复旦大学医学院卫生部医学分子病毒学重点实验室
- 作品数：6 被引量：38H指数：4
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- 慢性乙型肝炎患者外周血中HBV特异性CD3^+T细胞的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 研究慢性乙型肝炎患者外周血中可作用于病毒感染靶细胞的特异性CD3+ T细胞比率。方法 筛选HLA A2 患者 :将MHC :Ig双体融合蛋白试剂 ,加入HBV核心蛋白 (C)、聚合酶蛋白 (P)及表面抗原蛋白 (S)中HLA A2 限制性合成肽 ,与患者CD3+ 细胞作用 ,采用双重荧光抗体染色 ,用FACS检测各患者的特异性T细胞比率 ,同时设立各种对照管。结果 2 3/ 5 4例 (42 .6 % )患者为HLA A2 。其中 15例经用HBVC、P、S肽染色后 ,5例患者的特异性CD3+ 阳性细胞比率高于对照管 ,4例患者有结合S肽的特异性CD3+ 细胞 ,其中 1例同时可结合P肽 ,1例仅与P肽结合。结论 慢性乙型肝炎患者外周血中与特异性肽结合的CD3+ T细胞比率较少。MHC :Ig双体融合蛋白技术使用方便 ,但非特异性染色率偏高。
- 张继明姚忻孙淑惠何丽芳翁心华闻玉梅
- 关键词：慢性乙型肝炎外周血
- 乙型肝炎病毒变异株功能基因组研究及其临床意义被引量：4
- 2001年
- 综述了近年对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）变异株的复制、免疫学特性、致病性、耐药性等功能基因 组研究及其临床意义的研究进展，阐述基因组水平研究ＨＢＶ变异株功能的重要性及有关结果，展望今 后ＨＢＶ变异株生物学特性研究的方向。
- 武力闻玉梅
- 关键词：乙型肝炎病毒基因变异抗原性免疫原性
- 乙型肝炎病毒变异株生物学特性及其临床意义被引量：16
- 2000年
- 武力闻玉梅
- 关键词：乙型肝炎生物学特性
- 肝癌患者肝组织中2.2kb乙型肝炎病毒基因组剪接变异体结构及功能的研究被引量：8
- 2002年
- 目的 研究肝癌患者肝组织中 2 2kb乙型肝炎病毒基因组剪接变异体的结构和功能。方法 PCR扩增 12对肝癌组织及癌旁肝组织中的乙型肝炎病毒 (HepatitisBvirus,HBV)全基因组。克隆 3 2kb全长HBV基因组及 2 2kb剪接变异体基因组 ,测序并比较它们基因结构的差异。将 2 2kbHBV剪接体基因组与全长基因组共同转染HepG2 细胞 ,分别以HBV全长基因组特异性引物及剪接变异体特异性引物对转染后细胞内HBV核心颗粒进行PCR检测 ,以判定 2 2kbHBV剪接变异体对全长HBV复制功能的影响。结果 2 2kbHBV基因组剪接变异体见于所有的癌组织及癌旁组织。相同模板量获得的扩增产物进行图象扫描分析 ,发现癌组织中 2 2kbHBV基因组剪接变异体与全长HBV的比值高于癌旁组织。序列分析表明 ,2 2kbHBV剪接变异体保留 5′端包装信号以及与完整的X基因、C及preC基因。细胞转染结果显示 ,加入 2 2kb剪接变异体共转染 ,细胞中 3 2kb全长HBV基因组的复制量可增强 3～ 7倍。结论 肝组织内普遍存在 2 2kbHBV基因组剪接变异体 ,该变异体在癌组织中的相对量高于癌旁组织。 2 2kbHBV基因组剪接变异体可使全长HBV基因组复制增强 ,提示可能与肝癌的发生。
- 林旭闻玉梅万大方钱耕荪顾健人
- 关键词：乙型肝炎病毒RNA剪接聚合酶链反应肝癌
- 体内与转染细胞中乙型肝炎病毒株复制特性的相关性被引量：8
- 2001年
- 目的 比较不同乙型肝炎病毒 (HBV)株在体内及转染细胞中复制特性是否相符。方法 以核酸杂交定量和聚合酶链反应 酶联免疫吸附试验 (PCR ELISA)测定 5例孕妇血清中HBVDNA含量 ,并测定乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)和乙型肝炎e抗原 (HBeAg)含量。分别克隆血清中的HBV基因组转染细胞 ,检测培养上清液中HBsAg和HBeAg表达水平 ,并以Southern印迹及核酸杂交检测转染细胞内、外HBVDNA复制水平。结果 转染细胞内、外HBVDNA复制水平与相应血清HBVDNA量呈正相关趋势。转染细胞表达的病毒抗原水平与相应血清中病毒抗原含量也呈正相关趋势。结论 感染者血清中HBVDNA和病毒抗原的含量与毒株在细胞中复制和抗原表达水平有相符趋势。HBV不同毒株在转染细胞中的复制可基本反映体内毒株的复制特性。
- 武力何丽芳蒋伟伦邱申熊闻玉梅
- 关键词：乙型肝炎E抗原病毒复制
- 重组乙肝病毒核心基因DNA与表面抗原-抗体共免疫应答研究被引量：1
- 2002年
- 目的:了解小鼠对乙肝病毒核心抗原(HBcAg)基因免疫及与乙肝表面抗原-抗体复合物(HBsAg-抗HBs)联合免疫的应答。方法:用表达乙肝病毒核心抗原N端144个氨基酸的重组质粒DNA(简称pHBc144)100μg及含1μgHBsAg的重组乙肝表面抗原-鼠抗体组建的复合物(简称sIC)免疫Balb/c小鼠。用ELISA法检测血清抗体IgG和IgG1、IgG2a亚类的效价。用半定量PCR法分别检测鼠脾细胞IFN-γ及IL-4的mRNA。结果:pHBc144及sIC联合免疫鼠的抗HBs IgG、IgG1、IgG2a效价均显著高于sIC组(P＜0．05)。同时小鼠还可产生抗HBc及由HBsAg、HBcAg特异诱生的IFN-γ及IL-4。但与sIC共免疫,小鼠对HBcAg诱生的IFN-γ mRNA有所降低。结论:可用HBcAg基因与sIC共免疫,以获得针对乙肝病毒2种结构蛋白的免疫应答。
- 张悦庆王文逸应哲康陈敏捷瞿涤闻玉梅
- 关键词：乙肝病毒核心抗原基因免疫DNA免疫反应
