天津市卫生局科技基金(05KYZ24)
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
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- 甲泼尼龙和他克莫司在体外对HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒cccDNA合成的影响
- 2009年
- 目的探讨甲泼尼龙(MP)和他克莫司(Tac)在体外对乙型肝炎病毒(HBV)cccDNA合成的影响。方法采用HepG2.2.15细胞(HBV永久转染人肝癌细胞系)为体外实验模型,经四甲基偶氮唑盐(MTT)试验确定MP的安全浓度在0-250ng/ml,Tac的安全浓度在0-500ng/ml。将不同安全浓度的MP(0、10、50、100及250ng/ml)和Tac(0、50、100及500ng/ml)分别作用于该细胞系,72h后收集细胞培养上清液及细胞,采用实时定量聚合酶链反应检测上清液中HBV DNA及细胞内HBV cccDNA水平。结果与不含MP者比较,当MP浓度分别为10、50、100及250μg/L时,HBV DNA和HBV cccDNA水平明显降低,分别为(5.7823±0.1861)、(5.1337±0.1364)、(4.7865±0.0398)及(4.1468±0.1016)log10拷贝/ml(P〈0.015,P〈0.01);HBV cccDNA水平分别为(5.8975±0.0296)、(5.7471±0.0524)、(5.1162±0.0039)及(4.8272±0.1394)log10拷贝/ml(P〈0.05,P〈0.0t),该抑制作用呈剂量依赖性。不同Tac浓度组的HBV DNA和HBV cccDNA水平虽然低于不含Tac者,但差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论在体外.MP能抑制HepG2.2.15细胞中HBV DNA的表达,同时可以减少细胞内HBV cccDNA的合成,该作用呈剂量依赖性;Tac无此作用。
- 沈中阳郑卫平宋红丽王建
- 关键词:甲泼尼龙他克莫司
- 糖皮质激素对人肝癌细胞系增殖的抑制作用被引量:3
- 2009年
- 目的探讨糖皮质激素在体外环境下对肝癌细胞增殖的影响及可能机制。方法以不同浓度(0.1、0.01、1×10^-3、1×10^-4、1×10^-5、1×10^-6mmol/L,均为终浓度)的地塞米松(Dex)在体外作用于人肝癌细胞系Bel7402、H7402和Hep G2细胞,计算细胞生长抑制率。再以Bel7402细胞为对象,分别加入1×10^-4mmol/L的Dex(Dex组)、1×10^-4mmol/L的Ru486(Ru486组)、Dex和Ru486(浓度均为1×10^-4mmol/L,Dex+Ru486组),并设加入培养液的阴性对照组,计算各组细胞生长抑制率,流式细胞仪测定各组的细胞周期分布,Western免疫印迹法检测Bel7402细胞的P21蛋白的表达;报告基因法检测Dex和Ru486对Bel7402细胞的核因子κB(NF-κB)启动子的影响。结果各浓度Dex对3种肝癌细胞的增殖均有抑制作用,且呈浓度依赖性。Dex组Bel7402细胞的增殖受到抑制,其G2/G1期细胞增多,S期细胞减少,其细胞内的P21蛋白表达上调,NF-κB启动子的激活受到抑制,而加入Ru486后(Dex+Ru486组),Dex的这些作用被逆转。结论Dex可以抑制Bel7402细胞的增殖,并使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能包括上调P21蛋白的表达和抑制NF-κB的表达,这种作用由糖皮质激素胞内受体介导。
- 涂金鹏郑虹张晓东叶丽虹沈中阳
- 关键词:肝细胞糖皮质激素类细胞增殖
- 他克莫司在体外对HepG2细胞增殖及细胞周期的影响
- 2012年
- 目的研究他克莫司在体外对肝癌细胞HepG2的细胞增殖、细胞周期及细胞周期蛋白A(cyclin A)表达的生物学影响。方法选择肝癌细胞HepG2进行体外培养,经含有不同浓度的他克莫司(低、中和高浓度组剂量分别为50μg/L、100和500μg/L、1 000和3 000μg/L,对照组0μg/L)的培养基干预后,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)及流式细胞技术,分别检测细胞增殖、细胞周期及cyclin A水平。结果①中浓度(500μg/L)和高浓度(1 000和3 000μg/L)的他克莫司对HepG2细胞有增殖抑制作用,且抑制作用随浓度的增加而增加,而低浓度的他克莫司则无抑制作用。②他克莫司对HepG2细胞周期的影响:中浓度(500μg/L)和高浓度(1 000和3 000μg/L)的他克莫司作用时,HepG2细胞停止在G0/G1期,从而对肿瘤细胞的生长有抑制作用,且抑制作用随浓度的增加而增加,而低浓度的他克莫司则无抑制作用。③他克莫司可以降低HepG2细胞中cyclin A的表达,且与浓度相关,他克莫司浓度越高,cyclin A表达越少。结论他克莫司在体外对HepG2增殖有抑制作用,其中cyclin A发挥一定的作用。
- 李立新郑卫萍宋红丽宋晓静庄倩
- 关键词:他克莫司HEPG2增殖细胞周期CYCLIN
- 甲泼尼龙对HepG2和HL-7702细胞增殖活性影响的研究被引量:1
- 2009年
- 甲泼尼龙(MP)是合成的糖皮质激素,具有强力抗炎、免疫抑制及抗过敏作用,是临床上最常用的免疫抑制剂之一,在器官移植中发挥着重要的作用。近年来研究表明,肝癌肝移植术后使用MP可对肝癌细胞的增殖产生抑制作用,而对正常肝细胞增殖以及肝癌肝移植术后肝癌复发的影响并不清楚。本研究旨在探讨MP对肝癌细胞和正常肝细胞系的细胞增殖、细胞周期及周期蛋白表达的影响。
- 宋红丽郑卫萍刘津王建高宇徐卫团沈中阳
- 关键词:甲泼尼龙细胞系细胞增殖细胞周期蛋白类