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白剑: 作品数：47 被引量：229H指数：10; 供职机构：辽宁中医药大学更多>>; 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金辽宁省教育厅资助项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>

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人类白细胞抗原-G阳性的脐带间充质干细胞体外诱导调节性T细胞的实验研究: 2018年; 目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-G阳性的脐带间充质干细胞在体外诱导调节性T细胞(Treg)产生的效果。方法从新生儿脐带中分离脐带间充质干细胞,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到脐带间充质干细胞中,设为PEGFP-N1-HLA-G组;转染空载体PEGFP-N1质粒的脐带间充质干细胞设为PEGFP-N1组;相同条件下,未加入空载体的脐带间充质干细胞设为空白对照组。采用流式细胞仪检测脐带间充质干细胞标志物;采用蛋白质免疫印迹法鉴定各组细胞HLA-G蛋白的表达;各组细胞与健康人外周血中CD4+T细胞混合培养24 h和48 h后,采用流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的比例。结果脐带间充质干细胞CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达;PEGFP-N1-HLA-G组可以表达HLA-G蛋白,与空白对照组和PEGFP-N1组比较差异均有统计学意义(均为P<0.01)。PEGFP-N1-HLA-G组细胞在与CD4+T细胞混合培养24 h后,CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的(15.3±1.9)%,在培养48 h后,CD4+CD25+Foxp3+Treg占全部T细胞的(14.3±2.1)%,与空白对照组和PEGFP-N1组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 HLA-G基因修饰后脐带间充质干细胞能够有效地在体外诱导CD4+CD25+Foxp3+Treg的产生。; 白剑白剑肖漓林大勇苗兰英林大勇刘鸿高钰陈文毕丽丽孔祥瑞; 关键词：脐带间充质干细胞免疫排斥 CD4+T细胞

牛磺酸对肝纤维化模型小鼠肝组织超氧化物歧化酶和丙二醛的影响被引量：12: 2015年; 背景:有研究报道牛磺酸对神经系统、心血管系统、免疫系统和消化系统的多种动物疾病模型均有一定的治疗作用。肝脏是牛磺酸代谢的主要场所,也是其重要的靶器官,因此牛磺酸与肝病的关系近年来成为研究热点。目的:观察牛磺酸对四氯化碳诱导的肝纤维化模型小鼠肝组织中超氧化物歧化酶和丙二醛的影响。方法:将30只雄性SPF级C57B/L小鼠随机分为空白对照组,模型组和牛磺酸组,每组10只。空白对照组给予100%花生油1 m L/kg腹腔注射,每周2次,共10周;模型组给予含20%四氯化碳的花生油1 m L/kg腹腔注射,每周2次,共10周;牛磺酸组给予含20%四氯化碳的花生油1 mL/kg腹腔注射,每周2次,共10周,并从第3周起给予牛磺酸500 mg/(kg·d)灌胃至第10周。结果与结论:模型组与空白对照组相比小鼠血清中透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶水平显著升高(P<0.05),肝脏组织中超氧化物歧化酶水平降低(P<0.05),丙二醛水平显著升高(P<0.05),肝脏指数增加(P<0.05),病理检查显示肝细胞坏死并出现脂肪空泡、纤维组织增生和炎细胞浸润;牛磺酸组与模型组相比小鼠血清中透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶水平显著降低(P<0.05),肝脏组织中超氧化物歧化酶水平显著升高(P<0.05),丙二醛水平显著降低(P<0.05),肝脏指数降低(P<0.05),病理检查显示肝脏组织中无炎性浸润、脂肪空泡和纤维组织沉积。结果表明牛磺酸可以降低肝纤维化小鼠血清中超氧化物歧化酶和丙二醛含量,通过发挥其抗氧化作用减轻四氯化碳诱导的肝纤维化程度。; 白剑肖漓韩永毕丽丽孔祥瑞王学良张丽萍刘喜成; 关键词：牛磺酸肝纤维化超氧化物歧化酶丙二醛

