杜珍武
- 作品数：145 被引量：157H指数：5
- 供职机构：吉林大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吉林省发展与改革委员会计划资助项目吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学自动化与计算机技术更多>>
- 核心蛋白聚糖在HepG_2细胞中的表达及作用
- 2008年
- 目的构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,并观察其在肝癌细胞HepG2中的表达和抗肿瘤作用。方法应用PCR技术扩增DCN全长基因cDNA片段,与pcDNA3.1载体连接,并转化到大肠杆菌中扩增获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体,脂质体介导转染HepG2,经G418筛选建立稳定转染细胞株,采用RT-PCR、免疫组化检测其表达。MTT检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期。结果RT-PCR可见转染组细胞mRNA表达明显增多,免疫组化可见转染组细胞DCN蛋白表达明显增高。细胞生长曲线显示转染组细胞生长缓慢,G1期细胞显著增多。结论本方法可成功建立稳定转染DCN的HepG2细胞株,并证实DCN能够抑制HepG2细胞株的生长。
- 张玉成王雅丽杜珍武高申吕俊峰张桂珍
- 关键词：核心蛋白聚糖聚合酶链反应转染HEPG2
- 结缔组织核心蛋白(Decorin)基因在大肠癌组织中表达的半定量研究
- 核心蛋白聚糖(decofin)是细胞外基质的组成成分,是富含亮氨酸小分子蛋白聚糖(SLRPs)家族成员之一。早年对肿瘤的研究主要集中于恶性增殖的肿瘤细胞,随着人们对肿瘤间质在肿瘤发生、发展、转移过程中作用的深入研究,现普...
- 张桂珍操海萍杨绍娟高申卜丽莎崔亚南杜珍武王茜
- 文献传递
- 血清对U937细胞分化成熟及细胞周期的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨血清对U937细胞分化成熟及细胞周期的影响。方法应用乙酸肉豆蔻佛波醇(PMA)诱导U937细胞分化,血清作为调节因素,通过倒置显微镜观察细胞的形态与贴壁情况并计算细胞贴壁率并依此作为细胞分化成熟的标志,采用流式细胞仪测定细胞周期的变化。结果 FCS+PMA组细胞贴壁生长;其他3组细胞悬浮生长;细胞周期测定结果显示,与FCS组相比,NOFCS、NOFCS+PMA和FCS+PMA组的G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P<0.05)。NOFCS+PMA组经血清恢复后细胞贴壁率明显升高,与FCS+PMA组相比有显著性差异(P<0.05),与NOFCS+PMA组相比细胞周期无明显差异。NOFCS组经血清恢复后,细胞悬浮生长,细胞周期与NOFCS组相比G1期细胞下降,S期细胞明显增多(P<0.05);血清加PMA组在无血清培养与血清培养条件下,细胞都贴壁生长,二者贴壁率没有改变,细胞周期无显著差异。结论血清促进PMA诱导的U937细胞分化成熟并调节细胞周期的变化。
- 曹林林杜珍武杨麒巍侯治富
- 关键词：血清U937细胞PMA细胞周期
- 环状RNA CDR1as在激素性股骨头坏死BMSCs成骨/成脂异常转分化中的分子机理及信号通路的研究
- 股骨头坏死(ONFH)是骨与关节重大疾病之一,由于早期诊断困难,一经发现多为中晚期,病变渐进性进展致残率极高,不得不实施人工关节置换术,一直是困扰专业领域的瓶颈问题。环状RNA(circular RNA,circRNA)...
- 宋旸陈高扬杜珍武石传楷
- 关键词：激素性股骨头坏死
- 重组核心蛋白聚糖转染对HepG2细胞周期以及P21表达的影响
- 目的将已构建完成的分泌型核心蛋白聚糖真核表达戴体转染到 HepG2细胞中并检测其表达同时研究其抗肿瘤作用的机制。方法脂质体介导核心蛋白聚糖真核表达载体转染 HepG2细胞,经 G418筛选建立稳定转染的细胞株,采用 RT...
