刘洪波
- 作品数：56 被引量：195H指数：8
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学建筑科学更多>>
- CpG-ODN介导活化的人免疫细胞体外抗乙型肝炎病毒作用
- 2004年
- 目的:探讨CpG-ODN活化的人外周血单个核细胞(PBMC) 体外对HBV复制和表达的抑制作用. 方法:CpG-ODN体外刺激PBMC,ELISA测培养液IFN- α及IFN-γ的分泌;将CpG-ODN介导活化的PBMC与HepG2.2.15细胞按一定比例共孵育1 d、2 d和3 d后, ELISA检测培养上清液中HBsAg、HBeAg的分泌,荧光定量PCR检测HepG2.2.15细胞HBV DNA和HBV mRNA 的含量;并以MT7和酶学检测活化的PBMC对HepG2.2.15 细胞的杀伤作用. 结果:CpG-ODN有效诱导PBMC分泌IFN-α和IFN-γ; CpG-ODN本身虽不能直接抑制HBV的复制,但由CpG- ODN介导活化的PBMC却能显著减少HepG2.2.15细胞对HBsAg、HBeAg的分泌,同时对HBV DNA和HBV mRNA 的抑制作用亦明显增强;CpG-ODN介导活化的PBMC对HepG2.2.15的杀伤作用增强. 结论:CpG-ODN可通过活化机体免疫细胞,而具有明显的抗HBV复制和表达作用.
- 李宁范学工陈朝晖朱才刘洪波
- 关键词：CPG-ODN体外抗乙型肝炎病毒作用
- 丙型肝炎病毒总抗原检测对患者病程监测的价值
- 丙型肝炎是由于人感染丙型肝炎病毒(HCV)而引发的一种慢件肝脏疾病，有学者预测，在未来10～20年中，与HCV感染相关的肝病并发症将增加。据中国疾病预防控制中心资料，我国丙肝2008年1月一7月报告了12万例，约是20...
- 李洪臣刘洪波周见远周咏武欧兰香胡道奇冯惊涛李莉张纵谭德明
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- HBV X基因转化人肝细胞的实验研究被引量：2
- 2008年
- 选取已稳定转染HBV X基因的QSG7701细胞(pCMV X/QSG7701),并以稳定转染空质粒pRc/CMV2的QSG7701细胞(pRcCMV2/QSG7701)及未转染的QSG7701细胞为对照,用免疫荧光方法检测pCMV X/QSG7701细胞中HBX蛋白的分布;用RT-PCR方法和免疫细胞化学法分别检测细胞中c-Myc表达;用光镜及电镜观察细胞形态学变化,进一步研究乙肝病毒(HBV)X基因对永生化非瘤性人肝细胞QSG7701的转化作用.研究发现,乙肝病毒X(HBX)蛋白主要分布在细胞膜及细胞浆;c-Myc mRNA及c-Myc蛋白在3种细胞中均有表达,但转染了X基因的细胞中c-Myc的表达水平较其他两组明显升高(P<0.01);光镜和电镜下观察发现pCMV X/QSG细胞的胞核较大,核膜增厚,核仁肥大且增多,核/浆比例失调,可见少量多核巨细胞,pRc-CMV2/QSG7701细胞与QSG7701细胞核浆比正常,染色质分布均匀,胞核大小及形态正常.结果表明,HBVX基因成功转染了QSG7701细胞,HBV X蛋白主要分布于转染细胞的细胞膜和细胞浆中,HBX可能通过上调转染细胞中c-Myc蛋白的表达而使细胞具备恶性化生长的倾向.
- 吴传湘刘国珍李涛谭德明刘洪波
- 关键词：乙肝病毒X蛋白人肝细胞
- 高迁移率族蛋白1在子宫肌瘤中的表达及临床意义被引量：2
- 2011年
- 目的探讨高迁移率族蛋白1(High mobility group box1,HMGB1)在子宫肌瘤中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术、Western blotting法及免疫组织化学SP法检测子宫肌瘤和相应肌瘤旁组织HMGB1 mRNA及该蛋白的表达情况。结果 HMGB1 mRNA在子宫肌瘤组中表达量高于相应肌瘤旁肌层组,差异有统计学意义(2-△△Ct=12.38>2);子宫肌瘤组HMGB1蛋白水平及阳性表达率均比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),且在肌瘤组中其阳性反应主要定位在细胞核,细胞质未见或仅见轻微的阳性表达。结论 HMGB1及HMGB1 mRNA在子宫肌瘤中表达上调,该蛋白可能与子宫肌瘤的发生、发展存在密切关系;HMGB1阳性反应主要定位在细胞核,HMGB1可能通过核内作用促进子宫肌瘤细胞增殖。
- 谢日学吴佳捷周翠香刘洪波萧梅芳谢颖
- 关键词：子宫肌瘤HMGB1免疫组织化学法WESTERNBLOTTING
- 两种HCV RNA检测方法的比较研究
- :探讨分子信标探针转录介导的扩增技术(transcription mediatedamplification,TMA)与聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测丙型肝炎核糖核酸(He...
