吕小枫
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 供职机构：上海市疾病预防控制中心更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 幽门螺杆菌ureA、ureB基因克隆、序列分析及在E.coli中表达被引量：2
- 2002年
- 目的 构建含幽门螺杆菌 (Hp) ure A、ure B基因重组质粒 ,测定、分析其核酸序列及推定的氨基酸序列 ,在 E.coli中高效表达两基因 ,为检测试剂和疫苗研究提供基础依据和抗原。方法 PCR法扩增 Hp菌株 HPSH4的 ure A、ure B基因 ,分别与 p GEX- 2 T载体连接并转化大肠杆菌JM10 5 ,测定克隆基因的核酸序列并与 Gen Bank公布的国外 5株 Hp菌株 (2 6 6 95 ,HPK 5 ,J99,CPM6 30 ,M6 0 398)的 ure A、ure B基因作序列比较 ,以 IPTG诱导 ,ure A、ure B基因在 E.coli中高效表达。结果 ure A核酸同源性 96 .3%～ 98.1% ,氨基酸同源性 98.3%～ 10 0 % ;ure B核酸同源性95 .8%～ 98.0 % ,氨基酸同源性 96 .4 %～ 99.6 %。以 IPTG诱导 ,在 E.coli中表达 rure A融合蛋白5 5 6 0 0 D,rure B融合蛋白 85 5 0 0 D。结论 不同地区 Hp菌株的 ure A、ure B存在程度不同的变异 ,克隆并表达 HPSH4的 ure A、ure B与 Gen Bank已公布的多数 Hp菌株有极高同源性 ,在 E.coli以融合蛋白高效表达 rure A和 rure
- 翁康生周名权吕小枫陆晔刘国星
- 关键词：幽门螺杆菌基因克隆E.COLI遗传学
- 重组幽门螺杆菌ureA,ureB低温表达、纯化及抗原鉴定被引量：2
- 2003年
- 目的 :建立经济有效的方法 ,从大肠杆菌表达、纯化重组幽门螺杆菌尿素酶A、B亚单位。方法 :含重组表达质粒pGEX- 2T ureA ,pGEX - 2T ureB大肠杆菌分别在不同浓度IPTG、不同温度条件下作诱导培养 ,以SDS -PAGE分析表达产物 ,采用谷胱甘肽 -Sepharose 4B亲和层析分离纯化表达产物 ,以Western -blotting和ELISA对纯化产物作抗原性分析鉴定。结果 :IPTG诱导浓度为 0 .1mmol L ;诱导温度为 2 8℃ ,含重组质粒大肠杆菌表达可溶性融合蛋白GST -ureA、GST -ureB各约占总表达产物的 78%和87%。经亲和层析 ,得纯度 90 %以上的GST -ureA约为 14mg L ,GST -ureB约为 18mg L ;融合蛋白呈ureA、ureB抗原性反应。结论 :建立了低温诱导及纯化高纯度ureA、ureB基因表达产物的方法 ,所得纯化产物具有ureA、ureB抗原活性 ,为进一步的应用研究打下基础。
- 翁康生廖萍周名权吕小枫陆晔刘国星
- 关键词：幽门螺杆菌UREAUREB纯化抗原尿素酶
- 特殊用途化妆品的功效评价被引量：12
- 2001年
- 主要综述了防晒、美白及美发三类特殊用途化妆品的功效评价方法。对防晒化妆品 ,从 UVA的防护和评价及 UVB的防护和评价作了介绍 ;对美白化妆品 ,从动物学方法、细胞学方法和酶学方法作了介绍 ;对美发化妆品 ,从发束的模拟试验和试管内试验作了介绍。指出随着特殊化妆品的生产和使用日益扩大 ,对它们的功效检测也应逐步从成品检测向原材料检测发展 ,从动物试验、人体试验向细胞试验、离体试验发展 ,以提高检测效率 。
- 陆晔周名权吕小枫翁康生刘国星
- 关键词：化妆品防晒美白美发
