张涛
- 作品数：10 被引量：17H指数：3
- 供职机构：武汉生物制品研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HSV-tk基因/GCV系统治疗肿瘤的旁观者效应与缝隙连接关系的研究被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV－tk）基因／丙氧鸟苷（GCV）系统杀伤肿瘤细胞时旁观者效应与细胞间缝隙连接的关系。方法 用PA317细胞包装STK质粒（逆转录病毒载体介导的HSV-tk基因），形成假逆转录病毒颗粒，转染有缝隙连接的大鼠胶质瘤细胞C6和无缝隙连接的入宫颈癌细胞 Hela，制成 C6 tk+和 Helatk+细胞，将不同比例的C6和 C6 tk+、Hela和 Hela tk+细胞混合，每种比例8孔，培养 24h后 4孔加入含0．5μg/mlGCV的培养基，4孔作对照，6d后用MTT法测量细胞存活率。在两个培养皿中放入周围粘有33mm高滤纸的载玻片，分别接种 C6、C6 tk+细胞。细胞 80%汇合后将载玻片互换，并加入含0．5μg/ml GCV的培养基，6d后观察细胞形态。结果C6细胞组存在旁观者效应，Heal细胞组不存在旁观者效应。培养皿中tk+细胞大部分被杀死,tk-细胞无变化。结论HSV-tk基因/GCV系统杀伤肿瘤细胞时旁观者效应与细胞间缝隙连接有关。
- 曹剑峰汪超英张涛王志友李涛李玲莉李承晏余绍祖
- 关键词：HSV-TK基因基因治疗肿瘤旁观者效应
- 外源指导序列逆转绿脓杆菌耐药性被引量：1
- 2001年
- 本研究利用CaCl2 转化法 ,将构建的含针对氨苄青霉素耐药基因bla的外源指导序列 (EGS)的编码序列的质粒PMMB2 0 7 AmpEGS导入绿脓杆菌A6 19菌株中 ,通过原位杂交挑选转化菌 (t A6 19) ,并检测其在含氨苄青霉素LB培养基中的生长情况。结果表明 ,利用针对氨苄青霉素耐药性基因的外源指导序列 (EGS) ,能将氨苄青霉素耐药菌株A6
- 汪超英张涛高美英齐俊英封江南
- 关键词：绿脓杆菌耐药性氨苄青霉素菌株质粒
- 杂交瘤细胞核糖核酸抗病毒作用被引量：1
- 1999年
- 目的：从分泌抗狂犬病毒糖蛋白单克隆抗体（ＩｇＭ）杂交瘤细胞中提取核糖核酸，研究其抗狂犬病毒的作用。方法：腹腔注射该种核糖核酸４ｗ后用狂犬病毒ＣＶＳ株进行颅腔攻击。结果：该核糖核酸能明显延长动物的生存时间。结论：该核糖核酸对狂犬病毒且有一定的抵抗作用。
- 张涛封江南
- 关键词：免疫核糖核酸杂交瘤狂犬病毒
- HIV-1跨膜蛋白gp41的截短及表达被引量：3
- 2003年
- 将HIV 1跨膜蛋白gp4 1进行截短 ,在大肠杆菌中进行表达并纯化。PCR扩增 gp4 1的部分编码基因 ,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体 pGEM T上 ,然后用EcoRⅠ和Sa1Ⅰ切下目的基因 ,并构建到表达载体pGEX 4T3上 ,导入宿主细胞BL2 1(DE3) ,用IPTG诱导表达 ,表达产物用亲和层析进行纯化并作相应鉴定。截短的HIV 1跨膜蛋白 gp4 1能直接在大肠杆菌内进行表达 ,利用亲和层析能方便地将目的蛋白进行纯化 。
- 端义坤张涛余模松
- 关键词：人类免疫缺陷病毒1型基因表达
- 荧光标记CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制被引量：1
- 2007年
