华东师范大学生命科学学院生物医学系
- 作品数：17 被引量：61H指数：4
- 相关机构：复旦大学附属华山医院复旦大学医学院浙江大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目湖南省教育厅科研基金上海市科委纳米专项基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 烟碱对胶原诱导小鼠关节炎的作用
- 2011年
- 为观察烟碱对胶原诱导关节炎模型小鼠的作用,并初步探讨其免疫学和分子机制,建立胶原诱导关节炎模型,以PBS溶液喂饲模型小鼠为对照,采用半定量评分系统和病理切片评价关节炎模型小鼠对照组和烟碱实验组的病情进展。并采用流式细胞术分别测定对照组和烟碱实验组小鼠脾脏CD4+细胞表型;RT-PCR方法检测对照组和烟碱实验组脾细胞Th1/Th17相关细胞因子IFN-γ、IL-17A、IL-21、IL-22,以及促炎症因子IL-6,抑炎症因子IL-10 mRNA的表达变化。流式CBA法检测模型小鼠血浆TNF-α含量。结果,采用烟碱喂饲关节炎模型小鼠能够有效减缓关节炎病症进展,减轻模型小鼠关节炎症状。病理切片显示对照组小鼠患处充血、水肿及中等量炎症细胞浸润;而相应烟碱实验组小鼠病理症状较轻。相比对照组,烟碱实验组Th17细胞比例明显降低(7.63%vs 12.53%);且烟碱实验组IL-17A、IFN-γmRNA比值低于对照组,具有显著性差异,P<0.05。烟碱干预能有效降低实验小鼠IL-6、IL-21 mRNA含量,P<0.05。另外,烟碱实验组小鼠血浆TNF-α含量明显低于对照组(10.82±2.22)pg/ml和(30.14±4.12)pg/ml,两者具有显著性差异,P<0.01。提示,烟碱干预能够有效减缓关节炎小鼠病症进展,减轻小鼠关节炎症状;这一效应是通过降低Th17细胞比例、降低炎症因子IL-17A/IFN-γ比例,减少IL-6、IL-21、TNF-α等多因素共同参与的过程。
- 杨懿铭李春燕杨洁任亚娜谢如锋范华骅
- 关键词：胶原诱导关节炎TH17
- 原花青素对脱细胞瓣膜的交联与钙化抑制
- 1.引言心脏瓣膜病是危及人类健康与生命的一种严重疾病,目前主要采用人工心脏瓣膜置换手术进行治疗。而临床上所用的戊二醛交联制备的生物瓣膜有一定毒性,寿命短,易钙化,急需一种理想的人工生物瓣膜,因而,理想的交联剂必须毒性低,...
- 翟万银吕昔琴周艳铃张红峰常江
- 关键词：原花青素
- 文献传递
- 五味子乙素对转染多药耐药1基因的MCF-7细胞的多药耐药逆转作用被引量：30
- 2005年
- 目的探讨五味子乙素(SchB)对转染多药耐药1基因(MDR1)的人乳腺癌细胞MCF7的多药耐药逆转作用及相关机制。方法将人MDR1基因导入MCF7细胞,形成耐药细胞株MCF7/MDR1;用该细胞株为模型评价SchB的体外逆转多药耐药作用,用MTT法进行化疗药物单独或与SchB联合作用时对耐药细胞的IC50比较,计算逆转倍数。结果转染细胞MCF7/MDR表现为P糖蛋白高表达,对阿霉素、长春新碱、紫杉醇、高三尖杉酯的抗药性均增加;SchB(25μmol/L)显著减少阿霉素、长春新碱、紫杉醇和高三尖杉酯对MCF7/MDR细胞的IC50,逆转倍数达6.03～23.94倍;SchB(25μmol/L)使MCF7/MDR细胞对若丹明123的胞内积聚增加约5倍,效果与维拉帕米10μmol/L浓度时相当;但SchB(25μmol/L)不影响MCF7/MDR细胞的P糖蛋白表达。结论SchB能有效逆转转染MDR1的MCF7细胞的多药耐药,其机制可能是抑制了P糖蛋白的药物外排生物学活性。
