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周明乾

作品数：36 被引量：99H指数：6
供职机构：南方医科大学生物技术学院更多>>
发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 31篇期刊文章
  • 3篇会议论文
  • 2篇专利

领域

  • 28篇医药卫生
  • 5篇生物学
  • 2篇化学工程
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 27篇细胞
  • 15篇基因
  • 9篇蛋白
  • 7篇融合蛋白
  • 7篇受体
  • 6篇细胞受体
  • 5篇血管
  • 5篇细胞生长
  • 5篇互补决定区
  • 5篇互补决定区3
  • 5篇白细胞
  • 5篇白细胞介素
  • 4篇血管内皮
  • 4篇血管内皮细胞
  • 4篇血管内皮细胞...
  • 4篇血管内皮细胞...
  • 4篇血小板
  • 4篇血小板生成
  • 4篇血小板生成素
  • 4篇肿瘤

机构

  • 27篇南方医科大学
  • 9篇中国人民解放...
  • 4篇华南理工大学
  • 3篇南方医科大学...
  • 1篇广州中医药大...
  • 1篇清华大学
  • 1篇湖南理工学院
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇北京安波特基...

作者

  • 36篇周明乾
  • 18篇王小宁
  • 15篇马骊
  • 11篇胡志明
  • 10篇温茜
  • 8篇高基民
  • 8篇林来兴妹
  • 8篇罗微
  • 5篇陈泽洪
  • 4篇宁云山
  • 3篇孟民杰
  • 3篇李妍
  • 3篇杨介钻
  • 3篇姚新生
  • 3篇向阳
  • 3篇罗薇
  • 3篇胡志明
  • 2篇郭坤元
  • 2篇汤明芳
  • 2篇方向东

传媒

  • 9篇南方医科大学...
  • 8篇第一军医大学...
  • 2篇广东医学
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇科学通报
  • 1篇中国生化药物...
  • 1篇生命的化学
  • 1篇第二军医大学...
  • 1篇癌症
  • 1篇中国公共卫生
  • 1篇中国生物化学...
  • 1篇吉首大学学报...
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇国际眼科杂志
  • 1篇第九届全国肿...
  • 1篇第十届全国免...