冬凌草甲素对人脑胶质瘤细胞株U251杀伤、增殖及NF-κB蛋白表达的影响被引量：2: 2017年; 目的观察冬凌草甲素对人脑胶质瘤细胞株U251杀伤、增殖及NF-κB蛋白表达的影响。方法将浓度为10、20、40、80μmol/L冬凌草甲素与U251细胞(实验组)分别孵育,同时设不加冬凌草甲素培养的U251细胞作对照组,分别于不同时间点计数U251、计算冬凌草甲素对U251细胞的IC50、测算U251细胞增殖抑制率、检测U251细胞中的NF-κB蛋白。结果与对照组相比,实验组加入40、80μmol/L的冬凌草甲素后U251细胞数明显减少(P均<0.05)。冬凌草甲素作用24、48、72 h时对U251细胞的IC50分别为82.2、65.3、44.1μmol/L。与20μmol/L冬凌草甲素相比,40、80μmol/L冬凌草甲素作用48、72 h时的细胞增殖抑制率明显降低(P均<0.05)。与对照组相比,40、80μmol/L的冬凌草甲素作用48、72 h时,U251细胞中NF-κB蛋白的相对表达量明显降低(P均<0.05)。结论冬凌草甲素在体外可杀伤人脑胶质瘤细胞株U251,抑制其增殖,下调其NF-κB蛋白的表达;冬凌草甲素对U251细胞的杀伤、增殖抑制作用可与其对NF-κB信号通路发挥调节作用有关。; 苑鹤毅王丽敏刘君林大勇刘鸿白剑白剑; 关键词：冬凌草甲素脑胶质瘤 NF-ΚB信号通路 NF-ΚB蛋白

人体内皮细胞系细胞株ECV304细胞低氧模型的制备被引量：1: 2011年; 目的研究人体内皮细胞系细胞株(ECV304)细胞低氧模型的建立条件及其形态学特点。方法培养ECV304细胞,将培养箱内通入5%CO2-95%N2混合气体(氧分压为18.3mmHg)并培养ECV304细胞12h、24h,使用MTT法、酸脱氢酶试剂盒(LDH)活力测定及细胞骨架染色对低氧细胞模型鉴定。结果与正常对照组相比,在低氧条件下12h,ECV304细胞存活率降低,LDH释放增加,但细胞骨架保持完整;在低氧条件下24h,ECV304细胞存活率进一步降低,LDH释放增加更明显,细胞骨架破碎。结论在低氧(氧分压为18.3mmHg)24h条件下,可以建立ECV304细胞低氧模型,同时可以观察到形态学改变。; 苗兰英林大勇白剑杨葳张伯阳王良君杨菁刘书林; 关键词：低氧细胞骨架

HLA-G阳性的胎盘间充质干细胞体外诱导Treg的实验研究被引量：3: 2018年; 目的:研究HLA-G阳性的胎盘间充质干细在体外诱导Treg的产生。方法:从新生儿胎盘中分离胎盘间充质干细胞的,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到胎盘间充质干细胞中,将细胞分为空白对照组、PEGFP-N1组和PEGFP-N1-HLA-G组,每组设置5个复孔,并通过蛋白质免疫印迹检测HLA-G的表达,将鉴定后的细胞与健康人外周血中CD4^+的T淋巴细胞混合培养24 h和48 h,并检测CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占T淋巴细胞的比例。结果:PEGFP-N1-HLA-G转染后胎盘间充质干细胞可以表达HLA-G蛋白,与空白对照组和PEGFPN1组相比有显著性差异(P<0.01); HLA-G阳性的胎盘间充质干细胞在与CD4+的T淋巴细胞混合淋巴细胞培养24 h后,Treg细胞占全部T淋巴细胞的比例为(16.41±0.94)%,在培养48 h后,Treg细胞的占全部T淋巴细胞的比例为(16.46±0.59)%,与空白对照组和PEGFP-N1组相比有显著性差异(P<0.01)。结论:HLA-G基因修饰后胎盘间充质干细胞能够有效的在体外诱导CD4^+CD25^+FoxP3^+Treg产生。; 崔桂玉白剑苗兰英林大勇刘鸿李亚丽刘喜成; 关键词：HLA-G 胎盘间充质干细胞 T淋巴细胞调节性T淋巴细胞

肾移植受者红细胞CD35、CD58、CD59表达变化被引量：3: 2015年; 目的观察肾移植受者移植前后外周血红细胞膜表面CD35、CD58、CD59的表达情况。方法选择2013年1月—2015年1月肾移植受者25例及健康体检者25例,采用流式细胞术对肾移植术前、术后3、7、14 d外周血红细胞膜表面免疫分子CD35、CD58、CD59进行检测,观察红细胞免疫功能的变化情况。结果肾移植受者术前CD35、CD59表达明显低于对照组(P<0.05,P<0.01),CD35术后14 d明显低于术前,CD58术后3 d高于术前和术后14 d(P<0.05)。结论肾移植受者术前红细胞免疫功能低下,术后有所改善。红细胞免疫参与肾移植受者机体免疫功能的调节。; 孔祥瑞肖漓刘志佳高钰毕丽丽马锡慧裴艳宏白剑石炳毅; 关键词：肾移植红细胞