- 李凌王弢许志良俞颖陈卫陈菲
- 关键词：五味子乙素MCF-7细胞多药耐药逆转作用中药
- S1P/S1PR信号通路对中性粒细胞功能的影响
- 2012年
- 本研究旨在检测1-磷酸鞘氨醇(S1P)对fMLP活化的中性粒细胞的引发作用,检测粒细胞活化后发生呼吸爆发的产物,并探究S1P引发作用的信号通路。流式细胞术检测新鲜分离的中性粒细胞的状态;高铁细胞色素C还原法间接计算超氧阴离子(O2-)释放量;二氢罗丹明123流式细胞术检测粒细胞的呼吸爆发程度;免疫印迹法检测PI3K-Akt信号通路相关蛋白的表达。结果表明,S1P预处理后fMLP活化的粒细胞所释放的O2-量明显增高;S1P引发的fMLP活化组中,罗丹明123的平均荧光强度明显高于fMLP单独处理组;PI3K及Akt蛋白参与了粒细胞呼吸爆发的信号传递。结论:S1P是一种新的粒细胞引发试剂,较高浓度S1P(10-6μmol/L)能够引发fMLP活化的中性粒细胞发生呼吸爆发;该信号通路可能为S1P与粒细胞上的S1P受体作用,活化下游的PI3K,再通过Akt传递信号,最终活化NADPH氧化酶,发生呼吸爆发。
- 王中英谢如锋杨洁任亚娜杨懿铭范华骅
- 关键词：中性粒细胞1-磷酸鞘氨醇超氧阴离子
- 雷帕霉素对人CD4^+CD25^+调节性T细胞体外扩增的影响被引量：2
- 2012年
- 探讨有效的体外扩增人CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)的方法以及雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对人CD4^+CD25^+Treg细胞体外扩增的影响。采用免疫磁珠分离人外周血的CD4^+CD25^+Treg,并将实验分为3组:第1组在CD4^+CD25^+Treg培养体系中加入200 U/ml IL-2和包被CD3/CD28单克隆抗体的磁珠;第2组培养体系中除加入100 nmol/LRAPA以外,其余与第1组相同;第3组是CD4^+CD25^+Treg培养第12天后,将细胞进一步分选获取CD4^+CD25^+CD127^- Treg再继续培养,培养体系与第2组相同。实验结果显示,加RAPA培养的CD4^+CD25^+Treg细胞扩增效率比不加RAPA的低,但细胞的纯度明显提高(92%vs 65%)。而加RAPA培养的第2、3组CD4^+CD25^+Treg细胞在纯度上没有明显的差异。加RAPA培养的CD4^+CD25^+Treg细胞扩增后保持其无能状态。体外抑制实验显示体外扩增的CD4^+CD25^+Treg细胞对CD4^+效应T细胞增殖均有明显的抑制作用,而且加RAPA扩增的Treg细胞表现出更强的抑制功能。另外,与第1组体外扩增的Treg细胞相比,加RAPA扩增的Treg细胞表达低水平的IL-2和IFN-γ。实验证明雷帕霉素抑制了CD4^+ CD25^+Treg细胞中混杂的CD4^+效应T细胞的扩增,使用雷帕霉素可以提高体外扩增CD4^+CD25^+Treg细胞的纯度及其免疫抑制功能。
- 郝俊曹国番杨洁杨懿铭李振华杨燕范华骅
- 关键词：体外扩增雷帕霉素
- 干细胞在听觉损伤治疗中的运用前景(英文)
- 2006年
