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瑞香素调控DJ-1表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响
2024年
目的探讨中药活性成分瑞香素调控DJ-1表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响。方法以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,CCK-8法分析瑞香素对Ishikawa细胞增殖的影响,qRT-PCR检测瑞香素对Ishikawa细胞DJ-1 mRNA表达,流式细胞术检测瑞香素对Ishikawa细胞凋亡的影响。结果不同浓度瑞香素处理Ishikawa细胞后,细胞增殖抑制率较对照组明显增加,且呈现时间-浓度依赖性,瑞香素处理Ishikawa细胞48 h,抑制率IC50值为78μmol/L;与对照组相比,78μmol/L瑞香素处理Ishikawa细胞48 h,其DJ-1mRNA表达量明显降低(P<0.05),同时早期凋亡率(P<0.01)和晚期凋亡率(P<0.05)均明显升高。结论瑞香素可通过降调DJ-1的表达促进子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,并呈剂量依赖关系。
龙生根章志琴朱其舟肖仲清舒宽勇
关键词:瑞香素ISHIKAWA细胞DJ-1细胞凋亡
LncRNA MEG3过表达对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和EMT的影响
2024年
目的研究LncRNA MEG3过表达对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法将Ishikawa细胞分为Control组(无转染)、Len-nc组(转染慢病毒空载体)和Len-MEG3组(转染LncRNA MEG3过表达慢病毒),采用qRT-PCR检测各组Ishikawa细胞中LncRNA MEG3、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和ZEB1的表达水平,通过细胞划痕实验测定各组的迁移能力。细胞的增殖能力通过克隆实验和CCK8进行测定。采用流式细胞术测定细胞凋亡情况。Western blot检测EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、ZEB1的表达量变化。结果Len-MEG3组与Control组、Len-nc组比较,Len-MEG3组中LncRNA MEG3的表达水平增加(P<0.05),引起细胞的迁移和增殖能力下降,提高细胞凋亡能力,同时上调了E-cadherin mRNA和蛋白的表达以及下调N-cadherin、Vimentin和ZEB1 mRNA和蛋白的表达。结论人子宫内膜癌Ishikawa细胞中LncRNA MEG3过表达可以抑制细胞的增殖、迁移和EMT,并促进细胞凋亡。
周丽娜杨彩虹刘瑞宋琳琳张雪玉
关键词:子宫内膜癌上皮间质转化
Dioscin from Polygonatum sibiricum induces apoptosis and autophagy in Ishikawa human endometrial cancer cell and in vivo
2024年
With an aim to comprehend the precise regulatory mechanism of dioscin against endometrial carcinoma(EC), we firstly extracted the components from Polygonatum sibiricum followed by identification and structural characterization. The anti-EC activity of dioscin was initially determined based on the inhibition of Ishikawa cell proliferation and tumor growth. The high-throughput sequencing data indicated that dioscin not only promoted apoptosis, including decrease of poly ADP-ribose polymerase(PARP) and B-cell lymphoma-2(Bcl-2) and increase of c-PARP and Bcl-2-associcated agonist of cell death(Bad), but also induced autophagy, including increase of autophagic lysosomes and LC3Ⅱ/LC3Ⅰ ratio. Mechanistic exploration suggested that dioscin induced autophagy and apoptosis through inhibition of PI3K/AKT/mTOR signaling pathway. Besides, the dioscin-regulated p53 pathway was mainly involved in autophagy induction. Furthermore, inhibition of Ishikawa cell autophagy was linked to dioscin-induced apoptosis. Our data suggest the immense potential of dioscin for the development of functional food for EC and related medical application.
