张军权
- 作品数：45 被引量：121H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金军队指令性项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 重组人G-CSF构象异构体的分离与鉴定被引量：2
- 2000年
- 目的 :探索原核基因工程产品质量控制的指标。方法 :以重组粒细胞集落刺激因子(G CSF)为模型 ,将其中构象不均一组分进行分离 ,并对每个成分进行鉴定。结果 :重组人G CSF在大肠杆菌中以包涵体形式表达 ,经纯化和复性后 ,SDS PAGE鉴定为单一蛋白带 ,但在非变性PAGE中出现 3条带 ,继而采用制备型非变性PAGE成功地将 3种成分分离。 3种成分在同样的缓冲体系中分别存放 3个月 ,仍未见互变异构现象。经激光解析飞行时间质谱检测 ,3种成分相对分子质量相同 ,测序表明 ,N端连续的 5个氨基酸残基排列完全相同。结论 :3种成分为重组蛋白的不均一折叠形成的构象异构体。
- 张军权陈惠鹏王清明陈吉中范国才
- 关键词：粒细胞集落刺激因子G-CSF
- STAT3 siRNA引起U251细胞凋亡的研究
- 2008年
- 目的:观察利用siRNA技术下调人脑胶质母细胞瘤细胞(U251)STAT3表达后对细胞凋亡的影响。方法:分离培养并间接免疫荧光鉴定大鼠原代星形胶质细胞(NA),用STAT3干涉质粒载体(pSilence2.1-STAT3)及对照载体(pSilence2.1-GFP)转染U251细胞及NA细胞,用Hoechst 33258染色观察凋亡的形态学改变,用Annexin-V试剂盒定量检测凋亡。结果:分离培养了符合实验要求的NA细胞,转染pSilence2.1-STAT3后,U251细胞出现了明显的时间依赖性细胞凋亡,而NA细胞无显著凋亡发生。结论:pSilence2.1-STAT3能诱导U251细胞凋亡,而对正常细胞无显著影响。
- 李峰生高玲董波张军权饶亚岚丛悦毛秉智陈肖华
- 关键词：胶质母细胞瘤小干扰RNA转录激活因子3U251细胞细胞凋亡
- 小鼠受γ射线全身照射后FL表达变化的研究
- 2004年
- 目的 FL(flt3ligand)是一种作用于早期造血细胞的生长因子 ,为进一步研究FL水平与辐射所致造血损伤的相关性 ,观察了小鼠受γ射线全身照射后FL的表达变化。方法 以6 0 Coγ射线全身一次性均匀照射所致骨髓型急性放射病小鼠为模型 ,应用ELISA、流式细胞术、Westernblot法检测照射前后小鼠外周血、骨髓、胸腺与脾脏中FL的表达变化。结果 小鼠受 2～ 10Gyγ射线照射后 2 4h ,血清中FL浓度即有增加 ,并且随时间推移FL水平逐渐升高 ;吸收剂量在 2～ 6Gy之间时 ,FL的水平随剂量增加而增加。 6Gyγ射线照射后 2 4h ,外周血白细胞膜表面FL的表达增加 ,但 2 4h后细胞膜表面FL的表达没有升高。 6Gyγ射线照射后 2 4h ,骨髓、胸腺和脾脏有核细胞膜表面FL的表达明显升高 ,总蛋白中FL的水平亦明显增加。结论 辐射后早期小鼠FL可溶性与膜结合型蛋白的水平都有升高 ,而且辐射后血清中FL的水平与受照剂量及照射后时间存在相关性。
- 于丽梅陈肖华饶亚岚董波王治东张军权高荣莲张燕毛秉智
- 关键词：小鼠FL全身照射Γ射线照射细胞膜
- SCF和IL-6双基因共转染促进小鼠造血和免疫功能的恢复被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨逆转录病毒介导的IL 6和SCF双基因共转染骨髓基质细胞对辐射小鼠造血和免疫功能的影响。方法 利用动物实验观察逆转录病毒介导的含IL 6和SCF双基因共转染的骨髓基质细胞对辐射小鼠外周血、骨髓有核细胞数、骨髓细胞CFU GM培养、脾脏淋巴细胞LTT、CD4 CD8等指标的影响。结果 表明转IL 6和SCF基因的骨髓基质细胞可以促进辐射小鼠造血和免疫功能的恢复。结论 IL 6与SCF双基因在骨髓基质细胞中获得表达 ,为进一步研究转基因骨髓基质细胞对造血调控的作用奠定了基础。
- 张浩毛秉智董波陈肖华张军权罗庆良秦凤华
- 关键词：骨髓基质细胞IL-6免疫功能SCF造血功能
- 寡聚核苷酸芯片技术筛选电离辐射后大鼠PC12细胞的差异表达基因被引量：1
- 2005年
- 目的为探讨中枢神经系统辐射损伤的分子机理,采用寡聚核苷酸芯片技术研究16Gy60Coγ射线照射前后PC12细胞基因的表达变化。方法采用大鼠寡聚核苷酸芯片技术进行辐射相关基因的筛查,芯片探针进行荧光交换标记,且每个基因重复3次点阵;分析结果,选取感兴趣基因进行RTPCR半定量验证。结果基因芯片筛查有40个差异表达基因,其中上调基因37个,下调基因3个。这些差异基因主要涉及细胞周期、代谢、信号转导、免疫与应激、细胞增殖、生长发育及细胞凋亡等多个方面。RTPCR结果显示照射后48hPC12细胞OAS1、GARG16和IL6mRNA表达水平均上调,与芯片结果一致。结论PC12细胞可用于神经细胞辐射后信号转导、细胞代谢、生长发育、应激反应以及细胞增殖等方面的研究。
