聂建辉
- 作品数:90 被引量:99H指数:5
- 供职机构:中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 我国不同艾滋病候选疫苗小鼠细胞免疫应答评价
- 2010年
- 目的 比较我国不同艾滋病(AIDS)候选疫苗小鼠细胞免疫应答水平.方法 将我国6种艾滋病候选疫苗按其各自免疫程序,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞,利用酶联免疫斑点法(ELISPOT)与胞内因子染色法(ICS)检测其对HIV特异多肽的细胞免疫应答水平.结果 6种艾滋病候选疫苗利用潜在T细胞表位(PTE)Gag、Env和Pol肽库和ELISPOT法检测IFN-γ的分泌情况,结果各疫苗的小鼠细胞免疫阳转率为70%~100%,各疫苗引起特异细胞免疫应答的反应肽库不同,强度亦不相同.1#和2#疫苗利用ELISPOT检测分泌Th1类细胞因子IFN-γ和IL-2的小鼠脾细胞数量,两疫苗的IFN-γ和IL-2检测结果均呈中度相关性(r1=0.62,P1<0.01;r2=0.79,P2<0.01).ELISPOT和ICS检测1#疫苗免疫后分泌IFN-γ的小鼠脾细胞数,结果两种方法的小鼠阳转率均为66.7%(10/15),ELISPOT阳性细胞数与ICS阳性细胞比例呈中度相关(r=0.55,P<0.05).结论 我国不同AIDS候选疫苗引起的小鼠细胞免疫应答在广度和强度上存在差别.ELISPOT或ICS检测IFN-γ等Th1类细胞因子可作为疫苗诱导小鼠细胞免疫应答的评价指标.
- 黄维金张春涛赵晨燕聂建辉宋爱京鲁凤民王佑春
- 关键词:艾滋病疫苗细胞免疫应答
- 以假病毒为基础的HIV-1中和抗体检测体系的建立以及初步应用被引量:3
- 2008年
- 目的建立以假病毒为基础的HIV-1中和抗体检测方法,并对其进行初步应用。方法从重组质粒中扩增出gp160基因片段,并克隆到pcDNA3.1质粒上,酶切鉴定得到阳性克隆。将阳性克隆分别和pSG3/Xenv质粒共转染获得假病毒。用假病毒分别检测单克隆抗体和HIV-1抗体阳性血清的中和活性。结果成功地获得了4株假病毒CHB01、CHB02、CHBC03和CHAE04。单克隆抗体4E10可以中和4株假病毒;单克隆抗体2F5不能中和CHBC03假病毒株,但可以中和CHB01、CHB02和CHAE04假病毒株;单克隆抗体IgG1b12可以中和CHBC03、CHB01和CHB02假病毒株,则不能中和CHAE04假病毒株。43份HIV-1抗体阳性血清中针对不同假病毒的中和抗体明显不同。结论所获得的假病毒可以用于中和抗体的检测,但不同假病毒株的中和特性不同。
- 种辉辉洪坤学张春涛聂建辉孔维王佑春
- 关键词:HIV-1中和抗体假病毒
- 我国第四代HIV血液筛查试剂的质量评价
- 目的评价我国第四代HIV血液筛查试剂的质量方法利用HIV-1p24抗原国家参考品和HIV抗体国家参考品,对2012年3月至2013年3月间7个厂家生产的33批第四代HIV抗原抗体联合检测试剂进行评价,分析其对高、中、低浓...
- 宋爱京许四宏李秀华聂建辉赵晨燕刘强黄维金王佑春
- 关键词:人类免疫缺陷病毒抗原酶联免疫试剂
- 文献传递
- 我国不同艾滋病候选疫苗小鼠细胞免疫应答评价
- 目的比较我国不同艾滋病(AIDS)候选疫苗小鼠细胞免疫应答水平。方法将我国6种艾滋病候选疫苗按其各自免疫程序,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞,利用酶联免疫斑点法(ELISPOT)与胞内因子染色法(ICS)检测其对HIV...
- 黄维金张春涛赵晨燕聂建辉宋爱京王佑春
- 关键词:艾滋病疫苗细胞免疫应答
- 文献传递
- 两种进口HBV/HCV/HIV核酸筛查试剂的质量评价
- 目的:对Gen-Probe公司的Procleix Ultrio和Roche公司的cobas TaqScreen MPX HBV/HCV/HIV核酸筛查试剂的质量进行初步评价。方法:从我国不同地区收集60份HIV-1感染者...
