教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-08-07-04) 作品数:13 被引量:103 H指数:8 相关作者: 陈红兵 高金燕 罗春萍 胡纯秋 李欣 更多>> 相关机构: 南昌大学 更多>> 发文基金: 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 食品科学与技术国家重点实验室目标导向资助项目 食品科学与技术国家重点实验室自由探索课题 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 更多>>
两种不同离子层析法分离鸡蛋溶菌酶的比较研究 2010年 以鸡蛋溶菌酶的主要分离方法—阳离子交换法与阴离子交换法为对象,从分离的回收率、鸡蛋溶菌酶纯度以及样品处理周期等方面进行比较研究。研究结果显示,两种方法均能较好地分离鸡蛋溶菌酶。阴离子交换法分离出的鸡蛋溶菌酶纯度更高,纯度>90%,并且分离周期短,操作更方便,但其回收率为20·7%,而阳离子交换法的为31·1%,阴离子交换法更适合于制备高纯度的蛋清溶菌酶。 张新宝 陈红兵 高金燕关键词:溶菌酶 分离纯化 花生过敏原Ara h6的分离纯化及鉴定 被引量:10 2010年 为高效分离纯化花生过敏原Ara h 6,通过脱脂、蛋白浸提、阴离子交换层析分离得到目的蛋白,并用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/MS)及免疫印迹技术(Western blotting)对其进行鉴定。结果表明,该蛋白为花生过敏原Ara h 6,其分子质量约为15kD,纯度大于95%,得率为22.5%。该方法简单、高效,可为花生过敏的进一步研究提供实验材料。 罗春萍 高金燕 胡纯秋 陈红兵 闫飞关键词:ARA H 分离纯化 热加工及超高压处理对卵白蛋白抗原性的影响 被引量:17 2010年 以蛋清为原料,采用加热加工、动态超高压加工及两种方法结合处理,研究不同加工方式对蛋清中卵白蛋白抗原性的影响。结果表明:卵白蛋白抗原性随着加热温度的升高而降低,最高降低68%,且抗原性急剧降低的临界温度是80℃;经超高压均质处理后,其抗原性随着压力的升高先降低后回升;经二者结合处理后,卵白蛋白抗原性与单独加热处理变化趋势相似,但无单独热处理变化幅度大,最高降低52.5%;表明了热处理对卵白蛋白抗原性的影响比超高压大,结果为研发低致敏性或无致敏性蛋制品提供参考。 张银 佟平 麻小娟 李欣 陈红兵关键词:动态超高压微射流 卵白蛋白 鸡蛋过敏 热加工对花生过敏原Ara h2抗原性及构象的影响 被引量:16 2010年 从花生种子中分离纯化花生过敏原Ara h 2,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、圆二色谱(CD)、ANS荧光探针及紫外可见(UV-Vis)光谱等方法,系统研究热加工对Ara h 2抗原性和结构的影响。结果表明:Ara h 2蛋白经55或70℃处理后其抗原性略有升高,经85,100或115℃处理后,其抗原性显著降低,且随着温度和时间的增加其抗原性均不断降低。CD色谱分析表明,Ara h 2经热处理后其二级结构发生变化;ANS荧光探针光谱显示,不同的热处理均导致Ara h 2表面疏水性增加。紫外光谱显示,不同温度对Ara h 2处理30 min后(除55℃外),其紫外吸收值均升高。Ara h 2经100℃处理不同时间后,其紫外吸收值均有增加。由此推断,花生过敏原Ara h 2的构象改变导致了其抗原性的降低。 胡纯秋 高金燕 陈红兵 罗春萍 闫飞关键词:热加工 抗原性 圆二色谱 紫外光谱 重组花生过敏原Ara h2的生物合成 被引量:5 2010年 为获得重组花生过敏原Ara h2。通过RT-PCR合成cDNA,并以此为模板进行PCR扩增目的基因Ara h2,扩增产物经纯化后克隆至pMD19-TSimple载体中,构建重组质粒pMD19-T-Ara h2。上述重组质粒经酶切纯化后定向克隆到pGEX-4T-1表达载体中,构建原核表达载体pGEX-4T-1-Ara h2,并转化表达宿主菌BL21-codonPlus(DE3)-RIPL中,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果表明,该表达蛋白大小约为46kD,与理论值相符。