- 高荣莲陈肖华饶亚岚张军权王治东董波侯丽莉张浩毛秉智
- 关键词：PC12细胞差异表达基因电离辐射^60COΓ射线照射细胞基因基因重复
- 钙结合蛋白S100A8在放射性肺纤维化早期的表达及意义被引量：1
- 2008年
- 本研究结合体内外实验,探讨了钙结合蛋白S100A8在放射性肺纤维化早期的表达及意义。20Gy60Coγ射线全胸照射大鼠,建立大鼠放射性肺纤维化模型,分别于照射后1周、2周及4周活杀后取肺,采用免疫组化方法检测S100A8蛋白水平的变化;采用RT-PCR方法检测S100A8及与其形成复合物的S100A9 mRNA水平的变化。对于体外培养的小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用RT-PCR方法检测该细胞受γ射线与脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)处理后S100A8 mRNA水平的变化。照射后4周,S100A8蛋白在大鼠肺部巨噬细胞胞浆增强表达,S100A8和S100A9 mRNA在大鼠肺部也增强表达。结果表明,RAW264.7细胞中,γ射线与LPS能够协同作用增强该细胞S100A8 mRNA的表达。S100A8在放射性肺纤维化早期于巨噬细胞表达增强,发挥其趋化活性,参与炎症发生,进而在放射性肺纤维化形成过程中发挥作用。
- 饶亚岚李明丛悦李峰生陈肖华董波张军权高玲毛秉智
- 关键词：放射性肺纤维化S100A8巨噬细胞炎症反应
- STAT3 RNAi联合γ射线照射对U251细胞增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 目的构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3（STAT3）的小干扰RNA（siRNA）表达载体并检测联合^60Coγ射线照射对U251细胞STAT3表达及细胞增殖的抑制作用。方法设计、合成STAT3特异性的19bD短链寡核苷酸，经退火形成双链DNA片段，克隆到pSilence2．1-U6-H1载体中，构建STAT3特异siRNA的表达载体，HindⅢ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体。并转染U251细胞，免疫印迹法（Western blot）检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平，四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测细胞增殖活性，克隆形成率及MTT实验确定放疗剂量。结果经双酶切与测序鉴定成功构建pSilence2．1-STAT3表达载体，转染星形胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞中STAT3蛋白的表达水平；确定2Gy为放疗剂量。转染pSilence2．1-STAT3。细胞增殖活性较未转染U251细胞显著降低（P〈0．05），联合^60Coγ射线照射U251细胞增殖活性单独转染进一步显著降低（P〈0．05）。结论运用pSilence2．1-U6-H1载体构建的pSilence2．1-STAT3表达载体可有效抑制STAT3的表达及星形胶质瘤细胞的增殖；联合2Gy ^60Coγ射线照射可增加抑制效果。
- 高玲李峰生董波张军权饶亚岚王治东丛悦毛秉智陈肖华
- 关键词：小干扰RNA转录激活因子3U251细胞
- 重组人血小板生成素融合蛋白工程菌发酵工艺的研究
- 2001年
- 对表达重组人血小板生成素融合蛋白 (rhTPO/GST)工程菌的发酵条件进行了较详细的研究 ,优化了影响工程菌发酵的条件 ,探讨了发酵条件对工程菌表达外源蛋白量的影响。结果发现采用复合培养基分阶段流加有机营养物 ,用异丙基硫代 -B -D -半乳糖苷 (IPTG)进行诱导 ,使rhTPO/GST融合蛋白的湿菌重达 2 5 g/L以上 ,表达水平约占菌体总蛋白的 3 0 %左右。在此基础上 。
- 魏汉东邢桂春张津辉张军权陈惠鹏贺福初
- 关键词：融合蛋白大肠杆菌TPO发酵工艺工程菌
- 用cDNA微阵列研究辐射损伤小鼠骨髓细胞基因的表达被引量：2
- 2001年
- 为了探讨辐射引起小鼠骨髓细胞损伤后基因表达的变化 ,运用常规分子生物学和cDNA微阵列杂交技术 ,观察小鼠受大剂量射线全身一次性照射后 ,骨髓细胞中 5 88种已知功能基因的表达情况。初步得到辐射损伤后骨髓细胞某些功能基因的差异表达变化谱 ;结果表明 ,辐射可诱导小鼠骨髓细胞中一系列基因表达变化 ,这些基因可能参与了辐射所致骨髓细胞损伤的过程。
- 张浩毛秉智张军权陈肖华董波
- 关键词：小鼠骨髓细胞基因表达
- 重组人G-CSF构象异构体的研究
- 重复组人G-CSF在大肠杆菌中以包涵体形式表达,经纯化和复性后,SDS-PAGE鉴定为单一蛋白带,但在等电聚焦电泳中出现三条带,等电点差别较小.FPLC离子交换层析,反相柱层析和制备型液相等电聚焦均未能将三种成分分开.同...
- 张军权
- 关键词：复性
