广西大学生命科学与技术学院发酵与酶工程研究所
- 作品数:17 被引量:28H指数:4
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- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 工业微生物菌种改良新技术——代谢工程、逆代谢工程和基因组改组技术
- 一、代谢工程代谢工程是一个崭新的科学领域,它综合了分子生物学、微生物学、分子反应动力学、生化工程等领域的最新成果,是目前国内外研究的热点。代谢工程被视为继蛋白质多肽单基因表达的第一代基因工程、基因定向突变的第二代基因工程...
- 庞宗文黄日波
- 文献传递
- 酿酒酵母gpd1和hor2基因在大肠杆菌中的共表达被引量:6
- 2005年
- 利用途径工程的方法,在大肠杆菌中构建一条新的产甘油的代谢途径。从酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)克隆3_磷酸甘油脱氢酶基因(gpd1)和3_磷酸甘油酯酶基因(hor2 ) ,并将两个基因串连到启动子trc的下游,构建由trc启动子控制的能高效表达的多顺反子重组质粒pSE_gpd1_hor2 ,将重组质粒导入大肠杆菌BL2 1菌株中,构建得到的重组菌株GxB_gh能将葡萄糖转化为甘油。结果表明重组菌株GxB_gh以葡萄糖为底物进行发酵,甘油产量为4 6 6 7g L ,葡萄糖的转化率为4 2 87%。这为利用工程菌绿色生产甘油进行了前期的探索,也为进一步构建能生产1,3_丙二醇的工程菌打下了良好的基础。
- 杜丽琴韦宇拓陈发忠罗兆飞黄日波
- 重组大肠杆菌的高密度发酵和甘油生产条件的初步研究被引量:4
- 2006年
- 在摇瓶中进行重组大肠杆菌菌株BL21高密度发酵条件的研究,考察了葡萄糖浓度、盐离子浓度、温度、接种量、发酵时间等对该菌株生产甘油的影响。初步确定底物浓度为2.5%,盐离子浓度0.2%,温度为37℃,接种量为2%,经24h的摇瓶发酵,甘油产量最高达6.8g/L。在30L发酵罐实验中、按初步确定的优化条件发酵26h,甘油产量可达46.67g/L,是LB/葡萄糖培养基中甘油产量的2.06倍。
- 杜丽琴韦宇拓陈发忠黄日波
- 关键词:重组大肠杆菌甘油发酵条件
- 一株嗜热菌的分离和鉴定
- 一、研究意义和目的嗜热菌(Tnermophihc bacteria)一般指在55℃以上能生长的微生物,它们大多生活在深海、火山口、温泉、堆肥等处。嗜热菌的研究热潮始于上世纪六七十年代。1969年T.D.Brock及其同事...
- 王慧荣
- 关键词:嗜热菌嗜热酶
- 文献传递
- 乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量:11
- 2006年
- 与其它微生物相比,用大肠杆菌进行发酵生产乳酸有许多优势,但大肠杆菌没有L乳酸脱氢酶基因,不能利用糖发酵生产L乳酸.本文采用PCR技术,以乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)基因组DNA为模板,克隆得到L乳酸脱氢酶(Llactatedehydrogenase)基因,将该基因的ORF连接到表达质粒pET22b(+),获得重组质粒pETldhL.将pETldhL质粒转化大肠杆菌BL21株,实现了ldhL基因的表达;对含有ldhL基因的重组菌株进行表达研究,在30℃以IPTG诱导8h后,SDSPAGE分析可见明显特异性条带,酶活力达到6.49u/mL,是野生菌酶活力(2.82u/mL)的2.3倍.对重组表达的L乳酸脱氢酶生物学特性研究显示,它们的最适反应温度为27~30℃,最适反应pH为5.0~5.3.
- 黄彦韦宇拓张黎陈发忠黄日波
- 关键词:L-乳酸L-乳酸脱氢酶乳酸片球菌克隆
- 牛链球菌L-(+)-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中表达被引量:4
- 2005年
- 利用PCR方法从牛链球菌(Streptococcus bovis)基因组DNA中扩增出了L(+)乳酸脱氢酶基因(ldh),并将其连接到表达载体pSE380上,得到重组质粒pSEldh,将重组质粒转化到大肠杆菌菌株JM109。利用SDS-PAGE分析ldh表达产物的分子量为36KD,重组菌株的乳酸脱氢酶酶活力为168.2U/mL,最适反应温度25℃,最适作用pH为5.0,重组质粒的稳定性达99.9%。
- 张黎韦宇拓黄彦杜丽琴黄日波
- 关键词:L-乳酸脱氢酶基因大肠杆菌链球菌基因组DNA
- 克雷伯氏菌甘油脱水酶基因和1,3—丙二醇氧化还原酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
- 1,β—丙二醇是一种重要的化工原料,可用作溶剂、抗冻剂或保护剂、精细化工原料以及新型聚酯—聚埘苯二甲酸丙二醇酯(PTT)和聚氨酯的单体。PTT是一种新型聚酯材料,具有优异的回弹性、染色性、抗污性、较好的抗紫外变色性能等特...
- 周文广韦宇拓黄鲲黄日波
- 关键词:甘油脱水酶大肠杆菌
- 文献传递
- 产甘油基因工程菌的构建
- 2004年
- 利用途径工程的基本原理 ,在大肠杆菌中构建一条产甘油的新代谢途径。从酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae INVSc1菌株总 DNA克隆 3-磷酸甘油脱氢酶基因 (gpdl)和 3-磷酸甘油酯酶基因 (hor2 ) ,构建由两个杂合启动子 trc启动基因的双表达盒的重组质粒 p GEM- Cgpd1- Chor2 ,后者转入E. coli JM10 9菌株 ,构建的重组菌株就具有一条直接将葡萄糖转化为甘油的新代谢途径 ,将该重组菌株以葡萄糖为底物进行摇瓶发酵 ,甘油产率为 1.18g/ L。该研究结果为进一步构建生产 1,3-丙二醇工程菌打下了基础。
- 杜丽琴韦宇拓黄鲲陈发忠黄日波
- 关键词:甘油葡萄糖重组质粒重组菌株基因工程菌磷酸
- 嗜热菌的分离与鉴定
- 高温菌(thermophiles)是具有极其重要科学价值和应用前景的生物资源。早在1969年Brock从黄石公园的热温泉中分离到最适生长温度高于70C的水生栖热菌(Thermus aquaticus),随后Oshima等...
- 苏龙韦宇拓黄日波
- 文献传递
- 甘油脱水酶的定向进化及其高通量筛选方法
- <正>1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,它具有多种用途而倍受重视。在生物法生成1,3-丙二醇的过程中,甘油脱水酶(Glycerol Dehydratase,EC 4.2.1.30)能催化甘油生成3-羟基丙醛,(3- 羟...
- 韦旭钦陈发忠韦宇拓齐向辉黄日波
- 文献传递