- 目的:总结近年来国内外有关干细胞在修复毛细胞丢失和损伤的研究近况,探讨干细胞替代疗法在听觉损伤方面的研究进展。资料来源:应用计算机检索Elsevier数据库1990-01/2005-05相关听觉损伤及干细胞修复的文献,检索词“stemcellsandhearingcellregeneration”。资料选择:对搜集的文献进行筛选。纳入标准:①毛细胞损伤与丢失。②听觉损伤与修复。③干细胞替代疗法治疗听觉损伤。排除标准:①干细胞的致瘤性。②综述文献、重复研究。资料提炼:共收集54篇关于听觉损伤修复文献,纳入17篇符合标准的文献,9篇文献对干细胞运用进行分析评价。资料综合:内耳细胞尤其是毛细胞及相关的神经元损伤丢失可导致听觉损伤和平衡觉失调。由于哺乳动物前庭和耳蜗毛细胞的再生修复能力非常有限,因此通常认为毛细胞的损伤丢失是导致感音神经性聋的主要成因,并且靠自身是无法再生与修复。细胞替代疗法在治疗耳聋性疾病方面具有广阔的运用前景,是近年来听觉研究领域十分关注的热点。移植治疗耳聋的最佳方法是利用耳源性干细胞。最近,研究者分别从刚出生大鼠的柯蒂氏器和成年小鼠的前庭椭圆囊分离出胚胎样多分化潜能的干细胞,内耳干细胞将是重塑毛细胞再生和恢复听觉功能的重要细胞源。结论:干细胞在治疗毛细胞丢失引发的听觉损伤方面具有重要价值,随着研究的深入细胞替代疗法必然呈现诱人的前景。
- 娄向新袁崇刚
- 关键词：干细胞听觉细胞分化
- 和厚朴酚抗血管生成作用的实验研究被引量：13
- 2007年
- 目的:本研究通过检测和厚朴酚在体内对鸡胚尿囊膜(chicken chorilallantoic membranes,CAM)血管生成的抑制作用及体外对肿瘤血管生成的影响,探讨和厚朴酚的抗血管生成作用及其初步机制。方法:(1)用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测和厚朴酚对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)、人成纤维细胞及人结肠癌RKO细胞增殖的抑制作用;(2)采用鸡胚绒毛尿囊膜模型,观测和厚朴酚对CAM新生血管生成的抑制作用;(3)逆转录聚合酶链反应(RT-RCR)方法检测和厚朴酚对RKO细胞血管内皮生长因子A(VEGF-A) mRNA表达及细胞培养上清液VEGF蛋白分泌的影响。结果:和厚朴酚对血管内皮细胞具有优先抑制作用,对HUVEC的半数抑制剂量(inhibitory concentration 50%,IC50)为14.5μmol/L,而对原代培养的人成纤维细胞的IC50高达150μmol/L,对人结肠癌RKO细胞的IC50为42μmol/L;和厚朴酚0.1μg/只和0.2μg/只剂量时显著抑制CAM新生血管形成,抑制率分别为58%和86%;和厚朴酚在10μmol/L和20μmol/L剂量时显著抑制RKO细胞的VEGF-A mRNA表达及细胞培养上清液中VEGF蛋白的分泌,具有显著性差异。结论:和厚朴酚在非凋亡剂量时具有抗血管形成作用,其机制与抑制血管内皮细胞增殖以及抑制肿瘤细胞表达VEGF有关。
- 王嘉王弢王自强陈菲覃文新
- 关键词：和厚朴酚血管生成抑制剂血管内皮生长因子类绒毛尿囊膜
- 库存血小板血浆中sCD40L含量变化及其对PMNs呼吸爆发的作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨单采血小板(A-PLTs)和白膜法浓缩血小板(BC-PLTs)库存过程中,其乏血小板血浆(简称血浆)中可溶性CD40配体(sCD40L)含量变化及对中性粒细胞(PMNs)呼吸爆发的作用。方法取库存d1、d3、d5的A-PLTs和BC-PLTs,离心分离获得血浆;ELISA检测血浆中sCD40L的含量;用活性氧特异性荧光探针二氢若丹明123(DHR),流式细胞术检测PMNs呼吸爆发;以小鼠抗人CD154抗体抑制试验去除sCD40L。