国家自然科学基金(81070333)
- 作品数：3 被引量：16H指数：3
- 相关作者：田德安邓欢周珍珍黄焕军朱倩更多>>
- 相关机构：华中科技大学北京市普仁医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经生长因子在原发性肝癌中的表达及其临床意义被引量：11
- 2013年
- 目的观察神经生长因子（NGF）在原发性肝癌组织中的表达及在患者血清中的含量，了解血清NGF水平与肝癌临床病理特征的关系。方法26例肝细胞癌及对应癌旁组织，采用半定量PCR、免疫印迹及免疫组织化学分析NGFmRNA和蛋白的表达及其分布。健康对照者、慢性肝炎、肝硬化及肝癌患者共150例，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清NGF的水平，分析其临床意义。两组之间差异的显著性比较用f检验、Mann-WhitneyU检验，多组之间差异的显著性比较应用Kmskal-WauisH检验。数据均采用SPSS11．5统计软件处理。结果肝癌组织中NGF在mRNA及蛋白水平的表达高于癌旁组织，NGF主要分布于肝细胞胞质。血清NGF水平：肝癌组、肝硬化组、慢性肝炎组患者和正常对照组分别为（33．86±16．11）pa／ml、（20．57士9．73）pg／ml、（13．20±6．23）pg／ml和（11．13±6．12）pg／ml，肝癌组、肝硬化组显著高于慢陆肝炎组患者和正常对照组，x^2值分别为39．119和12．041，P值均〈0．0l。肿瘤直径大于5cm及TNM分级为Ⅲ、IV级的肝癌患者血清NGF的水平高于肿瘤直径小于5cm及TNM分级为I、Ⅱ级的患者。结论NGF在肝癌组织中高表达，肝癌患者血清NGF水平明显升高，与肿瘤体积和TNM分级相关，提示NGF在肝癌的发生和发展过程中可能发挥一定作用，血清NGF有助于肝癌患者的病情评估和预后估计。
- 黎培员柯小丽朱倩田德安
- 关键词：肝细胞神经生长因子预后
- 靶向MTDH的小干扰RNA对人原发性肝癌细胞HepG2骨架重排的影响被引量：3
- 2013年
- 目的构建人MTDH基因的shRNA干扰载体,并观察其对原发性肝癌细胞HepG2骨架重排的影响。方法针对MTDH基因的不同部位设计3对shRNA的寡核苷酸片段,克隆到载体pGCsilencerTM H1/Neo中,RT-PCR、Western blotting及免疫荧光检测转染后MTDH mRNA和蛋白表达变化情况,并筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体,并将其转染人原发性肝癌细胞HepG2,用罗丹明标记的鬼笔环肽显示沉默MTDH基因后对人原发性肝癌细胞HepG2骨架蛋白F_actin的改变。结果靶向MTDH干扰质粒构建成功。与转空载体的阴性对照组及未转染组比较,转染pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-shRNA后,HepG2中MTDH mRNA和蛋白表达明显降低,其中以pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-S1最为明显,达到90%以上;细胞形态及细胞骨架显示转染pGCsilencerTMH1/Neo-MTDH-S1的细胞骨架蛋白F_actin发生重排。结论成功构建并筛选最佳抑制效率的靶向MTDH干扰pGCsilencerTM H1/Neo-MTDH-S1,该载体能有效重排肝癌细胞骨架。
- 周珍珍邓欢黄焕军夏羽佳涂炜何嘉怡田德安
- 关键词：肝细胞癌MTDH小干扰RNAHEPG2
- AEG1促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β的实验研究被引量：3
- 2013年
- 目的研究AEG1能否促进肝癌细胞HepG2分泌细胞因子IL-6、IL-1β,探讨AEG1是否参与改变肿瘤微环境。方法用脂质体稳定转染法分别转染pcDNA3.1(-)-AEG1(AEG1全长质粒)、psilencer 2.0-shAEG1(AEG1干扰质粒)至HepG2细胞,相对应以转染空质粒pcDNA3.1(-)、psilencer 2.0的HepG2细胞为对照组;采用实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)、Western blotting检测AEG1 mRNA和蛋白表达变化;采用实时荧光定量RT-PCR和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞因子IL-6、IL-1β的表达和分泌。结果与转染相应空载体的阴性对照组和未转染的空白对照组相比,分别转染AEG1全长质粒/AEG1干扰质粒后,HepG2细胞中AEG1的蛋白表达明显增高/降低。转染AEG1全长质粒的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组明显增强(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也显著高于对照组(P均<0.05);转染AEG1 shRNA的HepG2细胞中IL-6、IL-1βmRNA均较对照组和空白组降低(P均<0.05),细胞培养介质中IL-6、IL-1β蛋白浓度也低于对照组(P均<0.05)。结论成功构建稳定过表达和沉默AEG1的HepG2细胞,AEG1能调控IL-6、IL-1β的表达和分泌。
- 邓欢周珍珍黄焕军刘静梅刘吉巧兰小勤田德安
- 关键词：肝细胞癌HEPG2IL-6IL-1Β