- 刘菲刘洪波侯周华郭光辉谭德明
- 关键词：基因检测扩增技术聚合酶链反应
- 慢性重型肝炎患者血清胎球蛋白A的临床意义
- 目的:探讨慢性重型肝炎患者的血清胎球蛋白A(AHSC)水平与肝损害程度、预后及炎症因子的关系。方法:设立健康对照组、慢性肝炎组和慢性重型肝炎组,慢重肝组中分设恢复组和未恢复组,检测血清AHSC、TNF-α、凝血酶原活动度...
- 张磐范学工Haichao Wang刘洪波
- 文献传递
- 流体动力学法乙型肝炎病毒感染动物模型的建立被引量：6
- 2006年
- 目的:建立一种简便、有效、稳定的乙型肝炎病毒(HBV)感染的动物模型,观察该模型动物体内不同时间点各种HBV标志物的表达情况．方法:以流体动力学法尾静脉注射BALB／c 小鼠pcDNA3．1-HBV,1 wk内检测各种HBV 标志物,时间分辨免疫荧光分析法(IFMA)检测血清中HBsAg,HBeAg,抗HBs,抗HBe,抗 HBc,荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测血清HBV DNA,免疫组织化学法检测肝组织HBsAg和 HBcAg．结果:成功建立一种急性HBV感染动物模型, 第1天血清中HBsAg表达达高峰,后逐渐降低, HBeAg表达量少,分别在第4、5、7天检测到抗HBc,抗HBe,抗HBs,d1 HBV DNA滴度亦达高峰,后渐下降,免疫组织化学示HBsAg呈胞质内弥漫性分布,HBcAg亦主要为胞质型分布．结论:以流体动力学法建立的HBV模型是一种新型有效的HBV感染动物模型,能稳定较高水平表达大部分HBV标志物．
- 应若素范学工李宁朱才刘洪波
- 关键词：流体动力学乙型肝炎病毒动物模型
- 人sTNFR1基因的克隆以及在NIH3T3细胞中的稳定表达
- 2007年
- 以Hela细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增sTNFR1全编码区基因片段,构建含有目的片段的T载体克隆及真核表达载体pcDNA3.1(-)重组质粒亚克隆,将重组质粒和脂质体共同转染NIH3T3细胞系,G418筛选稳定转染细胞株.经核苷酸序列测序和酶切鉴定,成功构建了pcDNA3.1(-)-sTNFR1真核表达质粒,脂质体法建立了高效表达sTNFR1的稳定转染细胞系,并经RT-PCR和Western Blotting鉴定.人sTNFR1基因能在NIH3T3细胞系中稳定表达,为今后的研究打下了基础.
- 彭仕芳傅蕾谭德明刘洪波
- 关键词：真核表达稳定转染
- B和C基因型HBV核心蛋白促细胞凋亡的比较被引量：1
- 2006年
- 目的:比较B,C两种基因型HBV核心蛋白在促进肝细胞凋亡方面的差异,以期初步阐述HBV基因型与临床关系的发病机制.方法:用PCR扩增4份(B和C基因型各2份)HBV-C区DNA片段,通过基因重组、分子克隆和亚克隆等方法,合成4份不同基因型和临床表型的重组真核表达质粒.鉴定后,将他们分别转染至肝癌细胞系HepG2中,采用MTT法和流式细胞仪测定转染细胞的细胞增殖率和细胞凋亡率等指标.结果:4份重组真核表达质粒均构建成功,转染至HepG2后通过内参照EGFP可鉴定出均有HBV-C蛋白表达.流式细胞仪提示C型/重型HBV转染组的细胞凋亡率显著高于B型/携带HBV转染组(8.8%±2.0%vs6.4%±0.8%,P<0.05).结论:C型HBV核心蛋白较B型HBV更能促进肝细胞凋亡,HBV基因型与临床相关性可能与此有关.
- 温志立谭德明成军杨永峰刘国珍刘洪波
- 关键词：乙肝病毒基因型核心蛋白细胞凋亡
- 可溶性GS-TrhTRAIL_(55-281)最佳表达条件及凋亡活性研究被引量：6
- 2005年
- 将本室构建的重组质粒pGEX-5X-TRAIL55-281转入大肠杆菌JM109和HB101中,鉴定后诱导表达,然后针对培养温度、培养时间及诱导剂IPTG浓度设立梯度试验,发现重组质粒pGEX-5X-TRAIL在JM109与HB101中的表达情况相近,可溶性的人GSTr-hTRAIL55-281最佳表达条件为26℃,0.06mmol/L IPTG,200r/m in.利用亲和层析法纯化出大量可溶性GSTr-hTRAIL55-281后,通过Western Blot及流式细胞仪检测发现GSTr-hTRAIL55-281有较好的免疫学活性与生物学活性.为今后TRAIL作为抗肿瘤药物的开发做必要的准备.
- 刘洪波范学工李宁黄建军朱才
- 关键词：纯化活性抗肿瘤药物
