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蒋建林

作品数：14 被引量：180H指数：6
供职机构：中国农业大学动物医学院更多>>
发文基金：国家攀登计划国家自然科学基金瑞典国际科学基金更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 12篇期刊文章
  • 2篇学位论文

领域

  • 12篇农业科学
  • 3篇生物学

主题

  • 14篇球虫
  • 10篇柔嫩艾美耳球...
  • 10篇艾美耳球虫
  • 7篇基因
  • 6篇鸡球虫
  • 4篇第二代裂殖子
  • 4篇裂殖子
  • 4篇卵囊
  • 3篇子孢子
  • 3篇克隆
  • 3篇基因克隆
  • 2篇疫苗
  • 2篇免疫
  • 2篇免疫效果
  • 2篇抗原
  • 2篇抗原分析
  • 2篇鸡球虫苗
  • 2篇CDNA文库
  • 2篇测序
  • 2篇虫苗

机构

  • 13篇中国农业大学
  • 3篇中国农业科学...

作者

  • 14篇蒋建林
  • 8篇蒋金书
  • 2篇吴文学
  • 2篇吕艳丽
  • 2篇索勋
  • 2篇李安兴
  • 1篇王振华
  • 1篇苑纯秀
  • 1篇赵忠芳

传媒

  • 4篇中国农业大学...
  • 3篇畜牧兽医学报
  • 1篇中国农业科技...
  • 1篇中国兽医杂志
  • 1篇动物医学进展
  • 1篇中国兽医科技
  • 1篇中国预防兽医...