- 许四宏宋爱京聂建辉李秀华王佑春
- 关键词:肝炎病毒人类免疫缺陷病毒
- 趋势分析方法在HIV血液筛查诊断试剂评价中的应用被引量:4
- 2014年
- 目的评价趋势分析方法用于HIV血液筛查诊断试剂的质量稳定性。方法以国产3个厂家(A、B、C)的HIV血液筛查诊断试剂作为研究对象,采用各试剂连续批次检测灵敏度界值参考品S4、HIV-1型中等反应性样品(P18)、HIV-2型低反应性样品(P19)、阴性参考品的阴性符合比例,绘制Levey-Jennings趋势分析质控图,计算每个样品的检测平均值(mean)和标准差(SD),以mean±2 SD作为警戒限,mean±3 SD作为行动限,观察各厂家诊断试剂的检测指标变化趋势。结果试剂A质量稳定,S4、P18和P19样品的检测结果均未见超过行动限的批次;试剂B和C的阴性参考品阴性符合比例的变化均呈现在趋势分析中,试剂B检测P18样品出现2个批次检测结果超过行动限,试剂C连续8批S4、P18和P19样品的检测结果在均值同侧。在37℃加速稳定性试验中,32批试剂C分别检测P18、P19和S4样品的变化趋势一致;S4样品37℃加速稳定性及4℃稳定性检测结果差异有统计学意义(P<0.01);企业和中检院S4、P18和P19样品37℃加速稳定性结果差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论我国血液筛查试剂质量稳定,趋势分析可发现试剂质量变化,可尝试用于HIV体外诊断试剂的稳定性评价。
- 宋爱京黄维金许四宏聂建辉李秀华赵晨燕刘强王佑春
- 关键词:人类免疫缺陷病毒血液筛查诊断试剂
- 4种国产和3种进口第4代HIV抗原抗体检测试剂的质量评价被引量:10
- 2011年
- 目的对4种国产和3种进口第4代HIV诊断试剂的质量进行评价。方法利用HIV抗体阴性样品库和核酸阳性样品库、BBI阳转血清盘样品等,对4种国产和3种进口第4代试剂的敏感性和特异性、检测HIV-1早期感染的能力进行分析。结果7种第4代试剂的敏感性均为100%(95%CI:99.86%~100%),且1份HIV-1感染窗口期样品均检测为阳性,其中1种进口试剂“δ+”值较大(1.0δ92),其余6种试剂的“δ+”值均比较小(0.0836~0.3003)。对阴性样品,7种试剂均存在不同程度的假阳性(特异性为97.80%~99.60%,“δ-”值为-1.3803-0.477δ)。对BBI阳转血清盘样品,国产试剂的阳转血清相对敏感性系数为-0.500~0,2种进口试剂则为-0.600和-0.700。结论7种试剂均具有较高的敏感性和特异性,第4代HIV试剂用于血液筛查可发现HIV感染窗口期样本,对减少HIV传播的风险有一定的意义。但进口第4代试剂检测HIV-1早期感染的能力强于国产第4代试剂。
- 李秀华许四宏宋爱京聂建辉王佑春
- S/D残留量对SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法的影响被引量:1
- 2020年
- 目的:评价有机溶剂/表面活性剂(solvent and detergent,S/D)法灭活后S/D残留量对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的假病毒中和抗体检测方法(pseudotyped virus based neutralization assay,PBNA)的影响。方法:在严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)和2019冠状病毒病(coronavirus disease,COVID-19)患者恢复期血浆中加入0.1~10倍《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)规定残留标准[100μg·mL^-1聚山梨酯80(吐温80)+10μg·mL^-1磷酸三丁酯(TNBP)]浓度的S/D,模拟灭活后S/D残留量。用PBNA检测加入S/D前后的中和抗体水平,比较S/D对中和方法的影响。将不同浓度的S/D加入到SARS-CoV和SARS-CoV-2假病毒中进行灭活处理1、2和6 h,检测假病毒的滴度,评价S/D对冠状病毒假病毒的灭活效果。结果:当S/D残留低于《中国药典》残留上限(100μg·mL^-1吐温80+10μg·mL^-1 TNBP)时,SARS-CoV-2中和抗体EC50平均值与无S/D组的PBNA检测结果无统计学差异;当S/D残留大于2.5倍《中国药典》残留标准时,S/D对PBNA有显著影响。含有10 mg·mL^-1吐温80+1 mg·mL^-1 TNBP的S/D试剂,室温静置1 h即可以灭活SARSCoV和SARS-CoV-2假病毒,假病毒滴度下降分别达到5.11和4.80 log滴度,其灭活效果随着S/D的浓度下降而下降,S/D浓度为1%时无灭活效果。结论:S/D残留量对SARS-CoV-2的PBNA有显著影响,为保障PBNA的检测准确性,血浆中S/D残留量应不超过《中国药典》规定的标准,S/D试剂具有灭活2种冠状病毒假病毒的作用。
- 王萌张黎李倩倩吴佳静郝焕孙其玉聂建辉黄维金
- 关键词:假病毒病毒灭活中和抗体
- 不同企业生产的HIV抗体确认试剂检测结果的比较被引量:1
- 2010年
- 目的比较3家不同企业生产的HIV抗体确认试剂的检测结果。方法分别应用3家不同企业生产的HIV抗体确认试剂,检测64份经多家HIV抗体酶联免疫试剂检测不一致的样本,比较检测结果的差异,并对不确定样本的常见非特异性条带进行分析。结果 3家不同企业生产的HIV抗体确认试剂检测64份样本均为阴性或不确定,但各试剂检测为阴性和不确定样本的比例差别较大,INNO-LIATMHIVI/ⅡScore与NEWLAVBLOT1试剂、INNO-LIATMHIVⅠ/ⅡScore与HIVBLOT2.2试剂及NEWLAVBLOT1与HIVBLOT2.2试剂检测结果的符合率分别为57.8%、28.1%和48.4%,且每两家试剂检测结果之间差异均有统计学意义(P均<0.01)。最易产生不确定结果的条带主要集中在p24和p17上。结论 HIV抗体确认试剂质量差别较大,应加强其质量控制并规范检测标准。
- 张春涛李秀华宋爱京许四宏聂建辉王佑春
- 关键词:HIV抗体符合率
- HIV-1包膜蛋白2G12和2F5中和表位的改造对假病毒形成及中和活性的影响
- 目的:研究HIV-1膜蛋白(Env)特定中和表位的改造对功能性假病毒形成及中和活性的影响。
方法:采用环形诱变,DpnI筛选的方法对Env进行定点突变,将2G12和2F5两个中和表位整合人不含该表位的BC亚型的...
- 吴雪伶聂建辉王素婷王佑春
- 关键词:免疫生物学中和活性
- 文献传递