通过Glutathione Sepharose 4B凝胶亲和层析方法纯化融合蛋白GST-Ara h2,获得融合蛋白纯度约为90%。Western blotting分析表明,经纯化的融合蛋白能与抗Ara h2兔血清发生特异性反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性。 胡纯秋 高金燕 罗春萍 陈红兵 朱盼关键词:食物过敏 H2 生物合成 花生交叉过敏反应的研究进展 被引量:7 2009年 花生过敏严重影响了过敏人群的生活质量,而在过敏反应中花生的交叉过敏现象非常普遍。本文综述了花生过敏的物质基础、交叉过敏的机理及花生相关的交叉过敏反应研究情况,为花生过敏的进一步研究提供参考。 罗春萍 高金燕 胡纯秋 陈红兵关键词:花生 花生过敏原 交叉过敏反应 食物蛋白质的酶法改性研究进展 被引量:15 2010年 酶法改性技术是改善食物蛋白质功能特性的一种重要手段。本文主要从共价交联作用、水解作用、脱酰胺作用和磷酸化作用4个方面阐述酶法改性食物蛋白质的机制及应用,其中共价交联作用研究前景广阔,水解作用是一种较为成熟的方法,脱酰胺作用近年来引起了学者的广泛关注,而酶法磷酸化的研究则相对较少。 刘潇 吴进菊 高金燕 陈红兵关键词:食物蛋白质 水解作用 磷酸化作用 花生过敏原Ara h2.02二级结构和B细胞抗原表位预测 被引量:11 2009年 为预测花生过敏原Arah2.02的二级结构和B细胞抗原表位,通过Genbank数据库搜索到Arah2.02基因,并推导出其相应的氨基酸序列,采用SOPMA和DNAStar软件预测该蛋白质的二级结构以及通过Jameson-Wolf法、Kyte-Doolittle法、Emini法和Karplus-Schulz法分别预测其抗原指数、亲水性、表面可及性、柔韧性等参数,并综合分析预测该蛋白的B细胞抗原表位。结果表明:在序列28~31、56~73、76~90、92、148、156~158、168~169区域最可能是Arah2.02蛋白的B细胞抗原表位的优势区域。该结果将为寻找Arah2.02的最佳优势表位提供支持,同时为该蛋白单克隆抗体的制备等研究提供理论依据。 胡纯秋 高金燕 罗春萍 陈红兵关键词:B细胞表位 基于表位预测的花生过敏原Ara h6免疫交叉反应性研究 被引量:10 2010年 为了探讨花生过敏原Arah6与其他同源蛋白之间的交叉反应,通过各种生物信息数据库(Genbank,DiscoTope)以及网络工具及软件(BLAST,NPS@和Protean,Clustalx,PyMOL),开展基于表位预测的Arah6交叉免疫反应性研究。结果表明:肽段AA10~15、45~48、53~60、116~118区域可能是Arah6的线性表位优势区域;Arah6的构象型表位优势区有4个,它们存在的区域为AA1~13、35~51、53~59、89~105;基于线性表位预测的15种蛋白质与Arah6可能具有交叉反应性,其中4种(Arai6,conglutin,Arad6和conglutin8)发生交叉反应的概率为100%;基于构象型表位预测的17种蛋白质与Arah6可能具有交叉反应性,其中4种(Arai6,conglutin,Arad6和conglutin8)发生交叉反应的概率为100%。本结果对进一步了解Arah6的过敏性以及指导开展食品中Arah6的免疫学检测具有重要作用。 朱盼 陈红兵 胡纯秋 李欣 罗春萍关键词:表位 酶改性对食物蛋白质过敏原性的影响 被引量:11 2010年 酶法改性蛋白技术主要包括酶水解和酶交联方法,它可以改变蛋白质的结构和功能特性,已广泛用于食品加工。酶水解,包括胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、糜蛋白酶,可以水解食物蛋白表面的过敏原表位,从而降低其过敏原性;酶交联,包括转谷酰胺酶、过氧化物酶、多酚氧化酶等,可以通过交联反应促使过敏原蛋白聚合而使其过敏原表位包裹在内部,因而也可以降低食物的过敏原性。总之,酶改性是降低食物蛋白过敏原性的一种有效方法,值得深入研究。 程伟 陈红兵 高金燕 李欣关键词:酶法改性 酶水解