低氧条件下大鼠血管内皮细胞的形态观察被引量：4: 2011年; 原代培养大鼠血管内皮细胞,将培养箱内通入5%CO2-95%N2混合气体(氧分压为18.3 mmHg)并培养大鼠血管内皮细胞12、24h,使用MTT法、LDH活力测定及细胞骨架染色对低氧细胞模型鉴定,研究大鼠血管内皮细胞低氧模型的建立条件及其形态学特点。在低氧12h条件下,血管内皮细胞存活率降低、LDH释放增加,但细胞骨架保持完整;在低氧24h条件下,血管内皮细胞存活率降低、LDH释放增加,细胞骨架破碎。结果表明在低氧(氧分压为18.3 mmHg)24h条件下,可以建立大鼠血管内皮细胞低氧模型。; 苗兰英林大勇白剑杨葳张伯阳王良君杨菁刘书林; 关键词：血管内皮细胞低氧细胞骨架

供者特异性抗体在肾移植中的作用研究进展: 2015年; 目前在临床中,肾衰竭有效的治疗方法之一就是肾移植。随着20世纪中期该技术的兴起,人们就对器官移植排斥反应原因展开过争论。主要以Peter Gorer和Medawar两方为代表的理论。前者认为是抗体抗原结合致其排斥反应;而后者则认为T细胞在排斥反应中起着举足轻重的作用。在随后的一段时期中,器官移植免疫学也快速发展起来。加上临床外科诊疗技术不断改善,; 马锡慧肖漓裴艳宏孔祥瑞刘志佳高钰毕丽丽白剑石炳毅; 关键词：肾移植抗体特异性移植物排斥

牛磺酸对四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型中白介素2的影响被引量：8: 2015年; 目的观察牛磺酸对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠肝纤维化模型血清中白介素(IL)-2的影响。方法将40只雄性SPF级C57B/L小鼠随机分为空白对照组、模型组、护肝片组和牛磺酸组,每组10只。空白对照组给予100%花生油1 ml/kg腹腔注射,模型组、护肝片组、牛磺酸组均给予含20%CCl4的花生油1 ml/kg腹腔注射,均注射10周。从第3周起护肝片组给予护肝片1 g/(kg·d),牛磺酸组给予牛磺酸500 mg/(kg·d)。第10周摘除眼球取血,检测小鼠血清中的透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、IL-2的含量;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量;计算肝脏指数;观察小鼠肝脏的病理组织学改变。结果模型组HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、ALT、AST、IL-2、SOD和MDA的含量、肝脏指数与空白对照组相比具有显著性差异(P<0.05),在经过护肝片和牛磺酸治疗后,各组相关指标明显改善(P<0.05)。病理检查显示模型组肝细胞坏死并出现脂肪空泡、纤维组织增生和炎细胞浸润;护肝片组与牛磺酸组肝细胞结构完整,未见脂肪变与假小叶形成。结论牛磺酸可上调肝纤维化小鼠血清中IL-2的表达量,减轻CCl4诱导小鼠肝纤维化程度,改善肝功能。; 白剑肖漓韩勇毕丽丽张丽萍王学良石炳毅; 关键词：牛磺酸白细胞介素2 小鼠

个体识别中烧骨的DNA提取被引量：2: 2010年; 目的：探讨不同温度焚烧的股骨中的DNA的提取方法。方法：常压下以100℃～500℃对30例成人股骨进行焚烧，然后分别采用有机法、Microcon100＋Qiagen试剂盒（QIAquick PCR Purification kit）纯化法、有机法＋Qiagen试剂盒纯化法。并用ND-1000光度计进行DNA浓度测定，用Sinofiler扩增试剂盒进行荧光标记和复合扩增。结果：骨骼样本在20℃～500℃各组用3种方法检测的DNA浓度均值分别为10．1～0．0、67．2～0．0、49．8～0．0ng／μl。有机法在20℃～500℃各组的位点检出率为38．3％、28．3％、16．7％、9．4％、0．0％、0．0％；纯压法为97．3％、75．7％、45．6％、33．1％、12．5％、1．2％；有机法＋Qiagen试剂盒纯化法为98．5％、81．9％、53．5％、36．3％、7．7％、0．4％。结论：有机法提取的骨骼DNA浓度及位点检出率较其他两种方法低；未烧骨骼用后两种方法提取其DNA都能获得较高的浓度和较好的分型，焚烧温度在100~C～300℃之间的骨骼用有机法＋Qiagen试剂盒纯化法提取其DNA较好；400℃-500℃焚烧的骨骼用Microeon100＋Qiagen试剂盒纯化法提取其DNA较好。; 刘海东任甫席焕久裴林国张明白剑喻少波郝春雨; 关键词：DNA提取纯化短串联重复序列

白剑

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