国家自然科学基金(30973729)
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
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- 大鼠腹膜间皮细胞原代培养方法被引量:3
- 2012年
- 目的:探讨大鼠腹膜间皮细胞(RPMC)原代培养方法。方法:采用胰蛋白酶-EDTA消化法,从大鼠的腹膜组织中分离RPMC。倒置相差显微镜对细胞进行形态学观察及鉴定;免疫组化法进行鉴定。采用免疫组化法检测广谱抗细胞角蛋白(PCK)抗体、抗波形蛋白(Vim)抗体、抗白细胞CD45抗体、抗第Ⅷ因子相关抗体的表达。结果:倒置相差显微镜示细胞融合后贴壁的细胞均能完全伸展,细胞形态多种多样,椭圆形、梭形、多角形,细胞大小不一,约7~9d,细胞生长达融合状态,立即呈现典型的"铺路石样"外观。免疫组化结果示RPMC角蛋白抗体、波形蛋白抗体表达阳性,抗白细胞CD45抗体、抗第Ⅷ因子相关抗体表达阴性。结论:RPMC原代培养方法,可获得纯度高,数量较多的腹膜间皮细胞,可为进一步研究腹膜透析腹膜纤维化的防治提供实验基础。
- 杜伟伟杨洪涛
- 关键词:腹膜间皮细胞原代培养
- 中药对AQP1表达的影响及其与腹膜透析的关系被引量:2
- 2013年
- 水是生命活动的根本,细胞摄取及排出水分是机体必须生命活动之一。细胞内外的水分子作为一种不带电荷且半径极小的极性分子以跨膜自由扩散的方式穿梭于脂质双分子层实现细胞的多种功能。近几十年来,大量研究证实机体内广泛存在着特异性的水通道蛋白家族(aquaporins,AQPs),是一个有选择性、高效率转运水分子的小分子孔道蛋白家族,存在于动植物、微生物和人体内的细胞膜上。
- 赵岩茹杜伟伟杨洪涛
- 关键词:腹膜透析AQP1中药细胞摄取机体内
- MTT检测肾疏宁含药血清对大鼠腹膜间皮细胞的作用被引量:2
- 2012年
- 目的:以获取肾疏宁含药血清干预大鼠腹膜间皮细胞的最佳药物剂量及时间。方法:采用胰酶消化的方式体外培养大鼠腹膜间皮细胞鉴定成功后分组(空白血清组、不含药大鼠血清组、肾疏宁低剂量组、肾疏宁中剂量组、肾疏宁高剂量组)后采用MTT检测方法检测肾疏宁含药血清对大鼠腹膜间皮细胞的作用。结果:含药血清低、中、高剂量组两两比较差异有统计学意义(P<0.001);肾疏宁含药血清是细胞OD值的影响因素;空白血清组、不含药大鼠血清组与肾疏宁低剂量组两两比较差异无统计学意义(P>0.05);不同作用时间的(P<0.001),故认为不同作用时间也是OD值的影响因素。12h与24h时间段比较,差异有统计学意义(P<0.01);12h与36h时间段比较,差异有统计学意义(P<0.01);24h与36h时间段两两比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肾疏宁含药血清作用于大鼠腹膜间皮细胞后,MTT检测其OD值,剂量组以肾疏宁中剂量组最有意义,作用时间以24h最有意义。
- 杜伟伟杨洪涛
- AQP1与腹膜透析超滤相关研究进展被引量:2
- 2012年
- 水通道蛋白(aquaporin,AQP)是一类存在于细胞膜上的水通透性蛋白。水通道蛋白属于主体膜内在蛋白家族成员,广泛存在于自然界的植物、脊椎动物、无脊椎动物和微生物的细胞膜上,发现有200余种水通道蛋白,在哺乳动物中,已克隆和鉴定的有13种水通道蛋白,它们是AQP0,AQP12。
- 杜伟伟杨洪涛
- 关键词:AQP1水通道蛋白无脊椎动物家族成员哺乳动物
- 肾疏宁对体外培养大鼠腹膜间皮细胞AQP1表达的影响
- 2012年
- 目的:探讨肾疏宁对体外培养大鼠腹膜间皮细胞水通道蛋白1表达的影响。方法:原代培养大鼠腹膜间皮细胞、鉴定后传至第3代后分为5组:空白血清组、1.5%腹膜透析液组、4.25%腹膜透析液组、1.5%腹膜透析液+肾疏宁含药血清组、4.25%腹膜透析液+肾疏宁含药血清组。分别采用ELISA酶联免疫法、荧光定量PCR检测水通道蛋白1的表达。结果:1.5%PDS组、4.25%PDS组、1.5PDS%+肾疏宁含药血清组、4.25%PDS+肾疏宁含药血清组各组均与空白血清组比较AQP1表达指数均增高(P<0.05)。结论:证明肾疏宁含药血清有上调体外培养大鼠腹膜间皮细胞上水通道蛋白1的表达的作用。
- 杜伟伟杨洪涛
- 关键词:肾疏宁腹膜间皮细胞水通道蛋白1