湖南省自然科学基金(06JJ50166)
- 作品数:4 被引量:39H指数:4
- 相关作者:范学工刘洪波李宁周蓉蓉刘悦晖更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肝损伤模型小鼠高迁移率族蛋白-1的表达被引量:9
- 2008年
- 将刀豆蛋白A(Con A)经尾静脉注射入雄性Balb/C小鼠,建立T细胞介导的Con A急性肝损伤小鼠模型,检测模型小鼠不同时间点血清中高迁移率族蛋白1(HMGB1)及肝组织HMGB1mRNA的表达水平,并与血清中TNF-α进行对比.实验显示:在Con A注射后0~3h,小鼠血清中的未能检测出HMGB1蛋白特异带;但在4h后,检测出一条微弱的HMGB1蛋白特异带;在6~36h,均检测出一条清晰的HMGB1蛋白特异带,在8 ̄12h处于一个高水平状态.而正常对照组小鼠血清中未能检测HMGB1蛋白.与HMGB1动力学曲线不同,血清中TNF-α水平在Con A注射后2h就达到峰值,4h后迅速下降,8h恢复到正常范围.Con A小鼠肝细胞中HMGB1mRNA的表达在Con A注射1h后即达到峰值,是对照组的2.4倍,之后迅速回落,3~12h均低于对照组水平(0.5~0.8倍),24h后逐渐恢复正常水平.初步揭示HMGB1在Con A小鼠急性肝损伤中可能发挥重要作用,血清中HMGB1蛋白与TNF-α相比,呈现出迟发与长效的特点,HMGB1给肝细胞造成损伤有足够强度和效应时间.
- 刘洪波范学工刘悦晖张磐周蓉蓉李宁WANG Hai-chao黄建军
- 关键词:刀豆蛋白A肝损伤模型晚期炎症介质高迁移率族蛋白-1
- 乙型肝炎患者血清高迁移率族蛋白-1含量的检测及临床意义被引量:26
- 2007年
- 目的观察不同病情的乙型肝炎患者血清中晚期炎症介质高迁移率族蛋白-1(HMGB1)的含量,通过与肝炎病情评价指标TBil和PTA进行相关性比对,初步阐明晚期炎症介质HMGB1在慢性重型乙型肝炎患者肝衰竭发生中可能发挥的作用。方法收集慢性重型乙型肝炎患者23例,CHB患者31例,健康对照者10名,抽取外周血10ml,按常规方法检测肝炎病情指标TBil和PTA。超滤管去除血清中的大分子蛋白质,再浓缩血清小分子蛋白,然后用Western blot的方法检测样品中HMGB1。利用纯化出的GST-HMGB1融合蛋白进行相对定量,计算出不同患者血清中HMGB1的水平,最后与肝炎病情评价指标TBil和PTA进行相关性比对。结果23例慢性重型乙型肝炎患者血清中HMGB1检出率为100%(23/23),平均含量为(83.4±21.3)μg/L;10例重度CHB患者血清中HMGB1检出率为90%(9/10),平均含量为(78.1±19.5)μg/L;11例中度CHB患者的血清中HMGB1检出率为55%(6/11),平均含量为(60.6±14.3)μg/L;10例轻度CHB患者及12例恢复患者中均仅1例检出HMGB1,检出率分别为10%和8%,含量分别为28.9μg/L和39.7μg/L;健康对照者血清中未能检出HMGB1。血清中HMGB1的含量与TBil呈正相关,与PTA呈负相关。结论慢性重型乙型肝炎患者血清中HMGB1的含量与疾病的严重程度密切相关,晚期炎症介质HMGB1在慢性重型乙型肝炎患者肝衰竭的发生中可能起重要的作用。
- 刘洪波范学工黄建军李宁彭建萍李沙陵Haichao Wang
- 关键词:肝炎乙型高迁移率族蛋白-1肝功能衰竭
- TNF-α诱导人肝细胞系HepG2细胞释放HMGB1的研究被引量:6
- 2009年
- 目的:观察小剂量TNF-α刺激下非坏死HepG2细胞是否存在HMGB1移位及释放。方法:以终浓度为25ng/ml的TNF-α作用HepG2,RAW264.7及HEK293细胞4、8、12、16、20小时和24小时,MTT法检测细胞存活率,Westernblot检测上清HMGB1含量,免疫荧光观察HMGB1移位,TUNEL法原位检测细胞凋亡。结果:TNF-α作用后24小时,HepG2,RAW264.7及HEK293细胞存活率分别为91.99%±0.30%,91.28%±0.56%和90.85%±0.72%。TNF-α作用12~24小时,HepG2和RAW264.7细胞培养上清中可以检测到明显的HMGB1,与对照组及TNF-α作用的HEK293组比较差别有统计学意义(P<0.01)。HMGB1的释放伴随着其从细胞核向胞浆的移位。TNF-α作用后24小时各组细胞凋亡率均低于5.0%,统计学无差异。结论:经TNF-α诱导,活化状态的HepG2细胞可发生HMGB1的移位及释放。
- 周蓉蓉范学工刘洪波李宁张磐章保新戴霞红HaiChaoWang
- 关键词:高迁移率族蛋白1HEPG2
- 脂多糖诱导肝细胞HepG2释放HMGB-1的研究被引量:9
- 2008年
- 观察小剂量LPS(lipopolysaccharide)刺激下非坏死HepG2细胞是否存在HMGB1(high mobility group box—1 protein)移位及释放.以终浓度为100μg/L的LPS作用HepG2和RAW264.7细胞0、4、8、12、16、20、24h.LPS作用16-24h.HepG2和RAW264.7细胞培养上清中均可以检测到明显的HMGB1,与对照组差别有显著性(P〈0.05).而MTT法和上清中LDH(lactate dehydrogenase)含量测定显示,LPS处理24h的HepG2存活率仍然非常高.免疫荧光观察到HMGB1的释放伴随着其从细胞核向胞浆的移位.由此可见,经LPS诱导,非坏死状态的HeDG2细胞可发生HMGB1的移位及释放.
- 周蓉蓉范学工刘洪波刘悦晖贺新春戴霞红WANG Hai-chao
- 关键词:高迁移率族蛋白-1HEPG2脂多糖