- 张玉成王雅丽杜珍武张桂珍
- 关键词：核心蛋白聚糖P21WAF1/CIP1细胞周期转染
- 文献传递
- 成人脂肪间充质干细胞的分离、培养与鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的从成人皮下脂肪组织提取具有连续传代和分化潜能的间充质干细胞,为进一步实验研究提供应用基础。方法采用机械分离—胶原酶消化法分离剖宫产患者皮下脂肪组织,所得细胞培养,传代,用差速贴壁法提纯所得细胞。取第4代细胞进行诱导分化,使其分化成脂肪细胞。取第6代细胞进行流式细胞术检测表面抗原CD13,免疫细胞化学法检测表面抗原CD90。结果成人皮下脂肪中含有长梭形细胞,此种细胞在体外能稳定传代且能被诱导分化成脂肪细胞,与空白对照相比,表面抗原CD13和CD90均呈阳性。结论此种方法能从成人皮下脂肪中分离出具有间充质干细胞性质的细胞,为进一步实验研究提供了有效方法和基础材料。
- 范颖杜珍武张玉成张桂珍
- 关键词：脂肪组织间充质干细胞流式细胞术免疫细胞化学
- 家蚕素Ⅱ基因真核表达载体的构建被引量：2
- 2011年
- 目的构建(BbxⅡ)基因真核表达载体,为研究家蚕素Ⅱ在哺乳动物细胞中的生物学作用奠定基础。方法以含有BbxⅡcDNA的PUC57质粒为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增BbxⅡcDNA片段。真核表达载体PcD-NA3.1及PCR产物经双酶切后连接,转化大肠杆菌DH-5α感受态菌,获得重组载体PcDNA3.1-Bbx/His,进行酶切鉴定和测序鉴定。结果 PCR获得与预期大小一致约300 bp的特异性DNA,重组载体PcDNA3.1-BbxⅡ/His经双酶切及测序鉴定证实,BbxⅡ基因的cDNA片段正确插入真核表达载体中。结论成功构建含有家蚕素基因Ⅱ的真核表达载体。
- 李洪霞杜珍武张玉成郑锦花吕俊峰张桂珍
- 关键词：聚合酶链式反应真核表达载体
- 一种体外构建组织工程复合物的方法
- 本发明提供了一种体外构建组织工程复合物的方法，通过以下技术方案实现：通过用天然来源的I型胶原作为基质的温度敏感性的胶原凝胶作为细胞外基质，在低温下将高浓度的种子细胞制成细胞悬液，以注射的方式种植于具有一定形状的支架材料中...
- 黄岚峰赵劲松陈炳鹏王晓楠杜珍武马健超戴琎李秋菊
- 文献传递
- 核心蛋白聚糖真核表达载体的构建及其在A549中的表达被引量：1
- 2011年
- 目的建立人核心蛋白聚糖(decorin,DCN)真核表达载体,并在A549细胞中进行表达,为进一步研究其抗肿瘤作用奠定基础。方法用PCR法扩增出DCN分子编码序列的cDNA全长,与pcDNA3.1(+)载体连接,构建真核表达载体pcDNA3.1-decorin,并转化到大肠杆菌JM109中扩增以获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体;脂质体介导重组载体转染A549细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞株,分别采用RT-PCR、免疫组化法和Western印迹法检测其表达。结果获得了约1 080 bp大小的特异性DNA片段;PCR产物与真核表达载体进行连接,经过双酶切、PCR以及测序鉴定证实分泌型DCN cDNA片段正确插入真核表达载体pcDNA3.1中。RT-PCR方法可见转染组mRNA表达明显增多,免疫组化和Western印迹方法可见转染组细胞DCN蛋白表达明显增高。结论成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-decorin,建立了稳定转染DCN的A549细胞株。
- 吕俊锋张玉成杜珍武张桂珍
- 关键词：核心蛋白聚糖基因表达转染A549细胞
- 基因工程重组家蚕素Ⅱ的表达及其胰岛素样作用的研究
- 糖尿病是严重威胁人类健康的主要疾病之一,寻找高效抗糖尿病药已成为近年生物医学领域关注的热点问题之一.家蚕素(bombyxin,Bbx)是无脊椎动物中首个被鉴定的昆虫胰岛素,分子量5KD,家蚕素Ⅱ的A链与B链与人类胰岛素具...
- 张桂珍李红霞杜珍武吴玫宋旸张玉成
- 关键词：糖尿病基因工程胰岛素样药理作用
- 文献传递
