南京农业大学园艺学院茶叶科学研究所 作品数:32 被引量:144 H指数:7 相关作者: 李彤 李辉 王永鑫 严雅君 崔新 更多>> 相关机构: 武夷学院茶与食品学院 淮阴工学院生命科学与食品工程学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省农业科技自主创新基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
茶树NAC转录因子基因CsNAC79和CsNAC9鉴定及其对非生物胁迫的响应 被引量:1 2024年 【目的】鉴定茶树NAC转录因子基因CsNAC79和CsNAC9,并分析它们在干旱、盐、高温、低温、外施ABA和外施GA3胁迫下的表达模式,为进一步解析CsNAC79和CsNAC9转录因子的生物学功能提供参考。【方法】以茶树‘龙井43’为材料,用RT-PCR扩增NAC转录因子家族基因CsNAC79和CsNAC9,并进行生物信息学分析;用qRT-PCR检测CsNAC79和CsNAC9在茶树6种非生物胁迫下的相对表达量。【结果】(1)CsNAC79和CsNAC9分别编码409个和282个氨基酸,且分别在15—150氨基酸位点、11—134氨基酸位点含有NAC家族成员典型的NAM保守结构域。(2)CsNAC79蛋白与中华猕猴桃、柿、洋蓟亲缘关系较近,CsNAC9蛋白与桃、荔枝、榴莲亲缘关系较近;2个NAC转录因子均是亲水性蛋白,皆不含信号肽和跨膜结构;CsNAC79和CsNAC9的启动子区域都含有非生物胁迫响应元件;蛋白质空间结构分析显示,CsNAC79和CsNAC9蛋白主要是由不规则卷曲和α-螺旋组成。(3)表达分析表明:CsNAC79和CsNAC9基因在6种不同非生物胁迫下均上调表达。【结论】茶树CsNAC79和CsNAC9基因响应多种非生物胁迫。 孔洁玙 杨妮 罗微 胡志航 王雅慧 庄静关键词:茶树 NAC转录因子 非生物胁迫 茶树HD-Zip转录因子基因的克隆及其对非生物胁迫的响应分析 被引量:3 2017年 茶树作为一种叶用植物,具有重要的经济价值。非生物胁迫对茶树的生长发育过程和茶叶的生产影响很大。本研究采用RT-PCR方法从茶树‘龙井43’cDNA中克隆获得1个编码HD-Zip转录因子的基因CsHB1。序列分析显示,CsHB1基因cDNA长为1 380 bp,编码459个氨基酸,含有典型的START结构域。进化分析显示,茶树CsHB1属于HD-Zip家族转录因子的IV亚族。多序列对比发现,CsHB1与其他物种的HD-Zip类蛋白的氨基酸序列具有78.05%的相似性,如葡萄、烟草、芝麻等。对CsHB1转录因子理化性质、亲/疏水性、无序化分析显示,CsHB1转录因子是疏水性蛋白且显偏碱性,不存在无序化区域。空间结构分析显示,CsHB1有3个α-螺旋,多个β-折叠,且有START结构域。利用荧光定量PCR方法分析了CsHB1在高温(38°C)、低温(4°C)、PEG干旱(200 g·L^(-1))、NaCl(200 mmol·L^(-1))处理1、4、8、12 h的表达情况。结果表明,CsHB1基因在不同非生物胁迫处理下均能诱导表达,且表达差异性明显。 滕瑞敏 李辉 王文丽 沈威 汪迎 崔新 庄静关键词:茶树 基因克隆 非生物胁迫 茶树CsRAV2转录因子基因的克隆与表达特性分析 被引量:7 2014年 RAV转录因子是AP2/ERF家族的成员之一,在植物生长发育和逆境调控中起着重要作用。本研究以安吉白茶和迎霜这两个茶树(Camellia sinensis)品种为试验材料,通过PCR和RT-PCR方法分别从两种茶树的DNA和cDNA中克隆得到CsRAV2基因。分析显示,来源于两种茶树中的CsRAV2基因全长均为1 089 bp,没有内含子,分别编码362个氨基酸,含有相对保守的AP2结合域和B3结构域,具有典型的植物RAV类转录因子特征。从氨基酸组成成分、理化性质、亲水性/疏水性、三级结构上分析显示,茶树中CsRAV2转录因子是亲水性蛋白。茶树中CsRAV2转录因子与拟南芥AtRAV具有相似的三级结构。实时定量PCR分析表明,茶树中CsRAV2基因在茶树根中表达量最高,高温、低温、NaCl处理均能诱导该基因表达,不同品种间存在差异。 吴致君 黎星辉 房婉萍 周琳 赵真 庄静关键词:茶树 转录因子 进化分析 茶树捕光色素蛋白复合体基因CsLhcb2的鉴定及低温响应分析 被引量:4 2023年 茶树是我国重要的经济作物之一,其生长和发育过程中会遭受不同逆境影响,导致茶叶产量和品质下降。