西南大学农学与生物科技学院重庆市油菜工程技术研究中心
- 作品数:70 被引量:280H指数:8
- 相关作者:马珍珍杨续蕊孟繁敏崔艺馨王玉明更多>>
- 相关机构:长江大学生命科学学院华中农业大学植物科学技术学院作物遗传改良国家重点实验室华中农业大学植物科学技术学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学文化科学经济管理更多>>
- 芸薹属原花青素跨膜转运蛋白TT12、AHA10基因家族RNA干扰载体的构建
- 2010年
- 拟南芥TT12和AHA10基因分别编码MATE类型和H+泵类型的跨膜转运蛋白,介导原花青素单体向液泡的转运,对种皮色素的积累起重要作用。甘蓝型油菜是重要的油料作物,但缺乏黄籽基因型,现有黄籽材料表型不稳定,黄籽性状的分子机理不清,缺乏相关的分子育种。克隆了芸薹属TT12和AHA10基因家族的RNA干扰载体片段BTT12I和BA-HA10I,以基于pFGC5941而改造的植物RNA干扰基础载体pFGC5941M为骨架,构建了相应的RNAi载体pFGC5941M-BTT12I(简称pBTT12I)和pFGC5941M-BAHA10I(简称pBAHA10I),通过分子鉴定后转化农杆菌,获得工程菌株,有利于通过基因沉默技术研究TT12和AHA10基因在芸薹属种皮色素跨膜转运中的作用和机理,探索黄籽性状的分子育种。
- 冯瑜马丽娟闫楠何芳莹柴友荣
- 关键词:芸薹属黄籽RNAI载体
- PEG胁迫下42个油菜品种(系)耐旱性的评价被引量:26
- 2009年
- 采用不同浓度PEG处理模拟干旱条件,研究42个不同遗传背景的油菜品种(系)在种子萌发期对干旱胁迫的表现,筛选耐旱性好的油菜种质资源.结果表明:不同油菜品种(系)对干旱胁迫的反应差异较大,根长、芽长、发芽指数均随着PEG浓度的提高而极显著降低.发芽率在10%PEG处理时略高于对照,15%PEG处理时显著低于对照.42个供试油菜品种(系)中,耐旱性较好的占23.8%;比较耐旱的占61.9%;耐旱性较差的占14.3%.其中88009的耐旱性最强,黔油4号的耐旱性最弱.在2种浓度PEG处理下,根长和发芽指数与隶属值间的秩相关系数分别达显著水平和极显著水平.根长和发芽指数可作为油菜种子萌发期耐旱性的评价指标.
- 郭雪松唐章林
- 关键词:油菜耐旱性种子萌发期PEG
- 甘蓝型油菜全基因组cDNA FOX-hunting过表达文库构建被引量:1
- 2021年
- 为系统解析甘蓝型油菜基因功能,结合FOX-hunting和Gateway重组技术,以4种激素和4种非生物胁迫处理的甘蓝型油菜幼苗根和叶片及成熟期种子和角果全长cDNA为混样,构建了全长cDNA FOX-hunting过表达文库。经检测,初级文库滴度为3.0×10^(6),库容为1.2×10^(7)CFU;次级FOX-hunting过表达文库滴度为2.6×10^(6),库容为1.04×10^(7)CFU。次级文库菌液PCR鉴定表明,阳性克隆率为96%,扩增均为250~3000 bp随机分布的单一条带,表明初级文库已较好地重组到pJVC55载体上。农杆菌转化后的克隆测序发现,140个克隆中有12个克隆为非特异扩增。GO富集分析发现剩余128个基因中,除21个基因功能富集于光合作用途径外,其余基因在转录因子和激酶中随机分布,且功能涉及器官发育、物质代谢和胁迫响应等多个方面。上述结果表明,本研究构建的甘蓝型油菜FOX-hunting过表达文库无功能偏向性、多态性丰富、完整性高,可作为油菜功能基因组的研究基础。
- 张凯魏丝雨常玮范永海卢坤
- 关键词:甘蓝型油菜全长CDNA过表达
- 甘蓝型油菜遗传图谱构建及苗期耐旱相关性状的QTL定位被引量:8
- 2014年
- 以耐旱性差异较大的甘蓝型油菜三六矮和科里纳-2构建的重组自交系群体F2∶4家系为作图群体,通过SSR标记构建了包含15个连锁群的遗传连锁图谱,图谱总长762.95cM,相邻标记平均距离6.25cM.采用复合区间作图方法,在正常灌溉和干旱胁迫处理两种环境条件下,对苗期叶绿素质量分数、叶片相对含水量、叶片保水力、可溶性糖质量分数、丙二醛质量分数5个耐旱相关性状及其耐旱系数进行了QTL分析,共检测到8个QTL,分布在第1,3,5,12连锁群,单位点解释表型变异的6.6%-12.4%.在第5连锁群检测到叶绿素质量分数和叶片保水力的QTL重叠区域.
