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浙江省研究生创新科研项目(1110JF431002G)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
邓少平
钱玲玲
秦玉梅
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相关机构:
浙江工商大学
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发文基金:
浙江省研究生创新科研项目
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相关领域:
生物学
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邓少平
传媒
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食品与生物技...
年份
1篇
2013
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稳定表达甜味受体蛋白T1R2/T1R3的HEK293细胞系的建立
被引量:2
2013年
以小鼠舌组织为对象,提取总mRNA,并以此为模板,使用自行设计的引物通过RT-PCR扩增Gα15、T1R2和T1R3目的片段。构建重组质粒pEGFP-C1-Gα15、pDsRed1-N1-T1R2、pcDNATM6.2/N-YFP-DEST-T1R3。以脂质体介导的方法转染HEK293细胞,经抗性筛选后,通过极限稀释法获得稳定表达T1R2/T1R3的HEK293细胞系,最后通过RT-PCR,荧光显微镜及Western blot方法在基因及蛋白质水平上对建立的稳定表达细胞系进行鉴定。基因及蛋白质水平上的结果均表明,目的基因Gα15、T1R2/T1R3成功导入HEK293细胞中,并且稳定表达。该细胞系的建立为细胞水平上甜味机理的体外研究(如甜味识别热动力学等)提供了稳定的细胞来源。
钱玲玲
秦玉梅
邓少平
关键词:
味觉
HEK293
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