李世杰 作品数:64 被引量:200 H指数:7 供职机构: 河北农业大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 河北省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 化学工程 更多>>
牛体细胞核移植中Meg8基因DNA甲基化及印迹状态分析 2014年 为了确定Meg8基因内部CpG岛的甲基化在调控Meg8基因印记中的可能作用,本研究应用亚硫酸盐测序法分析Meg8基因内含子3上的17个CpGs位点等位基因特异的DNA甲基化状态。结果发现,2条亲本链的甲基化程度都比较高(>80%),但T链甲基化水平显著高于C链(P<0.05),并且C链只有1种甲基化模式。分析Meg8基因在出生后48h死亡的体细胞核移植牛肺中的甲基化和印迹状态,发现Meg8基因甲基化水平在核移植牛和自然繁殖牛中都比较高,但核移植牛的甲基化程度显著高于正常繁殖牛(P<0.05),并且只有1种完全甲基化的模式,而Meg8基因在核移植个体中的印记表达没有紊乱,仍表现为单等位基因表达,初步推测Meg8内含子3CpGs岛的甲基化可能没有参与调控Meg8基因的印记表达。 赵姝君 胡嘉祺 张明月 李冬杰 戴蕴平 李宁 李世杰关键词:DNA甲基化 印迹 第一次减数分裂期小鼠卵母细胞的化学去核 被引量:6 2004年 通过免疫荧光染色法确定了小鼠第一次减数分裂的进程 ,在此基础上分别用脱羧秋水仙碱和放线菌酮处理成熟培养的小鼠卵母细胞 ,抑制其纺锤体极间微管的延长和降低成熟促进因子的浓度 ,使其核物质随极体全部排出 .结果表明 :(1)卵母细胞从有腔卵泡中分离时处于生发泡期 ,可见核仁 ;成熟 2h内则全部发生生发泡破裂 ;培养 5h ,90 %到达第一次减数分裂的前中期 ;培养 8h ,则 33.3%处于中期 ;71.4 %的细胞在成熟 12h后发育为后期 ;第二次减数分裂的中期则于成熟培养 15h发生 .(2 )于成熟的不同时间取卵母细胞 卵丘细胞复合体进行去核处理后发现 ,体外成熟培养 5h(即卵母细胞处于第一次减数分裂前中期时进行处理 ) ,其去核率最高 ,达85 .6 % ;成熟 5h之前各组随成熟培养时间的延长而去核率升高 ,之后各组则降低 .(3)比较卵母细胞 卵丘细胞复合体与自然裸卵去核率 ,后者效率为 5 6 % ,显著低于前者 (p <0 .0 5 ) ,因此该方法在卵母细胞 卵丘细胞复合体的完全去核率与传统的物理去核方法相当 . 杜卫华 李世杰 李彦欣 戴蕴平 王莉莉 王美丽 郑敏 李宁关键词:卵丘细胞 放线菌酮 减数分裂 有腔卵泡 Gab1和Sfmbt2基因在成年普通牛8种不同组织中的印记状态分析 被引量:1 2017年 旨在揭示Gab1(Grb2-associated binding protein 1)和Sfmbt2(Scm-like with four mbt domains 2)基因在牛不同组织以及胎盘中的印记状态,本研究应用基于单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNP)的RT-PCR(Reverse transcription-PCR)产物直接测序方法对Gab1和Sfmbt2基因在牛7个组织(心、肝、脾、肺、肾、肌肉和脂肪)以及胎盘中的印记状态进行分析。结果显示,在被分析的7个组织和胎盘中均检测到Gab1和Sfmbt2基因的表达。通过比较杂合子牛基因组PCR扩增产物与RT-PCR扩增产物在SNP位点的测序峰图,发现Gab1和Sfmbt2在被检测的7个组织和胎盘中均为双等位基因表达,说明Gab1和Sfmbt2在牛的组织和胎盘中是非印记的。 王冠楠 赵宇鹏 陈玮娜 张萃 徐达 李冬杰 李世杰关键词:SNP 河北省重大牛病防治生物工程技术研究与开发 口蹄疫、结核病与乳腺炎是当前危害我省养牛业发展和人民健康的重大疾病,特别是卷土重来的肺结核已成为人类健康的三大杀手。