国家高技术研究发展计划(2006AA10A115)
- 作品数：28 被引量：175H指数：9
- 相关作者：万勇善刘风珍廖伯寿黄家权晏立英更多>>
- 相关机构：山东农业大学中国农业科学院油料作物研究所山东省花生研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 花生青枯菌红安分离物的鉴定被引量：8
- 2010年
- 从湖北红安发病花生根部分离到一个细菌分离物2C1,对该分离物进行了TZC显色反应,致病力的测定,16S rRNA、23S rRNA和鞭毛蛋白基因filC的PCR扩增,16S rRNA PCR扩增产物的序列分析。结果显示,分离物2C1在TZC培养基上表现出青枯菌的典型菌落形态,对花生具有强致病性,PCR扩增获得与预期大小的产物片段;16S rRNA核苷酸序列具有与其它青枯菌分离物99%左右的一致性。上述结果表明:2C1是具有强致病力的花生青枯菌分离物。
- 晏立英黄家权雷永王圣玉廖伯寿
- 关键词：花生青枯菌
- 花生叶片离体培养花器官分化及其开花结果研究
- 2008年
- 以花生幼叶为外植体进行离体培养,研究BA浓度对花器官分化的影响并进一步观察试管内花器官的发育.结果表明:经MSB+1mg/LBA+0.5mg/LKIN+2mg/LIAA培养基诱导的愈伤组织,转接到附加1～3mg/LBA的MSB培养基上培养,均能直接诱导分化花器官,但2mg/LBA的诱导效率最高达21.13%;诱导分化的花器官转接到MSB培养基继续培养,部分花器官可以在试管内开花、受精、成针、结实.试验实现了以花生幼叶为外植体,在试管内完成诱导花芽、开花、受精、形成果针、子房膨大,直至形成荚果等过程,为离体条件下研究花生花器官分化、荚果及种子发育提供了技术体系和材料.
- 刘风珍万勇善王洪刚胡晓君
- 关键词：花生叶片离体培养
- 国槐DNA导入花生栽培品种选育抗叶斑病新种质的鉴定被引量：13
- 2010年
- 为了培育抗花生叶斑病的新种质,利用花粉管通道技术将国槐DNA导入花生栽培品种79266,在变异后代筛选抗叶斑病材料,对选出的5个种质系进行叶斑病抗性和农艺性状的田间鉴定,并进行抗病种质系与受体DNA差异的SSR多态性分析。获得的主要结果如下:受体品种79266感染叶斑病(包含花生褐斑病、黑斑病和网斑病)病程曲线的线下面积(AUDPC值)为205.3,5个抗病种质系的AUDPC值极显著低于受体品种,其中05D1128的AUDPC值最小,为112.0,感病最轻;收获前7 d调查花生褐斑病和网斑病的发病程度,05D1148对花生褐斑病的抗性最强,其病级和病情指数均极显著低于受体品种,抗性比受体品种提高17.56%。05D1128对网斑病的抗性最强,其病级和病情指数均极显著低于受体品种,抗性比受体品种提高31.83%;叶斑病抗性最强的05D1128与受体品种相比,百果重和百仁重明显提高,但荚果产量和籽仁产量极显著降低。褐斑病抗性最强的05D1148与受体品种相比,二者所考察农艺性状间无显著差异;采用40对SSR引物进行PCR扩增,在05D106、05D1128、05D1144、05D1148、05D1172 5个新种质系与受体间检测到的多态性位点数分别是9,8,5,6和7。因此,利用国槐DNA导入花生栽培品种提高其对叶斑病的抗性的育种方法是有效的,所选育种质系中05D1148对叶斑病的抗性和农艺性状的综合表现最好,可以作为新的花生抗叶斑病种质材料加以利用。
- 刘风珍万勇善薛其勤
- 关键词：叶斑病
- 花生SSR-PCR体系的优化被引量：5
- 2008年
- 以花生品种丰花3号为材料,研究了花生SSR技术中PCR反应体系的主要成分对SSR扩增效果的影响及不同引物的退火温度。结果表明dNTP对扩增影响较大,每对引物都有其扩增适合的退火温度。确立了适合花生SSR分子标记研究的优化体系。最终确定总反应体系为20μl,其中25mMMgCl21.5μl,2.5mMdNTP1.6μl,5U/μlTaq酶0.17μl,100ng/μl模板DNA0.4μl,2.5mM引物5μl。优化后的扩增程序退火温度为54℃。
- 张发万勇善刘风珍
- 关键词：花生SSR
- 花生NBS类AhAG3抗病基因克隆与初步功能分析
- 花生在我国植物油脂供给、出口创汇及改善营养结构等方面发挥日益重要的作用，黄曲霉毒素污染不仅影响我国花生国际市场竞争力，威胁消费者身体健康，也给出口企业造成严重经济损失。研究表明，通过遗传改良提高现有品种的黄曲霉抗性是可行...