Xiaoli LiRunhui MaZhijing NiWei WangKiran ThakurJianguo ZhangZhaojun Wei
关键词:DIOSCINAPOPTOSISAUTOPHAGY
穿心莲内酯通过抑制Fas/FasL信号轴降低子宫内膜癌Ishikawa/DPP细胞对顺铂的耐药性
2024年
目的:探讨穿心莲内酯(Andro)调节脂肪酸合成酶(Fas)/脂肪酸合成酶配体(FasL)信号轴对子宫内膜癌Ishikawa细胞顺铂(DDP)耐药性的影响。方法:采用0、5、10、20μg/mL DDP分别处理Ishikawa细胞和顺铂耐药的Ishikawa/DPP细胞,0、5、10、25、50μmol/L Andro处理Ishikawa/DDP细胞,MTT法检测细胞增殖情况并为后续实验选择合适的给药剂量。将Ishikawa/DDP细胞随机分为对照组、DDP组(DDP干预)、Andro组(DDP、Andro干预)、pcDNA3.1-NC组(转染pcDNA3.1+DDP、Andro干预)、pcDNA3.1-Fas/FasL组(转染pcDNA3.1-Fas/FasL+DDP、Andro干预),24 h后,采用qPCR法检测Fas、FasL mRNA的表达,平板克隆形成实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞克隆能力、细胞迁移与侵袭和细胞凋亡,WB法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、BAX、Bcl-2、MMP-2、PD-L1、多药耐药蛋白-1(MDR-1)及Fas、FasL蛋白表达。结果:DDP以剂量依赖的方式抑制Ishikawa和Ishikawa/DPP细胞增殖,并且与Ishikawa细胞比较,Ishikawa/DPP细胞对DDP的敏感性更低(均P<0.05);Andro以剂量依赖性的方式抑制Ishikawa/DPP细胞的增殖(均P<0.05)。Ishikawa/DPP细胞中Fas、FasL的表达水平均高于Ishikawa细胞(均P<0.05)。选取20μg/mL DDP和25μmol/L Andro为干预剂量,干预时间24h。与对照组比较,DDP组Ishikawa/DPP细胞中PD-L1、MDR-1、Fas、FasL mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而克隆形成率、迁移与侵袭细胞数、凋亡率差异均无统计学意义(均P>0.05);与DDP组比较,Andro组Ishikawa/DPP细胞中Fas、FasL mRNA表达水平、细胞克隆形成率、迁移与侵袭细胞数、PCNA、Bcl-2、MMP-2、PD-L1、MDR-1、Fas、FasL蛋白表达水平显著降低,BAX蛋白表达水平及凋亡率显著升高(P<0.05或P<0.01),pcDNA3.1-NC组与Andro组类似;与pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-Fas/FasL组Ishikawa/DPP细胞上述指标变化均被逆转(P<0.05)。结论:Andro可能通过抑制Fas/FasL信号轴来抑制Ishikawa/DPP细胞增殖、迁移与侵袭,促进凋亡,�
姚素环史利锋李淑芳董素霞陈萍
关键词:穿心莲内酯子宫内膜癌顺铂
补肾调肝周期疗法及组方含药血清对Ishikawa细胞miR⁃140⁃5p/VEGF信号通路的影响
2024年
目的研究补肾调肝周期疗法及组方对Ishikawa细胞增殖、分泌及miR-140-5p/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的影响。方法制备各组含药血清及空白血清,运用慢病毒转染构建miR-140-5P稳定过表达的Ishikawa细胞株,将细胞分为阴性对照组(转染miR-140-5p NC+空白血清)、过表达组(转染miR-140-5p siRNA+空白血清)、阳性对照组(转染miR-140-5p siRNA+阿司匹林含药血清)、逍遥散组(转染miR-140-5p siRNA+逍遥散含药血清)、三子养膜汤组(转染miR-140-5p siRNA+三子养膜汤含药血清)、补肾调肝周期疗法组(转染miR-140-5p siRNA+周期疗法含药血清)。倒置荧光显微镜观察转染效率;ELISA法检测细胞培养液上清E_(2)、P水平;流式细胞仪测定细胞周期分布;CCK-8法检测细胞增殖效率;Western blot法检测细胞VEGF、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)蛋白表达;RT-qPCR法检测细胞miR-140-5p、VEGF、ER、PR mRNA表达。结果成功构建miR-140-5p稳定过表达的Ishikawa细胞系。miR-140-5p过表达会抑制Ishikawa细胞E_(2)、P的分泌(P<0.01),使Ishikawa细胞发生G 2/M期阻滞(P<0.01),抑制Ishikawa细胞的增殖(P<0.01)和VEGF、ER、PR mRNA表达(P<0.01);而各组含药血清均能降低Ishikawa细胞miR-140-5p表达(P<0.01),促进E_(2)、P的分泌(P<0.01),使细胞周期基本恢复正常(P<0.05,P<0.01),促进细胞增殖(P<0.01),升高VEGF mRNA表达(P<0.01);阿司匹林、逍遥散、三子养膜汤含药血清均能升高ER、PR mRNA表达(P<0.05,P<0.01);补肾调肝周期疗法含药血清能升高ER mRNA表达(P<0.01)。结论miR-140-5p过表达会损伤子宫内膜容受性,可能是子宫内膜容受性的关键调控因子,补肾调肝周期疗法及组方可能通过介导miR-140-5p/VEGF,靶向上调VEGF、ER、PR基因的表达,从而促进子宫内膜细胞增殖、改善子宫内膜细胞内分泌及局部血运以提升子宫内膜容受性。
