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表达萤火虫荧光素酶基因的重组猪瘟病毒及其应用: 本发明公开了一株表达萤火虫荧光素酶基因的重组猪瘟病毒及其应用，属于表达萤火虫荧光素酶基因的重组猪瘟病毒的拯救和应用领域。本发明通过重叠PCR方法将萤火虫荧光素酶基因克隆到猪瘟病毒Shimen株全长感染性克隆pBRCISM...; 仇华吉申梁李永锋孙元李素罗玉子

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体间接ELISA检测方法的建立: 2018年; 为建立一种准确检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的方法,通过对PRRSV基因连续缺失片段dNsp2(87)进行诱导表达,重组pUC57-dNsp2蛋白,经镍柱纯化后,作为抗原包被微量反应板,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。经反应条件优化,确定抗原的最适包被浓度为40μg/mL,最适封闭液为5%脱脂奶粉,检测血清稀释度为1:40,酶标二抗的最适工作浓度为1:5 000,最佳显色时间为1 h,确定阴阳性临界值为0.35(OD450)。该方法均不与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒(PCV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)阳性血清发生交叉反应,具有良好的特异性。与IDEXX PRRSV Kit进行重复性、敏感性、符合性试验,证明该方法具有较好的重复性、敏感性、符合性。结果表明,该方法可用于临床PRRSV抗体的检测。; 高许雷孙国强李永锋; 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒间接ELISA

表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病病毒变异株及其应用，属于伪狂犬病病毒变异株的构建及应用领域。本发明以gE/gI双基因缺失重组病毒rPRVTJ‑delgE/gI为基础，在rPRVTJ‑delgE/gI中插入猪...; 仇华吉孙元罗玉子李素李永锋; 文献传递

抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用: 本发明公开了抗猪瘟病毒感染的siRNA及其应用，属于抗猪瘟病毒siRNA的鉴定及其应用领域。本发明首先公开了分别靶向猪瘟病毒基因组N<Sup>pro</Sup>、P7、NS5A和NS5B基因的抗猪瘟病毒感染的siRNA，...; 仇华吉申梁李永锋孙元李素罗玉子; 文献传递

病毒靶向抗原递呈细胞调控细胞免疫应答的研究进展: 2024年; 细胞免疫是参与免疫应答的细胞之间相互作用从而发挥免疫功能。细胞免疫应答是机体抵御外来病原体侵袭的重要防线,在免疫保护中发挥着重要作用。然而,许多病毒通过靶向抗原递呈细胞抑制或逃避细胞免疫来实现其在宿主体内的复制。因此,本文主要针对细胞免疫应答的作用及其主要过程、参与调控细胞免疫应答的抗原递呈细胞及其机制的最新研究进展进行了概述,为深入研究病毒调控细胞免疫应答的机制提供思路并为设计基于细胞免疫应答的新型疫苗提供参考。; 侯青荷李树稳高旭李永锋仇华吉; 关键词：细胞免疫应答免疫保护抗原递呈细胞新型疫苗病毒

生物安全在养猪业的发展与应用被引量：2: 2024年; 随着规模化养猪的快速发展,烈性传染病造成的经济损失越来越大,而建立科学、高效的生物安全体系是有效预防和控制动物传染病的重要措施。在养猪生产过程中采取生物安全措施可以阻止或减少外部病原的引入(外部生物安全)及病原在养殖场内的传播(内部生物安全)。同时,科学的生物安全体系还有助于提高养殖生产效率、减少药物和疫苗的使用量。文章综述了目前国内养猪业主要采取的生物安全措施,同时系统分析了美洲和欧洲国家生物安全措施在猪场应用的发展历程,以期为完善我国养猪业生物安全防控体系提供借鉴。; 李树稳李永锋张交儿孙元张新黄淑坚仇华吉; 关键词：生物安全养猪业疾病预防

靶向伪狂犬病病毒UL35基因的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立: 2024年; 对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)感染后不同时间点UL35和gB基因的进行定量分析,发现在感染细胞后2.5、5.0以及20.0 h时,两者基因组拷贝数具有显著差异,并且在PRV感染早期可以观察到UL35基因的表达。为了确定UL35基因能否作为诊断PRV感染的靶标,本研究根据PRV不同毒株UL35基因保守序列,设计合成特异性荧光定量PCR引物,扩增长度为54 bp的片段。通过优化反应条件和反应体系,结果显示,建立的PRV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法具有良好的重复性和特异性,其标准曲线与模板浓度呈现良好的线性关系;对猪繁殖和呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)核酸扩增均呈阴性;将所建立的方法与同类方法进行比较,敏感性无差异;组间和组内重复性试验的变异系数小于2%。用本试验所建立的方法对PRV感染小鼠的组织样品进行检测,均检测到一定的病毒载量。结果表明,UL35基因可以作为诊断PRV感染的靶标。; 张心雨吴红霞李永锋孙元付强仇华吉; 关键词：伪狂犬病病毒定量PCR

囊膜蛋白的糖基化修饰对病毒感染和致病性影响的研究进展被引量：1: 2022年; 糖基化(Glycosylation)是指蛋白质或脂质在酶的作用下连接糖链的一种修饰形式。作为生物体内最重要的蛋白质翻译后修饰形式之一,糖基化调控了蛋白质在组织和细胞中的定位、功能、活性、寿命和多样性[1-2]。细胞内超过50%的蛋白质均有糖链的修饰,它们参与了包括细胞识别、细胞分化、发育、信号转导、免疫应答等在内的各种重要的生命活动。在多种疾病,如肿瘤。; 赵小天袁梦淇张新杨晓柯马吉飞李永锋仇华吉; 关键词：囊膜蛋白蛋白质翻译后修饰病毒感染细胞识别细胞分化糖链

猪瘟病毒Npro蛋白核仁穿梭及其对病毒复制的影响: 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种烈性传染病。猪瘟病毒Npro蛋白具有自我切割酶活性和抑制Ⅰ型干扰素产生的...; 李永锋申梁黄俊华李超李素孙元仇华吉; 关键词：猪瘟病毒病毒复制

抗原表位鉴定的新方法及其递送系统的研究进展: 2025年; 表位疫苗是近年来快速发展的一种新型疫苗构建策略,具有安全性高、可诱导机体产生高效的特异性体液免疫和细胞免疫应答等优势。其中,抗原表位的鉴定和递送是设计表位疫苗的关键。相比传统的抗原表位鉴定方法,目前已发展了生物信息学、ELIspot以及细胞内细胞因子染色等多种新技术。由于用表位抗原肽直接免疫的效果通常不理想,因此为了使表位诱导良好的免疫应答,亟需有效的递送系统。目前,常用的抗原表位递送系统主要包括病毒载体和自组装纳米颗粒等非病毒载体两种。另外,为增强表位的免疫效果,常对抗原表位进行修饰,如多个抗原表位串联及靶向修饰等方法。本综述总结了精确鉴定具有良好免疫原性抗原表位的方法以及抗原表位的有效递送策略,以期为新型表位疫苗创制提供一定的理论指导。; 高玉璇翟焕杰宋鑫李树稳仇华吉李永锋; 关键词：表位疫苗 B细胞表位 T细胞表位递送系统

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李永锋