年份

  • 2篇2015
  • 1篇2014
  • 2篇2012
  • 1篇2010
  • 9篇2008
  • 5篇2007
  • 3篇2006
  • 4篇2005
  • 1篇2004
  • 1篇2003
  • 2篇2002
  • 3篇2001
  • 2篇1997
共 36 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
人血小板生成素基因cDNA和基因组DNA的克隆和序列测定被引量：2
2001年
目的研究内含子和5＇非翻译区对血小板生成素(TPO)基因表达的影响.方法以中国人胎肝mRNA为模板,应用RT-PCR和长距离PCR(LD-PCR)技术扩增了约1.1kb的全长人TPO cDNA.6.2 kb的TPO基因组DNA和TPO基因组中的内含子I,内含子Ⅱ～Ⅳ和内含子Ⅴ.结果全序列分析表明,全部的编码序列、所有的内含子/外显子剪切部位序列同已知一致,个别差异发生在内含子中.结论通过PCR扩增技术,成功地从中国人胎肝组织中克隆了全长人TPO cDNA、TPO基因组DNA及其全部的内含子.
宁云山周宏伟周明乾陈泽洪方向东富宁王小宁
关键词：血小板生成素基因组DNA内含子克隆
Wnt基因的类别及功能被引量：5
2007年
Wnt是一类癌基因,在动物发育过程中具有广泛的作用。该文介绍哺乳动物基因组中19个Wnt基因的功能。
向阳高基民胡志明周明乾
关键词：癌基因
大肠杆菌表达的人血管内皮细胞生长因子的复性与纯化研究(英文)被引量：4
2006年
以包涵体的形式在大肠杆菌中表达人血管内皮细胞生长因子(VEGF121) , 采用发酵罐进行工程菌的高密度发酵,得到菌干重 46 g/L, VEGF121 包涵体 4.5 g/L。包涵体经洗涤、溶解、超滤法复性, 得率为 81%。复性后的目标蛋白经离子交换色谱及 Sepharcry S-100 凝胶过滤色谱纯化, 目标蛋白的纯度达到 95%, 目标蛋白的总得率 31%。采用该工艺制备的 VEGF121 能刺激人脐静脉血管内皮细胞增殖, 具有天然 VEGF 生物学活性。
胡志明马骊周明乾高基民王小宁
关键词：血管内皮细胞生长因子
鼻咽癌细胞株体外诱导同种异体T细胞TCR Vβ CDR3谱型和细胞毒性分析被引量：1
2007年
目的用鼻咽癌细胞株CNE2体外负载同种异体树突状细胞(dendritic cell,DC)诱导T淋巴细胞,使之活化为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL),观察其体外特异性杀伤和克隆性增殖。方法用GM-CSF,IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者外周血单核细胞,用CNE2负载,使之分化为成熟DC,流式细胞仪检测负载前后DC的表型特征。在IL-2的作用下,用负载CNE2抗原的DC诱导自身T细胞生成特异性CTL。乳酸脱氢酶释放法检测其特异性杀伤活性;采用免疫谱型分析技术分析T细胞的克隆性。结果健康志愿者外周血单核细胞体外在GM-CSF,IL-4和TNF-α诱导下获得具有典型表型特征的成熟DC,其诱导的CTL对CNE2有明显的特异性杀伤作用;PBMC的TCRVβCDR3谱型呈高斯分布,而诱导后的T细胞部分家族出现优势表达。结论负载鼻咽癌抗原的同种异体DC所诱导的CTL在体外对鼻咽癌细胞有特异性杀伤作用,优势表达的TCRVβCDR3家族对鼻咽癌治疗有潜在的临床应用价值。
常红罗薇马骊周明乾温茜魏红梅梅家转郭坤元
关键词：CNE2细胞毒性T淋巴细胞互补决定区3克隆性增殖
腺相关病毒-1介导增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠角膜基质细胞体内外转染的研究被引量：5
2007年
目的：探讨血清1型腺相关病毒（rAAV1）介导增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因体内、外转染大鼠角膜基质细胞后绿色荧光蛋白（GFP）的表达及转染率。方法：采用携带绿色荧光蛋白报告基因的血清1型腺相关病毒（rAAV1-EGFP）感染原代培养的SD大鼠角膜基质细胞，通过荧光显微镜和流式细胞仪观察和检测EGFP的表达及阳性率。建立大鼠异体角膜移植模型，用含rAAV1-EGFP转染液的培养基在37℃孵育SD大鼠角膜植片同时浸泡缝线18h，再用此缝线间断缝合，将植片移植到大鼠角膜植床，术后通过荧光体视镜观察Wistar大鼠角膜出现EGFP荧光的起始时间及分布情况。结果：按rAAV1-EGFP不同转染倍数（MOI）转染角膜基质细胞。转染后3d，在倒置荧光显微镜下观察到角膜基质细胞的细胞质有GFP阳性表达。体视荧光显微镜观察到大鼠角膜中开始有GFP阳性表达；随MOI值的增高而增强，转染再7～9d达到高峰，此时检测rAAV1-EGFP对角膜基质细胞的转染效率，MOI=10^时是16．3％，MOI=10^4时是30．3％，MOI=10^5时是43．6％，MOI=10^6时是47．5％.rAA1－ECFP在大鼠角膜中的表达也明显增强。结论：rAAV1-ECFP可以在体内外稳定、有转染大鼠角膜基质细胞，是角膜基质细胞理想的报告基因。
