河南省基础与前沿技术研究计划项目(102300410038)
- 作品数：14 被引量：49H指数：4
- 相关作者：张建波吕晓东于庆凯胡骏宋永平更多>>
- 相关机构：郑州大学中山大学河南省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省医学科技攻关计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胃癌伴神经内分泌分化HER-2基因扩增和蛋白表达及预后分析被引量：3
- 2015年
- 目的观察胃癌伴神经内分泌分化(NED)和胃癌中HER-2基因扩增及蛋白表达情况。方法回顾性分析胃癌伴神经内分泌分化患者70例和具有相同分期的胃癌患者150例,采用免疫组化法(IHC)联合双色银染色素原位杂交(DISH)检测胃癌伴NED和胃癌中HER-2基因扩增和蛋白表达情况,并对胃癌伴NED进行预后分析。结果胃癌伴NED和胃癌中HER-2蛋白过表达率分别为20.00%和21.33%,HER-2基因扩增率分别为8.57%和14.67%。HER-2蛋白表达、HER-2基因扩增及基因扩增类型2组间差异均无统计学意义;胃癌伴NED17号染色体多体与HER-2基因扩增呈正相关。胃癌伴NED患者中HER-2基因扩增者术后生存期短于HER基因不扩增者。多因素分析显示胃癌伴或不伴NED、HER-2基因是否扩增、淋巴结转移和手术方式是预后的独立影响因素。结论胃癌伴NED属于胃癌特殊类型,其HER-2基因扩增、蛋白表达情况和胃癌相同,HER-2基因扩增的胃癌伴NED患者预后差。
- 宋魏于庆凯张晶晶张建波孙淼淼
- 关键词：神经内分泌原癌基因蛋白质类基因扩增HER-2蛋白表达
- miR-218调控SNX4蛋白对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨miR-218调控SNX4蛋白对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:q PCR检测乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中miR-218的表达情况;分析miR-218的表达和乳腺癌临床病理参数之间的关系;双荧光素酶实验检测miR-218和SNX4之间的关系;过表达miR-218后MTT实验和侵袭实验检测乳腺癌细胞增殖和侵袭能力变化;过表达SNX4后MTT实验和侵袭实验检测SNX4对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的恢复水平;裸鼠体外成瘤实验检测miR-218对乳腺癌细胞株成瘤能力的影响。结果:miR-218在乳腺癌组织和MCF-7细胞株中表达水平较高,miR-218的表达与乳腺癌的病理分期相关以及淋巴结转移情况有关,SNX4可能是miR-218下游的作用靶点;过表达miR-21可以抑制乳腺癌细胞的增殖侵袭能力,过表达SNX4后可以逆转miR-218对乳腺癌细胞的抑制作用,过表达miR-218后可以抑制乳腺癌细胞株在裸鼠体内的成瘤能力。结论:miR-218在乳腺癌中表达上调,同时miR-218可以调控SNX4的表达而影响乳腺癌细胞增殖和侵袭能力。
- 张建波宋魏王媛媛刘明阁孙淼淼
- 关键词：乳腺癌MIR-218
- 乳腺癌患者TCR BV、BJ限制性取用及序列分析
- 2014年
- 目的 分析乳腺癌TCR BV、BJ亚家族限制性取用及序列分析.方法 选取乳腺癌转移淋巴结,提取RNA后反转录,多重PCR扩增TCR β全长序列,构建重组质粒并测序,利用网上TCR资源分析序列.结果 2例患者共获得5个TCR β链全长序列.BV亚家族分别限制性取用BV 2、BV 14、BV29S1,BJ亚家族分别限制性取用BJ1S1、BJ2S2、BJ2S3、BJ2S5.序列分析增生T细胞克隆CDR3区有不同的氨基酸序列.结论 乳腺癌患者TCR BV、BJ亚家族具有限制性取用,不同T细胞克隆的CDR3序列不同.