在选择压力的作用下,原本只引起牛乳腺炎的无乳链球菌所表达的超抗原也成了新生儿休克综合征的病因,且病情凶险... 王家鑫 宋勤叶 范京惠 李世杰 刘艳琴 左玉柱关键词:口蹄疫 乳腺炎 佐剂 免疫治疗 文献传递 哺乳动物体细胞核移植方法研究进展 被引量:5 2005年 杜卫华 徐慰倬 李世杰 李宁关键词:哺乳动物体细胞核移植 显微操作 林业生态工程建设的优良树种——樗树 2003年 刘淑清 刘宝忠 张进献 李世杰 李冬杰关键词:林业生态建设 生态价值 育苗 造林 负氧离子对蚕繁殖力的影响 被引量:1 2002年 采用AS系列负氧离子 (O- 2 )发生器 ,使蓖麻蚕、家蚕 1~ 5龄生活在空气富含O- 2 (浓度 >5× 10 4 N/cm2 )的蚕室中 ,按蛹、蛾、卵、蚁蚕、蚕系列生殖发育顺序 ,系统地研究了负氧离子对它的影响与作用。结果表明 :处理组比对照组出蛾齐一 ,羽化率增高 ,产卵速度加快 ,总产卵量增多 ,良卵率加大 ,不受精卵率减少 ,胚子发育整齐 ,孵化齐一 ,孵化率增高 ,并在一定程度上能增进次代蚕的强健度。另外 ,幼虫期和卵期环境中都补充O- 2 ,可使实用孵化率极显著地高于对照 11 38个百分点 (家蚕 )和 9 0 8个百分点 (蓖麻蚕 ) ,而只在卵期补充负氧离子 ,也可有效地促进胚子发育与孵化齐一 ,获得与整个蚕期补充O- 2 相近效果。 李冬杰 魏景芳 王淳 李世杰关键词:家蚕 蓖麻蚕 繁殖力 化学去核卵母细胞为受体的小鼠体细胞核移植 卵母细胞的化学去核是采用干扰染色体分离或纺锤体正常功能的化学试剂,使其所有染色质通过纺锤丝牢固结合,并借助极体排出的惯性将所有染色质全部带出胞外,达到去核目的.目前以化学去核处理的MⅡ期卵母细胞为受体,已获得克隆小鼠.然... 杜卫华 李世杰 郑敏 戴蕴平 李宁关键词:繁殖技术 卵母细胞 体细胞核移植 文献传递 Ascl2、Nap1l4和Osbpl5基因在牛胎盘中的表达分析 2018年 基因组印记是一个复杂的表观遗传修饰过程,从而使印记基因呈单基因表达的模式。大部分的印记基因在动物的胎盘中表达,通过调节胎盘的生长和转运能力而促进妊娠和胎儿发育。CDKN1C/KCNQ1OT1印记区域与人类的BWS综合症以及肿瘤的发生有关。Ascl2、Nap1l4和Osbpl5是位于CDKN1C/KCNQ1OT1印记区域的3个基因,其在小鼠和人胎盘中的表达存在差异,在小鼠的胎盘中3个基因是印记的,而在人中为非印记。本研究利用基于单核苷酸多态性(single-nucleotidepolymorphism,SNP)的RT-PCR产物直接测序法分析了Ascl2、Nap1l4和Osbpl5在牛的胎盘中表达状态,结果发现Ascl2、Nap1l4和Osbpl5基因在牛的胎盘中的表达与人相似,是双等位基因表达,说明Ascl2、Nap1l4和Osbpl5在胎盘中印记表达模式具有物种特异性。 徐雅迪 陈玮娜 徐达 李世杰 张萃关键词:印记基因 胎盘 基因组印记 牛Meg8基因5′末端的克隆及生物信息学分析 被引量:2 2011年 利用RACE方法从奶牛中克隆得到了Meg8基因的5′端cDNA序列(GenBank登录号:HQ407410~HQ407413),序列比对发现该基因存在4种可变剪接体。选取牛Meg8基因的5′侧翼区作为研究对象,生物信息学在线分析发现:在人、绵羊、鼠、猪、狗和马这几个物种中,牛Meg8基因5′侧翼区与绵羊相似性最高,为80.45%;该区域内存在2个SINEs、1个Si mple repeat,未发现CpG岛;可能存在2个启动子位点,位于牛Meg8基因的Exon1前3 402~4 118 bp和1 200~1 367 bp处,并富含Sp1、SRY、CdxA、GATA-1、MZF1等多个潜在的转录因子位点。Meg8基因5′侧翼区密集存在的转录因子可能与基因的转录起始有关。可变剪接体及侧翼区域的诸多转录因子可能是Meg8基因行使调控功能的原因,本研究结果将为阐明该基因的功能及其调控机理提供分子基础。 侯晓慧 苏红 李世杰关键词:可变剪接 启动子 转录因子结合位点