年份

  • 3篇2002
  • 1篇2001
  • 2篇2000
  • 2篇1999
  • 3篇1998
  • 1篇1997
  • 1篇1996
  • 1篇1995
共 14 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
鸡球虫微线基团Etmic-2的一种蛋白异形体的发现被引量：2
2001年
本文利用PCR技术 ,分别从柔嫩艾美耳球虫的第二代裂殖子和孢子化卵囊基因组DNA中扩增出微线蛋白EtMIC 2基因序列 ,并进行了克隆和核苷酸序列测定。核苷酸序列表明Etmic 2基因包含有二种cDNA序列 ,并含有 3个内含子 ,每一个内含子都有真核生物内含子典型剪切共有序列 (GT/AG)。与二种cDNA序列比较发现 ,Etmic 2基因的 pre mRNA可以通过内含子的 3’端的不同剪切位点而产生不同的mRNA ,生成至少两种蛋白异形体。本文从基因序列上解释了EtMIC 2蛋白的二种蛋白异形体产生过程。
蒋建林蒋金书
关键词：柔嫩艾美耳球虫基因克隆
柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子中的Etmic-2基因克隆及测序被引量：9
2002年
作者根据子孢子微线基因 (Etmic- 2 )的 c DNA序列 ,利用计算机设计出 1对引物 ,从柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子中用 RT- PCR技术扩增出 1个片段 (m ic2 - m z)。把这个片段克隆到 p GEM- T- Easy Vector中后 ,我们得到 1个阳性克隆 pmic2 - mz,酶切分析证明 pm ic2 - m z含有 m ic2 - m z,并且外源片段以反方向插入 T载体中。核苷酸序列测定结果表明 m ic2 - m z与 Etmic- 2基因的编码区序列一样长 ,分子量都为 112 7bp,并且两序列之间也只有 3个碱基不同 ,也没有造成氨基酸编码错位 ,这说明球虫从子孢子到第二代裂殖子的二次无性生殖过程中 ,微线基因Etm ic- 2 c NDA序列没有发生太大的变化。
蒋建林蒋金书
关键词：克隆测序柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子
柔嫩艾美耳球虫孢子化7小时卵囊中的Etmic-2基因克隆及测序被引量：4
1998年
作者根据子孢子微线基因(Etmic-2)的 cDNA 序列,利用计算机设计出一对引物,从孢子化7h 卵囊中用 RT-PCR 技术扩增出1个片段(mic2～7h).把这个片段克隆到 pGEM-T-Easy Vector 中后,我们得到一个阳性克隆 pmic2～7h.酶切分析证明 pmic2～7h 含有 mic2～7h,并且外源片段以反方向插入 T 载体中.核苷酸序列测定结果表明 mic2～7h 比 Etmic-2基因至少长111bp.但这多出的111bp 并没有造成基因读框错位,也没有造成基因读框终止.这111bp 由2部分组成,一部分长42bp,另一部分长69bp.虽然这二个片段的3′端均有典型的真核生物 mRNA 内含子剪切信号,但5′端却没有内含子的剪切信号点.这说明多出来的111bp不是内含子序列,mic2～7h 基因也不是 Etmic-2基因的前体,而可能是 EtMIC-2的一种蛋白异形体基因.
蒋建林蒋金书
关键词：柔嫩艾美耳球虫克隆测序
柔嫩艾美耳球虫的抗原分析
蒋建林
关键词：柔嫩艾美耳球虫卵囊子孢子第二代裂殖子抗原分析
柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法的改进被引量：74
1996年
本文报道了改进的柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法。用胃蛋白酶消化盲肠道组织，铜筛过滤除去大颗粒杂质后，以1．1mol·mL－1蔗糖离心漂浮卵囊，然后用小于0．5mol·mL－1蔗糖溶液反复漂洗，最后以5％次氯酸钠消毒处理，获得了大量纯化柔嫩艾美耳球虫卵囊。孢子化卵囊经研磨，消化，游离出子孢子后，过DEAE-纤维素52层析柱，以0．05mol·mL-1，Tris－HCl，（pH＝80，0．15mol·mL1-NaCl）洗脱，层析往高5cm，洗脱液水柱高3cm，流速为2mL·min－1，纯化出了子孢子。取人工感染球虫鸡的120h后的盲肠，游离出第二代裂殖子，铜筛过滤后，过柱方法同前，纯化出了第二代裂殖子。结果证明本法分离的子孢子和第二代裂殖子活性好，回收率达87％。
蒋建林蒋金书
关键词：柔嫩艾美耳球虫卵囊子孢子第二代裂殖子
鸡球虫微线基因mic2-7h在大肠杆菌中的表达被引量：5
1999年
本文在大肠杆菌中表达了鸡球虫孢子化7h微线基因mic2-7h.质粒pmic2-7h经AatⅡ酶切线化,用Sl核酸酶切平DNA分子,再用NotⅠ切出mic2-7h片段,插入表达质粒pET28-a(+)的6xHis下游NheⅠ处构建成表达载体pET28-mic2-7h.IPTG诱导表达后,经SDS-PAGE分析表明表达的重组蛋白大小为45kD,约比理论推算值(37kD)小,但Western-blotting杂交表明重组蛋白能与兔抗Etmic-2抗体反应.这进一步说明了Mic2-7h可能是Etmic-2的一种蛋白异形体.
蒋建林蒋金书
关键词：柔嫩艾美耳球虫大肠杆菌基因表达
鸡球虫基因及基因工程疫苗的研究进展被引量：40
1999年
鸡球虫病（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｓｉｓ）是由艾美属（Ｅｉｍｅｒｉａ）的９种球虫引起的寄生原虫病，病原包括柔嫩艾美球虫（Ｅ．ｔｅｎｅｌａ）、毒害艾美球虫（Ｅ．ｎｅｃａｔｒｉｘ）、堆型艾美球虫（Ｅ．ａｃｅｒｖｕｌｉｎａ）、巨型艾美球虫（Ｅ．ｍａｘｉｍａ）、布氏...
蒋建林蒋金书
关键词：球虫病基因基因工程疫苗寄生虫病
一种改进的高效高保真的PCR合成鸡球虫总cDNA方法被引量：2
2000年
本研究改进了用 PCR合成 c DNA的方法。先用具有长链合成能力的高效反转录酶 (Superscript TM Rnase H-Reverse Transcriptase)合成第一链 c DNA,用多种 RNA酶去除 RNA后 ,在第一链 c DNA3′端用末端转移酶特异性加上多个 d GTP,再用具高保真和长链合成能力的耐高温 DNA聚合酶 (Taq和 Pwo DNA聚合酶 ) PCR扩增总 c DNA。总 c DNA长度分析试验结果表明本法合成的总 c
蒋建林蒋金书
关键词：CDNA合成PCRCDNA文库鸡球虫
柔嫩艾美耳球虫cDNA文库的构建被引量：18
2002年
用异硫氰酸胍法从孢子化 7h的卵囊中提取总 RNA,链合成引物用置换合成法合成总 c DNA,c DNA与 E再用 oligo( d T) n-纤维素从总 RNA中分离 m RNA。m RNA以 Not -olig( d T) 15作第一链合成引物用置换合成法合成总 c DNA,c DNA与 Eco R Adaptors的连接后 ,经 Not 酶切 ,再与 Eco R 和 Not 预切好的 λ载体连接 ,构建成鸡球虫 c DNA文库。
蒋建林蒋金书
关键词：柔嫩艾美耳球虫CDNA文库
强效艾美耳牌鸡球虫苗的免疫效果被引量：33
2000年
在实验条件下 ,研究了强效艾美耳牌鸡球虫苗对平养鸡群的免疫效果。实验 1比较了免疫鸡群和对照鸡群在接种后 1、2、3、4、5、6周的肠道病变分 ,结果表明免疫鸡群较自然感染建立免疫的对照鸡群的免疫整齐度高 ,判断依据是免疫后 2周盲肠细小、内容物亦少的眼观指标。实验 2比较了免疫鸡群、不免疫不用药鸡群、不免疫用药鸡群在攻虫后的三处肠道病变 ,结果表明免疫鸡群对大剂量卵囊攻击有很强的抵抗力 ,不免疫不用药组对相同剂量的卵囊攻击抵抗力表现不整齐 ,不免疫用药鸡群对攻虫没有抵抗力。实验 3比较了免疫鸡群、不免疫不用药鸡群、不免疫用药鸡群的生长情况 ,结果表明免疫鸡群生长均匀 (标准差小 ) ,但在接种后第 7～ 14天有个生长抑制期 ,第 15～ 2 1天有个生长代偿期 ,第 2 1天之后生长情况优于不免疫不用药组与不免疫用药组相当。三个实验的排卵囊曲线显示 ,免疫鸡群有两个排卵囊高峰 ,第一个在免疫后第 5天 ,第二个在第 12～
索勋李安兴蒋建林吕艳丽王振华吴文学曲鸿飞
关键词：鸡球虫苗免疫效果
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