汤明芳陆晓和周瑾温茜周明乾罗薇袁伟宫玉波
关键词：腺相关病毒绿色荧光蛋白质类角膜基质细胞
大鼠WAP启动子指导人TPO在真核细胞中瞬时表达
2014年
目的构建以大鼠WAP启动子调控的人血小板生成素(TPO)真核表达质粒并进行瞬时表达,探讨TPO基因组中不同内含子对TPO表达影响。方法通过基因工程方法构建以大鼠WAP启动子调控的6种TPO真核表达质粒,并通过酶切和测序进行鉴定,将上述重组质粒分别在HC-11和COS-1细胞上转染48 h后,通过双抗体夹心ELISA定量分析转染上清中TPO表达。结果酶切及测序分析表明构建与设计相符,6种重组质粒在COS-1细胞和HC-11细胞中均获得表达,其表达水平从高到低依次为pTPOWE>pTPOWA>pTPOWD>pTPOWB>pTPOWC>pTPOWF,其中含有TPO IntronⅤ的重组质粒pTPOWE表达量最高,而含有TPO全基因组的重组质粒pTPOWF表达量最低。结论 IntronⅤ可能含有特殊增强TPO表达序列,而TPO基因组中可能存在抑制TPO高水平表达结构元件。
李妍陈艳周明乾周宏伟宁云山
关键词：血小板生成素内含子基因表达
生殖域中特异表达的新基因Rcet2的克隆
2008年
利用NCBI中的数字差异显示数据库首先电子克隆了Rcet2基因,然后从成年小鼠睾丸组织中克隆出Rcet2全长基因,序列分析显示:Rcet2基因全长cDNA为454 bp,含3个外显子,编码88个氨基酸残基,该蛋白含1个不完整的半胱氨酸蛋白酶抑制剂结构域,但缺少半胱氨酸蛋白酶抑制剂关键的作用位点,而这些位点对半胱氨酸蛋白水解酶的抑制作用是重要的.小鼠多组织RT-PCR结果显示,Rcet2在成年老鼠大脑、睾丸和附睾生殖域中特异表达,睾丸中的表达高于附睾和大脑,Rcet2与半胱氨酸蛋白酶抑制家族2的Cres亚家族具有相似的特征,结果显示Rcet2可能是Cres亚家族中的一个新成员.
向阳邹寿长周延凯周明乾聂东宋
关键词：克隆半胱氨酸蛋白酶抑制剂
抗HLA-A~*0201重链卵黄抗体的制备及初步鉴定被引量：1
2003年
目的制备高效价特异性鸡卵黄免疫球蛋白(Yolk immunoglobulin,IgY)抗体。方法用纯化HLA-A*0201重链抗原加完全福氏佐剂免疫岭南黄鸡,经水稀释法初步纯化浓缩后,用ELISA鉴定其免疫学活性,测定纯化后蛋白含量,并用SDS-PAGE进行分析鉴定。结果获得ELISA效价为1×106的抗重链IgY抗体,蛋白含量为9.77 mg/ml。经SDS-PAGE分析,出现2条蛋白带,纯度达90%以上。结论用重链抗原加福氏佐剂免疫种鸡制备的IgY抗体产量多、效价高,为结合HLA-A*0201复合体诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞活化奠定了基础。
孟晓静孟民杰林来兴妹周明乾王小宁
关键词：IGY
IL-2体外诱导健康人外周血T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移的研究被引量：3
2007年
目的研究IL-2对体外培养的T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移的影响。方法分离健康志愿者外周血T细胞,加入IL-2,常规体外培养,乳酸脱氢酶释放法检测其非特异性杀伤活性;采用免疫谱型分析技术,分析其CDR3长度以判断T细胞的克隆性。结果3例健康志愿者外周血T细胞对鼻咽癌细胞系CNE2没有杀伤作用;PBMC的TCRVβCDR3谱型均呈高斯分布,经IL-2体外培养后部分家族出现不同的优势表达。结论IL-2对体外培养的T细胞TCRβ链CDR3谱系漂移有一定影响,对其非特异性杀伤无影响。
常红罗薇马骊周明乾温茜吴远彬黄宇贤郭坤元
关键词：IL-2T细胞受体互补决定区3
GFP-SA融合蛋白的表达纯化及其锚定修饰肿瘤细胞的研究被引量：1
2008年
GFP(绿色荧光蛋白)-SA(链亲和素)双功能融合蛋白的制备及其鉴定研究,以展示所建立的技术平台,即用含链亲和素的双功能融合蛋白对生物素化的细胞表面进行高效的锚定修饰。构建原核表达载体pET24d/GFP-SA转化大肠杆菌BL21(DE3)。用IPTG诱导重组蛋白的表达,用镍金属螯合(Ni-NTA)层析柱进行纯化。用制备的GFP-SA双功能融合蛋白,对B16肿瘤细胞已生物素化的细胞表面进行修饰,经荧光显微镜和流式细胞仪进行修饰效率分析。此外,用MTT法检测细胞表面修饰对肿瘤细胞活力及其生长情况的影响。GFP-SA重组融合蛋白在大肠杆菌实现了高效表达(约占细菌总蛋白的20%),通过纯化和复性制备的GFP-SA双功能融合蛋白具有双重活性,即:链亲和素介导的、对生物素高效特异的结合活性,和GFP发射绿色荧光的活性,并能高效修饰表面已生物素化的肿瘤细胞。此外,GFP-SA双功能融合蛋白的细胞表面修饰对细胞的活力及其生长无显著影响。GFP-SA融合蛋白能高效修饰表面已生物素化的肿瘤细胞,可用作肿瘤疫苗研究的示踪蛋白及实验对照体系。
周明乾林来兴妹胡志明苏华徐翠香高基民
关键词：绿色荧光蛋白链亲和素融合蛋白肿瘤细胞
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