捕光色素蛋白复合体(Light-harvesting chlorophyll-protein complex)主要影响植物光合效率,在植物适应环境胁迫方面也发挥着重要作用。为研究茶树捕光色素蛋白复合体的特性,从龙井43克隆获得编码捕光色素蛋白复合体基因CsLhcb2,分析该基因编码蛋白序列特征、进化树、理化性质、亚细胞定位、二级结构、三级结构及其在4℃低温处理的表达情况。结果表明,CsLhcb2开放阅读框为798 bp,共编码265个氨基酸;该基因含有典型的Chloroa-b-bind保守结构域;与15种植物的LHCB2氨基酸序列进行多重比对,氨基酸序列的相似度达91.32%。进化树分析显示,CsLHCB2与曼陀罗、东南景天、葡萄亲缘关系较近,与麻竹和毛竹亲缘关系较远。CsLHCB2分子量为28 662.77,理论等电点为5.69,属于亲水性蛋白;亚细胞定位预测结果显示CsLHCB2主要定位在叶绿体中。荧光定量结果显示,CsLhcb2可能参与茶树低温胁迫的过程。常温处理条件下,一个光周期(24 h)内CsLhcb2的相对表达量呈现先上升,后下降趋势,龙井43和舒茶早在光照处理1 h达峰值,白叶1号在光照处理6 h达峰值;4℃低温条件下,3个茶树品种中CsLhcb2的表达均在光照处理12 h达到峰值,舒茶早中CsLhcb2表达量较高,分别为龙井43和白叶1号的1.18倍和1.98倍。研究结果为进一步研究茶树捕光色素蛋白复合体在茶树低温响应中的作用提供了参考。 胡志航 秦志远 李静文 杨妮 陈益 李彤 庄静关键词:茶树 低温胁迫 茶树品种‘安吉白茶’CsDREB-A4b基因的克隆及其对非生物胁迫的响应 被引量:5 2016年 采用RT-PCR方法从茶树〔Camellia sinensis(Linn.)O.Ktze.〕品种‘安吉白茶’(‘Anjibaicha’)叶片的c DNA中克隆得到1个编码DREB转录因子的基因,命名为CsDREB-A4b。序列分析结果显示,CsDREB-A4b基因包含长度为873 bp的开放阅读框,编码290个氨基酸,具有保守的AP2结构域。与拟南芥〔Arabidopsis thaliana(Linn.)Heynh.〕AP2/ERF家族转录因子进行同源进化分析,CsDREB-A4b转录因子属于DREB亚族中的A4组。多重比对结果显示:CsDREB-A4b转录因子与蓖麻(Ricinus communis Linn.)等植物的DREB类转录因子保守结构域氨基酸序列的相似性较高。CsDREB-A4b转录因子为亲水性蛋白,理论相对分子质量为31 938.5,理论等电点为p I 5.91,总平均疏水性为-0.603,碱性、酸性、芳香族和脂肪族氨基酸的比例分别为12%、12%、7%和15%。在高温(38℃)胁迫处理前期,CsDREB-A4b基因的相对表达量显著高于胁迫处理前;在低温(4℃)胁迫处理下,CsDREB-A4b基因的相对表达量呈显著升高的趋势;在盐(200 mmol·L-1Na Cl)和干旱(200 g·L-1PEG)胁迫处理下,CsDREB-A4b基因的相对表达量呈先降低后显著升高的趋势。表明CsDREB-A4b基因参与‘安吉白茶’非生物胁迫的响应过程,且在不同胁迫条件下具有表达差异性。 李彤 严雅君 韩洪润 刘志薇 吴致君 庄静关键词:茶树 DREB转录因子 非生物胁迫 茶树中两个HSF转录因子基因分离与温度胁迫响应的比较分析 被引量:1 2015年 以茶树品种‘迎霜’为实验材料,从中分离获得2个编码HSF转录因子的基因。进化分析显示,这2个转录因子分别属于HSF转录因子家族的A5和A4亚族,分别命名为CsHsfA5和CsHsfA4。序列分析显示,CsHsfA5和CsHsfA4的开放阅读框分别为1 440和1 224 bp,分别编码479和407个氨基酸,均含有HSF转录因子保守结合域。CsHsfA5和CsHsfA4均属于亲水性蛋白,具有3个α-螺旋和4个β-折叠的三级结构。实时定量PCR表明,CsHsfA5和CsHsfA4基因在不同温度胁迫下均能在3个不同茶树品种‘迎霜’、‘安吉白茶’和‘云南十里香’中诱导表达,且表达量呈现差异。 熊洋洋 顾雅琦 刘志薇 李彤 吴致君 庄静关键词:茶树 温度胁迫 抗性诱导与茶树病虫害生态控制技术 本文综述了植物诱导抗性的研究概况,探讨了抗性诱导的作用机理、未来研究方向及应用前景,分析了诱导抗性在茶树上的研究应用。 