- 张建波吕晓东于庆凯宋永平胡骏
- 关键词：多重聚合酶链反应互补决定区
- 鸟氨酸脱羧酶基因沉默对子宫内膜癌细胞Ishikawa的影响
- 2012年
- 目的利用RNA干扰技术,观察鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)基因在子宫内膜癌Ishikawa细胞的沉默效应及对Ishikawa细胞增殖周期的影响。方法设计合成以鸟氨酸脱羧酶基因为靶向目标的siRNA序列质粒,利用脂质体介导的方法将质粒转染至子宫内膜癌Ishikawa细胞,实验分三组:Ishikawa组,pSUPER-EGFP组,pSUPER-EGFP-ODC组。用Real-time PCR和Western blot检测ODC的表达情况。采用MTT和流式细胞术来检测ODC基因沉默对Ishikawa细胞生长的影响。结果 Real-time PCR和Western显示pSUPER-EGFP-ODC组细胞ODC mRNA和蛋白质表达水平明显下降。MTT示pSUPER-EGFP-ODC能显著抑制Ishikawa细胞的增殖活性,与Ishikawa相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。流式细胞术结果示pSUPER-EGFP-ODC能显著阻滞Ishikawa细胞于G0/G1期,S期细胞数相应减少,并诱导细胞凋亡,与Ishikawa相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论转染靶向ODC基因的siRNA序列质粒能够下调ODC基因的表达,抑制人子宫内膜癌细胞Ishikawa在体外的增殖,阻滞Ishikawa细胞于G0/G1期并诱导细胞凋亡。
- 楚广民张建波陈小兵刘红亮
- 关键词：鸟氨酸脱羧酶基因沉默子宫内膜癌ISHIKAWA
- miR-133通过Notch1信号通路调控BCAR4对乳腺癌迁移和侵袭的影响被引量：6
- 2017年
- 目的:探讨微小核糖核酸-133(mi R-133)调控乳腺癌雌激素耐受基因4(breast cancer anti-estrogen resistance 4,BCAR4)对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响及其机制。方法:采集2006年1至12月在郑州大学附属肿瘤医院接受手术切除治疗的80例乳腺癌患者的乳腺癌和相应癌旁组织。RT-PCR检测乳腺癌和癌旁组织BCAR4和mi R-133的表达;双荧光素酶检测BCAR4和mi R-133之间的关联;划痕实验和Transwell实验分别检测沉默BCAR4或沉默BCAR4和mi R-133后乳腺癌MCF-7细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting检测Notch1信号通路相关蛋白的表达;裸鼠皮下成瘤实验检测沉默BCAR4对MCF-7细胞成瘤能力的影响;生物统计学分析BCAR4表达和乳腺癌患者临床病理参数及生存率的关系。结果:乳腺癌组织中BCAR4表达显著高于癌旁组织(P<0.05);双荧光素酶实验显示BCAR4可以调控mi R-133的表达;沉默BCAR4表达可以抑制乳腺癌MCF-7细胞的迁移和侵袭;沉默mi R-133和BCAR4表达的MCF-7细胞的迁移率和穿膜细胞数显著高于仅沉默BCAR4表达的MCF-7细胞[迁移率(92.31±8.64)%vs(52.61±5.12)%,P<0.05;穿膜细胞数:(171.38±12.61)vs(28.54±3.29),P<0.01],抑制mi R-133可以逆转BCAR4抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移、侵袭能力;沉默BCAR4组裸鼠成瘤的体积和质量都显著减小;沉默BCAR4的MCF-7细胞的Notch1通路相关蛋白表达水平明显下调;BCAR4表达与乳腺癌的病理分期及淋巴结转移显著相关,BCAR4高表达患者生存率较BCAR4低表达患者低。结论:乳腺癌MCF-7细胞的侵袭和迁移受到BCAR4和mi R-133的双重调控,mi R-133可能通过Notch1信号通路调节BCAR4对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响,可为乳腺癌分子靶向治疗及乳腺癌耐药机制的研究提供思路。
- 张建波宋魏王媛媛刘明阁孙淼淼
- 关键词：乳腺癌
- 外周T细胞淋巴瘤非特指型TCRβ V/J取用及CDR3谱型分析被引量：1
- 2014年
- 目的 分析外周T细胞淋巴瘤非特指型TCR β V/J亚家族限制性取用及CDR3谱型.方法 提取4例外周T细胞淋巴瘤非特指型患者病变淋巴结总RNA后进行反转录,多重聚合酶链反应（PCR）扩增TCRβ全长序列,构建重组质粒并测序,利用网上TCR资源分析序列.结果4例患者共获得9个TCR β链全长序列.克隆性增生T细胞V、J亚家族分别限制性取用BV2、BV4S2、BV14、BV29S1和BJ1S4、BJ2S3、BJ2S5、BJ2S7,并具有不同的CDR3区氨基酸序列.结论外周T细胞淋巴瘤非特指型TCRV β、VJ亚家族具有限制性取用,不同T细胞克隆的CDR3序列不同.