- 王丹丹唐章林荆蓉蓉文均马宇嘶
- 关键词:甘蓝型油菜QTL定位
- 芸薹属ANR(BAN)基因家族RNA干扰载体的构建被引量:4
- 2010年
- 花青素还原酶(ANR)是原花青素生物合成的关键酶,对种皮色素的积累起重要作用。黄子是油菜的重要优质性状,但甘蓝型油菜中其基因型缺乏,表型不稳定,分子机理不清。该实验克隆了芸薹属ANR基因家族的RNA干扰片段BANRI,将其反义片段、正义片段采用NcoI+AatII、BamHI+XbaI分别插入到改进型植物RNA干扰基础载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成重组载体pFGC5941M-BANRI(简称为pBANRI),复合PCR鉴定表明载体构建成功,并转化根癌农杆菌菌株LBA4404,获得工程菌株。pBANRI的构建有助于揭示芸薹属物种种皮色素合成的机理,探索对油菜等植物种皮色素进行分子育种的可能性。
- 孟繁敏陈艳冯瑜柴友荣
- 关键词:芸薹属原花青素RNAI
- 甘蓝型油菜COI1的调控功能分析被引量:7
- 2015年
- 【目的】研究甘蓝型油菜中茉莉素受体复合体核心成员CORONATINE INSENSITIVE 1(COI1)蛋白的基因表达特性及生理调控功能。【方法】利用基因组数据分析甘蓝型油菜及其亲本种白菜和甘蓝基因组的COI1构成情况;使用定量和半定量RT-PCR扩增方法检测油菜COI1的组织特异性表达;克隆油菜COI1保守区片段,构建病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)载体,以农杆菌侵染方法培育VIGS诱导COI1沉默的油菜植株,然后,用鉴定出的COI1沉默植株研究油菜COI1在育性调控及虫害抗性等方面的调控功能。【结果】基因组数据分析表明,甘蓝型油菜亲本种白菜和甘蓝共有7个高度同源的COI1,依序列同源性可分为4类:COI1a、COI1b.1、COI1b.2和COI1c;甘蓝型油菜有8个COI1,也由上述几类同源基因组成。半定量和定量RT-PCR扩增试验表明甘蓝型油菜COI1在茎中的表达水平最低。从培育的VIGS诱导COI1沉默油菜中,共鉴定出COI1表达水平被抑制超过70%的株系25个,其中抑制效果最明显的10个株系被用于育性调控及蚜虫抗性试验。育性分析结果证明,VIGS沉默COI1油菜的结实能力受到严重影响,其角果在授粉20 d以后的长度只达到对照油菜角果授粉5 d后的长度,且角果中无正常种子;沉默COI1油菜的雄蕊长度短于相同花期的对照油菜雄蕊,其花药开裂延迟;显微观察发现,沉默COI1油菜的花粉中有超过80%呈不正常形态。在相同处理条件下进行的蚜虫抗性比较试验中,沉默COI1油菜叶片上的蚜虫数量超过对照油菜1倍多,而且有很多小蚜虫围绕大蚜虫的虫落,繁殖态势比对照油菜叶片上的蚜虫旺盛。【结论】甘蓝型油菜COI1具有组织特异表达特性,沉默COI1会导致油菜雄性不育性状发生,并降低油菜植株对蚜虫的抗性。
- 王文静杨小川丁永强尹国英马浩然张洁石小于张鼎宇李加纳张洪博
- 关键词:甘蓝型油菜COI1茉莉素雄性不育
- 芸薹属物种(B.napus,B.oleracea,B.rapa)MAPK1家族的克隆、进化和表达特征被引量:8
- 2013年
- 【目的】克隆甘蓝型油菜、甘蓝和白菜MAPK1家族,分析3个物种MAPK1转录表达器官特异性。【方法】在电子克隆的基础上,利用RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术获得3个物种MAPK1全长cDNA序列和gDNA序列。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析3个物种MAPK1家族的器官特异性表达特征。【结果】从甘蓝型油菜、甘蓝和白菜中克隆了MAPK1家族共4个成员基因BnMAPK1-1、BnMAPK1-2、BoMAPK1和BrMAPK1,它们的gDNA长度为2 512—2 525 bp,均有3个外显子和2个内含子,最长标准mRNA为1 599—1 620 bp,ORF均为1 100 bp。系统进化分析表明,甘蓝型油菜MAPK1家族来自于甘蓝和白菜MAPK1之和,其中,BnMAPK1-1对应于BoMAPK1,BnMAPK1-2则对应于BrMAPK1。qRT-PCR结果显示3个物种MAPK1在所有检测器官中均有表达,但器官特异性在种间差异显著,暗示快速进化。【结论】克隆了甘蓝型油菜、甘蓝和白菜MAPK1的全长cDNA序列和gDNA序列,支持甘蓝和白菜通过天然种间杂交形成异源四倍体物种甘蓝型油菜的假说,芸薹属MAPK1基因和蛋白在序列和结构上非常保守,但转录表达的器官特异性上进化极快,近缘种间差异显著。
- 陆俊杏卢坤朱斌彭茜陆奇丰曲存民殷家明李加纳梁颖柴友荣
- 关键词:克隆进化
- 甘蓝型油菜TT3基因家族的分子克隆
- TT3基因编码二氢黄酮醇4-还原酶,该酶是类黄酮合成途径中的一个关键酶。当拟南芥中的单拷贝TT3基因被人工采用X-射线照射而失活后,变异植株由于种皮原花色素的合成受堵而表现出黄籽性状。我们利用同源克隆策略从油菜中克隆了六...
- 雷波李运涛马丽鹃柴友荣李加纳
- 文献传递
- 甘蓝型油菜MAPK1在损伤和病原菌胁迫下的表达模式分析
- Objective The objective is to analyze tissue specific expression of BnMAPKlgenes,and explore their characteris...
- 陆俊杏李威柴友荣梁颖
- 关键词:GENEWOUNDFUNGISIGNALINGPATHWAY
- 国审杂交油菜新品种——渝油21
- 2010年
- 该品种已通过国家农作物品种审定委员会审定.为甘蓝型半冬性细胞质雄性不育三系杂交种。全生育期221天左右。幼苗半直立,叶片较大,叶色较深绿.裂叶1—2对,叶缘浅锯齿,无缺刻,蜡粉较厚,叶片无刺毛。花黄色,花瓣大而侧叠。
- 谌利王瑞
- 关键词:杂交油菜细胞质雄性不育三系杂交种半冬性甘蓝型