- 目的对荧光素标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。方法采用多参数的流式细胞分析技术,对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价,并进行稳定性试验。结果荧光标记的单克隆抗体特异性保持完好;单色标记的抗体荧光强度均比进口对照低一个数量级;FITC-CD3/PE-CD4平均荧光强度与进口对照相差较大,FITC-CD3/PE-CD8和FITC-CD4/PE-CD8平均荧光强度与进口对照相差较小;FITC标记产物的F/P值控制在1～2之间;标记抗体于2～8℃放置18个月,稳定性良好。结论应用FITC、PE标记的CD3、CD4和CD8单克隆抗体可以采用流式细胞仪进行检测。
- 孙可芳肖建闭兰端义坤赵亚杰张涛张爱华
- 关键词：流式细胞术荧光素标记单克隆抗体
- 利用生物信息学确定质粒中所含HIV基因片段相应特性被引量：5
- 2003年
- 目的 确定质粒中所含HIV基因片段的来源以及相应表达产物的特性。方法 将质粒中的该段基因克隆到载体pUC19上进行测序后 ,利用生物信息学相关技术对该基因序列进行分析 ,并对其表达产物的基本特性作初步预测。结果 分析表明 ,该段基因与HIV ⅢB的同源性高达 99% ,属于HIVenv基因的序列 ,表达的产物含有HIVgp4 1和gp12 0的部分结构。结论 利用生物信息学的有关方法能迅速地对序列进行准确分析 ,有利于生物学、医学的迅速发展。
- 张涛端义坤余模松
- 关键词：人免疫缺陷病毒生物信息学跨膜蛋白
- 荧光素标记抗CD3/CD4/CD8单克隆抗体的质量控制
- 目的：对本室用荧光素标记的抗CD3、CD4和CD8单克隆抗体进行质量控制。
方法：采用流式细胞术，利用其多参数的流式细胞分析技术，对单色、多色荧光标记抗体的偶联率及偶联效果进行分析与评价。
结果: 荧...
- 孙可芳闭兰端义坤赵亚杰张涛张爱华
- 关键词：荧光标记单克隆抗体生物制品
- 文献传递
- HIV-2跨膜蛋白gp36的截短及表达被引量：1
- 2003年
- 目的 将HIV-2跨膜蛋白gp36进行截短,并在大肠杆菌中表达。方法 用PCR将gp36的编码基因进行截短,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用 BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ切下目的基因,并构建到表达载体pGEX-4T3上,导入宿主细胞BL21(DE3),用IPTG诱导表达。结果 成功地对gp36进行了截短,并且构建到表达载体上进行表达。结论 截短的HIV-Ⅱ跨膜蛋白gp36能直接在大肠杆菌内进行表达,为跨膜蛋白的进一步应用打下基础。
- 张涛彭祥兵端义坤余模松
- 关键词：跨膜蛋白基因表达
- HIV跨膜蛋白gp36-gp41的截短及联合表达
- 目的:将HIV-1的跨膜蛋白gp41和HIV-2跨膜蛋白gp36进行截短,并在大肠杆菌中进行联合表达.方法:用PCR将gp41和gp36的编码基因进行截短,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用Bam...
- 张涛孙可芳汪超英端义坤彭祥兵王志友余模松
- 关键词：人类免疫缺陷病毒1型跨膜蛋白
- 文献传递
- 应用疏水层析纯化HIV-1跨膜蛋白gp41截短体包涵体被引量：3
- 2004年
- 目的对表达HIV-1跨膜蛋白gp41截短体包涵体进行纯化。方法将收获的表达菌体洗涤、超声波破菌、预处理后进行疏水层析。结果纯化后的gp41截短体的融合蛋白纯度达到90％,并且具有较好的抗原性和特异性。结论利用疏水层析可以将目的蛋白进行有效的纯化,为下一步的应用打下基础。
- 端义坤汪超英孙可芳张涛
- 关键词：人类免疫缺陷病毒1型HIV-1GP41包涵体疏水层析