- 张建波宋永平于庆凯吕晓东胡骏
- 关键词：T细胞淋巴瘤多重PCR互补决定区
- 乳腺癌T细胞受体α链全长编码序列多重PCR扩增方法的建立
- 2014年
- 目的:建立乳腺癌克隆性T细胞TCRα链全长编码序列(CDS)的多重PCR扩增方法。方法:根据Gen Bank现有TCR序列设计扩增TCRα链32个亚家族上游引物35条,下游引物2条。对Mg2+、d NTPs和引物浓度比例以及退火温度进行优化,确定最佳反应体系进行TCRα链多重PCR扩增,构建重组质粒并酶切鉴定。结果:扩增出乳腺癌转移淋巴结中的TCRα链全长编码序列并构建重组质粒,5例患者共获得23个阳性克隆。结论:建立的TCRα链多重PCR扩增方法具有特异、快速、简便的特点,可为研究乳腺癌克隆性T细胞提供帮助。
- 张建波吕晓东楚广民宋魏冯稳刘明阁于庆凯
- 关键词：T细胞受体多重PCR质粒
- 糖尿病足患者多药耐药菌感染的危险因素logistic回归分析被引量：19
- 2017年
- 目的探讨糖尿病足患者多药耐药菌感染的危险因素,为制定临床防治措施提供理论依据。方法回顾性分析医院2014年1月-2016年6月收治192例糖尿病足患者的临床资料,分析多药耐药菌的分布情况,对比患者的各项临床资料,并通过多因素logistic回归分析,探讨糖尿病足患者多药耐药菌感染的危险因素。结果 61例患者发生多药耐药菌感染,感染率为31.77%;93株多药耐药菌中,检出金黄色葡萄球菌41株(44.09%),检出铜绿假单胞菌20株(21.51%);使用抗菌药物、第三代头孢菌素类抗菌药物、有神经缺血性伤口、同一溃疡面住院>2次、发生骨髓炎的多药耐药感染率均显著高于无使用抗菌药物、无使用第三代头孢菌素类抗菌药物、无神经缺血性伤口、同一溃疡面住院≤2次、未发生骨髓炎的多药耐药感染率,差异有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归分析显示,使用抗菌药物、有神经缺血性伤口、同一溃疡面住院>2次以及骨髓炎是糖尿病足患者多药耐药菌感染的危险因素(P<0.05)。结论糖尿病足发生多药耐药菌感染的风险较高,临床应针对发生多药耐药菌感染的危险因素,制定有效的防治措施,以提高疾病的诊疗效果,改善患者预后。
- 杨雪孙晓菲范慧洁崔国敏于江红董其娟
- 关键词：糖尿病足多药耐药菌
- 多重PCR扩增乳腺癌克隆性T细胞TCRβ链全长序列
- 2014年
- 目的建立乳腺癌克隆性T细胞TCRβ链全长编码序列(CDS)的多重PCR扩增方法。方法根据Gen Bank现有TCR序列设计扩增TCRβ链24个亚家族上游引物24条,下游引物2条。对Mg2+、d NTPs和引物浓度比例以及退火温度进行优化,确定最佳反应体系进行TCRβ链多重PCR扩增,构建重组质粒并酶切鉴定。结果扩增出乳腺癌转移淋巴结中的TCRβ链全长编码序列并成功构建重组质粒,5例患者共获得24个阳性克隆。结论建立的TCRβ链多重PCR扩增方法具有特异、快速、简便的特点,为研究乳腺癌克隆性T细胞的特点提供了帮助。
- 张建波吕晓东楚广民宋巍刘明阁于庆凯
- 关键词：T细胞受体多重PCR质粒
- 乳腺癌淋巴结微转移患者克隆性T细胞TCRα链CDR3谱型分析被引量：1
- 2015年
- 目的分析乳腺癌微转移淋巴结T细胞克隆性增生及TCRα链谱型偏移情况,了解抗肿瘤T细胞克隆的分子特征。方法利用RT-PCR扩增10例乳腺癌微转移淋巴结T细胞32个TCR可变区(AV)亚家族的基因,基因扫描检测T细胞克隆性及TCR AV亚家族取用情况,对单克隆家族行PCR扩增TCRα链全长序列,构建重组质粒后测序,分析互补决定区(CDR3)序列。结果乳腺癌淋巴结微转移患者T细胞呈单、寡克隆、寡克隆趋势和多克隆增生,不同患者表达1~4个TCR AV亚家族。克隆性T细胞的CDR3氨基酸序列不同,但是病例4和病例8含有相同的CDR3氨基酸基序:AM和DDKII。结论乳腺癌TCR AV基因表达具有多样性特点,TCR AV家族的取用可能与乳腺癌肿瘤抗原的多样性和不同个体的免疫应答反应有关。相同CDR3氨基酸基序的发现可能对乳腺癌的T细胞介导免疫治疗提供帮助。
- 张建波吕晓东宋魏于庆凯刘明阁胡骏房百俊
- 关键词：T细胞受体基因扫描
