告基因系统建立miR-140生物传感器: 2014年; 目的:利用双荧光素酶报告基因系统构建可检测miR-140活性的生物传感器。方法:首先,在psiCHECK-2双荧光报告基因质粒的多克隆位点插入miR-140成熟体的4个拷贝反义序列,构建miR-140sensor。其次,将miR-140 sensor和miR-140 mimics共转染HEK-293T细胞,利用双荧光素酶报告基因系统检验miR-140 sensor的功能。最后,转染miR-140 sensor至大鼠骨髓间充质干细胞(rat MSCs),分析在成软骨诱导中miR-140的活性变化,并与miR-140的表达水平相比较。结果:在HEK-293T细胞中,相对于阴性对照组,miR-140 sensor与miR-140 mimics共转能明显降低49%(20 nmol·L-1)和65%(50 nmol·L-1)的荧光活性。将转染miR-140 sensor的rat MSCs成软骨诱导7 d后,荧光活性降低43%,提示miR-140活性升高,与RT-qPCR法检测的miR-140表达水平相一致。结论:构建的miR-140 sensor是一种简单方便有效的miRNA传感器,可用于检测miR-140活性。; 高原邹阳于影林金德张春丽温传俊沈干; 关键词：荧光素酶实时荧光定量聚合酶链反应

MicroRNA-140在乳腺癌细胞中对Mrf2及其下游抗氧化基因的表达调控被引量：3: 2013年; 目的本研究旨在揭示microRNA在乳腺癌细胞中对哪表达的影响。方法利用生物信意学方法预测miR-140与Ⅳ啦的结合位点，然后采用双荧光报告系统检测miR-140对Nrf23’UTR及启动子上的8×ARE区域活性的影响；同时以实时荧光定量PCR法和Westernbloting法检测过表达miR．140和加药刺激前后细胞中Nrf2及其下游基因的mRNA和蛋白的表达变化；最后，四甲基偶氮唑蓝（MTY）法检测转染miR-140后，对于不同浓度H2O2处理的细胞，观察其生长能力及对氧化应激敏感性的变化。结果过表达miR．140能够显著抑制Nrf啦5’UTR区域的表达（P=0．007）和启动子上ARE区域的活性（P=0．01）；在过表达miR-140的对照组和加药组细胞中，Ⅳ以及其下游基因mRNA和蛋白水平均被明显抑制（均P〈0．05）；MTT实验结果显示转染miR-140细胞活力受到抑制，同时再使用不同浓度的H2O2刺激细胞后，细胞对氧化应激的敏感性增加（P〈0．01）。结论Ⅳ啦可能作为miR-140的一个新型靶基因，miR-140能够通过抑制Ⅳ犯，进而影响其下游一系列抗氧化基因的表达。; 于影李豪杰温传俊; 关键词：NRF2 ARE 细胞生长

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