- 单世华万书波刘宇闫彩霞张廷婷
- 关键词：花生品种选育
- 花生种皮中一种NBS类抗病基因的克隆与序列分析被引量：3
- 2009年
- 利用植物抗病基因核苷酸结合位点(NBS)的保守区设计一对特异引物,以抗、感黄曲霉病花生品种J11和金花1012的种皮基因组DNA和RNA为材料进行DNA-PCR和RT-PCR扩增,经克隆、测序,得到一条504 bp的目的片段pnbs1,在GenBank上的登录号为GQ199610。Blast和Blastx分析发现pnbs1核苷酸序列与C8V1G10F抗性蛋白的核苷酸序列的同源性为89%,与抗性蛋白PLTR的氨基酸序列同源性为59%。该片段的氨基酸序列中含有抗病基因NBS区域的3个保守模体:GPGGVGKTT、KKFFIVLDDVW和STILLTTR,推测pnbs1可能是花生NBS类抗性基因的核心区域。
- 石运庆陈高孙兵单世华陈静苗华荣胡晓辉
- 关键词：克隆
- 花生抗黄曲霉基因的分离与初步鉴定
- 花生是我国重要的经济作物与油料作物,也是最容易受黄曲霉感染的农作物之一,黄曲霉毒素污染不仅直接危害人们的健康而且影响我国花生的品质和外贸出口,解决黄曲霉毒素污染问题
- 张廷婷单世华闫彩霞李春娟万书波
- 关键词：花生黄曲霉基因克隆育种
- 文献传递
- 花生RGA片段的克隆及初步分析
- 2011年
- 目的:通过同源克隆获得了花生闽花6号的RGA片段,为其抗性的研究及抗性育种提供了参考资料。方法:试验分为两组:其一通过利用抗性基因的NBS保守区所设计的简并引物对花生品种闽花六号进行了RGA片段扩增,其二结合已登录的花生RGA片段序列经过多元比对后设计简并引物进行RGA片段的扩增及序列分析;分析比较两组克隆方法的效果。结果:测序分析表明:前者20条随机测序序列中没有一条与已知RGA片段序列相似;后者20条随机测序序列中有18条为RGA片段序列,其登录号为GenBankEU639668-EU639685。结论:前一种方法克隆扩增RGA基因片段的效率很低,而后一种方法克隆扩增效果更好,这为闽花6号花生的遗传改良提供了理论基础。
- 黄湘文张冲石新国陈华郑奕雄
- 关键词：花生RGA同源克隆
- 青枯菌定量检测方法的建立及其在花生中的应用被引量：6
- 2011年
- 【目的】建立快速、准确的青枯菌定量检测方法,研究青枯菌与寄主植物的互作。【方法】以青枯菌hrpB为靶基因,利用实时荧光定量PCR(RTQ-PCR)方法建立青枯菌的定量检测方法,并利用该方法检测花生接种青枯菌后细菌数量的变化动态。【结果】以提取的细菌DNA为模板和以青枯菌的全细胞为模板均能对青枯菌准确定量,在未富集细菌的前提下,利用全细胞细菌定量的最低限为103 CFU/mL,检测的线性范围为103—108 CFU/mL,计数细菌的方法能准确反应青枯菌数量的差异,但该数值约是细菌平板计数法计数的1.5倍。利用RTQ-PCR计数细菌,发现接种后的3—5 d,是花生与青枯菌互作的关键时期。花生节对抑制青枯菌的扩展具有重要的作用。【结论】RTQ-PCR计数细菌是一种简单、快速、高通量的青枯菌定量方法。
- 黄家权晏立英叶小文雷永廖伯寿
- 关键词：青枯菌实时荧光定量PCR花生
- 花生磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及反义表达载体的构建被引量：2
- 2010年
- 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)是控制植物籽粒中蛋白质/油脂含量比例的关键酶。本研究利用RT-PCR技术,克隆PEPCase基因的cDNA片段,并将克隆的PEPCase基因片段反向连接替代植物表达载体PB I121的GUS基因。从花生栽培品种荔蒲大花生中克隆获得编码PEPCase基因的cDNA片段(886 bp),测序结果显示其核苷酸序列与已报道的花生(EU391629)、棉花(AY008939)、大豆(D10717)、拟南芥(AY210895)、豌豆(D64037)PEPCase基因对应部分的同源性分别为99.77%、84.37%、81.54%、81.25%、78.71%。构建的反义表达载体中PEPCase基因由35S启动子所控制,将构建的反义表达载体命名为pBGPEP。为通过反义抑制技术提高花生含油量提供了基因及表达载体。
- 潘昱名刘风珍万勇善郑成超
- 关键词：花生PEP羧化酶RT-PCR反义表达载体