李珍珍 李荣林 刘亦扬 黎星辉关键词:抗性诱导 茶树 文献传递 茶树MADS-box转录因子基因的克隆与非生物胁迫响应分析 被引量:5 2017年 本研究基于茶树转录组数据库,以茶树龙井43为试验材料,通过RT-PCR方法从该茶树的cDNA中克隆得到1个CsMADS1基因。序列分析表明:茶树CsMADS1基因开放阅读框长度为657 bp,编码218个氨基酸,是典型的植物MADS-box家族转录因子。序列多重比对显示,该序列与多个相关物种的MADS-box序列一致性为65.65%,含有高度保守的MADS结构域和半保守的K结构域。氨基酸理化性质、亲疏水性、亚细胞定位预测、无序化分析,以及二级和三级结构分析显示,CsMADS1转录因子是亲水性蛋白,可能定位于细胞核中,无序化程度明显,以α-螺旋结构为主,并与人MEF2蛋白具有相似的三级结构。利用实时荧光定量PCR方法分析了茶树龙井43中CsMADS1基因在非生物胁迫下的表达。结果表明,茶树中CsMADS1基因对高温、低温、干旱和高盐等不同非生物胁迫有响应,且表达存在差异。 沈威 滕瑞敏 李辉 刘志薇 王永鑫 王文丽 庄静关键词:茶树 MADS-BOX 转录因子 进化分析 非生物胁迫 茶树CsGME1基因的克隆与逆境胁迫响应分析 被引量:4 2020年 该研究基于茶树转录组和基因组信息,以茶树‘龙井43’为实验材料,从其cDNA中克隆获得茶树CsGME1基因,并对其蛋白序列特征、基因表达模式及其在不同非生物胁迫下的表达水平进行实时荧光定量分析。结果显示:(1)茶树CsGME1开放阅读框长度为1131 bp,编码376个氨基酸;该序列与多个相关物种的GME氨基酸序列一致性为94.25%,均含有NAD结合域。(2)进化树分析表明,茶树CsGME1基因与番茄SlGME1亲缘关系较近,与水稻OsGME2亲缘关系最远。(3)CsGME1蛋白属于亲水性蛋白,理论相对分子量为42046.84 Da,理论等电点为5.73,具有4个无序化区域,无序化程度较低;CsGME1蛋白二级结构由39.25%α-螺旋,13.26%延伸主链,5.84%β-转角和41.38%随机卷曲组成;三级结构分析结果显示,CsGME1包含螺旋和随机卷曲,与二级结构吻合。(4)荧光定量分析结果显示,在高温(38℃)、低温(4℃)、干旱(20%PEG)和高盐(200 mmol·L-1 NaCl)4种非生物胁迫处理下,茶树CsGME1基因均有响应,且表达存在差异,推测CsGME1参与了茶树的逆境胁迫响应过程。 杨雅焯 李辉 林士佳 刘婧愉 滕瑞敏 庄静关键词:茶树 多序列比对 进化分析 非生物胁迫 外源5-ALA对干旱胁迫下茶树叶绿素合成和荧光特性及关键酶基因表达的影响 被引量:6 2022年 为探究外源5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)在茶树幼苗响应干旱胁迫时对茶树叶绿素合成和荧光特性的调控机理,以舒茶早为试验材料,PEG-6000模拟干旱胁迫环境,喷施5-ALA进行处理,检测茶树幼苗叶片的叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量,进一步测定叶片叶绿素荧光参数及关键酶基因的表达。结果显示,外源5-ALA显著提高干旱胁迫下茶树叶片叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素的含量,缓解了最大荧光(Fm)、PSⅡ实际光化学效率[Y(Ⅱ)]、PSⅡ最大光化学量子产量(Fv/Fm)、光化学猝灭系数(qP)、PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)、PSⅡ反应中心光合电子传递效率(Electron transfer rate,ETR)的下降,同时导致初始荧光(Fo)、非光化学猝灭系数(qN)升高。外源5-ALA能诱导干旱胁迫下茶树编码叶绿素合成(CsHEMA1、CsHEME1、CsLIN2)以及碳同化(CsSBPase、CsTK)相关酶基因的上调表达。研究表明,叶面喷施外源5-ALA能有效缓解干旱胁迫对茶树叶片叶绿素的降解及对PSⅡ反应中心的损伤,维持茶树叶片较高的光合活性,提高其光保护能力。 杨妮 李逸民 李静文 滕瑞敏 陈益 王雅慧 庄静关键词:茶树 5-氨基乙酰丙酸 干旱胁迫 基因表达