结果 sCD40L含量(pg/mL),在血小板库存d1、d3、d5时,A-PLTs血浆分别为1 341.62±279.92、2 589.69±856.83及3 250±1 170.44(P<0.05);BC-PLTs血浆分别为3 342.35±1 322.30、3 827.12±1 714.43及3 691.87±1 631.03(P>0.05)。血浆引发fMLP(formyl-Met-Leu-Phe)活化的PMNs呼吸爆发程度(PMNs的引发活性),库存d1、d5 A-PLTs血浆处理组相对于单独加入fMLP阴性对照组其MFI比值相应为1.25±0.1、1.76±0.41(P<0.05)。用小鼠抗人CD154抗体特异性去除血浆中的sCD40L后血浆引发fMLP活化的PMNs呼吸爆发程度相应降低41.84%。以0.1μm滤器滤除血小板微粒后血浆引发fMLP活化的PMNs呼吸爆发程度相应降低69.56%。结论常规库存的血小板随库存时间延长,其血浆中的sCD40L水平升高,并对fMLP活化的PMNs的呼吸爆发具有引发作用。
- 李玮谢如锋任亚娜杨懿铭钱开诚范华骅
- 关键词：血小板SCD40L中性粒细胞
- 不同树突状细胞对CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞体外扩增的影响被引量：1
- 2009年
- 目的利用不同种类树突状细胞(dendritic cells,DC)体外扩增获得表型和功能稳定的CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)。方法免疫磁珠法(MACS)分离Balb/c小鼠CD4+CD25+调节性T细胞,利用与调节性T细胞同基因或异基因成熟DC、未成熟DC和调节性DC刺激其扩增,流式细胞术测定其纯度和表型。以CD4+CD25-T细胞作为反应细胞,验证扩增前后Treg细胞的免疫抑制功能。结果MACS分离的CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(95.38±1.82)%,同基因和异基因DC都能有效刺激Treg细胞体外扩增,其中同基因成熟DC扩增效果最为明显。而且同基因成熟DC扩增后CD4+CD25+调节性T细胞纯度达到(94.16±1.88)%,而且高表达Foxp3分子。当CD4+CD25+调节性T细胞与效应T细胞比例为1∶1时,能够有效的抑制效应T细胞的增殖,而且,同基因成熟DC扩增的CD4+CD25+调节性T细胞的抑制效果比新分离的Treg效果更好。结论同基因成熟DC能够体外扩增表型和功能稳定的Treg细胞。
- 丰涛杨洁谢如锋刘嬿任亚娜范华骅
- 关键词：CD25^+树突状细胞体外扩增
- 蛇足石杉生物碱的提取与测定被引量：5
- 2007年
- 研究蛇足石杉生物碱的提取工艺.整个工艺是:用酸浸提、微波加热、蒸馏、萃取、反萃取、脱色等分离技术从蛇足石杉中提取石杉碱,最后定性定量检测.结果表明:(1)微波加热处理可提高石杉碱的提取率;(2)萃取和反萃取相结合,使用旋转蒸发仪蒸馏有助于分离石杉碱;(3)用碘化铋钾试液对提取的生物碱进行饱和滴定,然后烘干称量,再根据化学反应式来计算生物碱含量,是一种较好的近似测定方法;(4)根据标准样品的直线回归方程,利用紫外分析仪测定石杉碱甲含量是一种经济高效的方法;(5)洪江市塘湾镇的蛇足石杉的石杉碱甲的含量为0.085‰,粗提物中石杉碱甲的百分含量为26.1%.
- 曾汉元印彪连琰
- 关键词：石杉碱甲纯化