王茜何忆清刘泉张颖杨硕
关键词:子宫内膜容受性ISHIKAWA细胞
基于石川图与多元logistic回归分析的急危重症患者抢救室滞留时间控制研究
2024年
分析影响急危重症患者在抢救室滞留时间的关键因素,进一步提出并验证针对这些因素的干预策略。选取2022年7月—2023年4月入抢救室的患者共1299例为研究对象。应用石川图从多维度(如人员、设备、环境等)进行定性分析,并通过量表调查进行定量分析。数据经过单因素分析和多元logistic回归分析。结果显示,石川图分析揭示了患者经济问题、设备不便、缺乏临床路径、人性化沟通缺失等为主要影响因素。单因素和多元logistic回归分析进一步确认了满员情况、等待床位、沟通障碍等为关键影响因素。研究发现,本研究成功地识别了影响急危重症患者抢救室滞留时间的多个关键因素,并通过综合干预策略有效地缩短了滞留时间,提高了患者满意度,有助于优化急危重症医疗服务,提高患者治疗效果和生存质量。
梁雪芳
关键词:急危重症干预策略
miR-762对子宫内膜癌Ishikawa细胞放疗敏感性的影响及机制研究被引量:3
2023年
目的:分析miR-762在子宫内膜癌(EC)患者癌组织中的表达水平及其对子宫内膜癌Ishikawa细胞放疗敏感性的影响及机制研究。方法:qRT-PCR检测54例EC癌组织和癌旁组织以及正常子宫内膜细胞ESC和EC细胞系中miR-762及腺瘤性结肠息肉2(APC2)mRNA表达水平。不同放射剂量处理Ishikawa细胞,qRT-PCR检测miR-762和APC2 mRNA表达水平。将Ishikawa细胞分为空白对照组(blank组)、Lv-NC组(感染miR-762 sponge阴性对照慢病毒),Lv-miR-762 SP组(感染miR-762 sponge慢病毒)、Lv-miR-762 SP+si-NC组和Lv-miR-762 SP+si-APC2组。qRT-PCR和Western blot检测miR-762和APC2表达水平。双荧光素酶报告基因实验检测miR-762和APC2的靶向关系。采用6 Gy射线照射各组Ishikawa细胞,克隆形成实验检测细胞放射敏感性;CCK-8检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中CyclinD1、p21、Bcl-2和Bax等蛋白表达水平。结果:在EC癌组织及细胞系中miR-762高表达,而APC2低表达。随着射线照射剂量的增加,Ishikawa细胞中miR-762表达水平逐渐升高(P<0.05),APC2 mRNA表达水平逐渐降低(P<0.05),呈剂量依赖性。双荧光素酶报告基因实验证实,APC2是miR-762靶基因。抑制miR-762可明显下调miR-762表达水平,上调APC2表达水平,增强细胞放射敏感性,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,并下调CyclinD1和Bcl-2蛋白表达水平,上调p21和Bax蛋白表达水平(P<0.05)。此外,干扰APC2基因可显著逆转抑制miR-762表达对Ishikawa细胞放射敏感性的促进作用。结论:miR-762在EC癌组织及细胞系中高表达,抑制其表达可通过上调APC2表达从而增强Ishikawa细胞的放射敏感性。
李儒彩潘英连蔡兴锐郭丽娟
关键词:子宫内膜癌凋亡
带误差项的广义Halpern-Ishikawa型迭代序列的强收敛定理
2023年
在实Banach空间中,为证明Φ-伪压缩映象不动点的迭代强收敛性,引进了带误差项的广义Halpern-Ishikawa型迭代算法,并利用所设计的迭代算法,证明了Φ-伪压缩映象不动点的一个新的强收敛定理。从而完善了带误差项的广义Halpern-Ishikawa型迭代算法的研究。
王永杰高兴慧房萌凯
关键词:ISHIKAWA迭代序列Φ-伪压缩映象
大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞顺铂耐药株增殖和凋亡及侵袭与迁移的影响被引量:4
2023年
目的探讨大蒜素对子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞株Ishikawa/DDP生物学行为的影响。方法建立子宫内膜癌DDP耐药细胞株,设对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组,通过细胞计数实验(CCK8)、Transwell实验、划痕实验、流式细胞术检测各组细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡,采用RT-qPCR实验、蛋白质印迹实验分别检测各组细胞中多药耐药基因1(MDR1)mRNA、P-gp蛋白表达水平。结果低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组细胞增殖抑制率分别为(20.92±3.28)%、(31.71±2.82)%和(47.34±3.43)%,随着大蒜素浓度增加,细胞增殖抑制率上升,差异有统计学意义,F=346.231,P=0.007。Transwell实验表明,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组侵袭细胞数分别为(314.00±7.53)、(278.00±6.52)、(203.00±5.46)、(109.00±5.32)和(65.00±3.41)个,随着大蒜素浓度增加,细胞侵袭力下降,差异有统计学意义,F=437.807,P=0.009。对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组48 h划痕宽度相对比例分别为(31.48±9.28)%、(33.76±7.43)%、(42.76±5.34)%、(53.56±7.45)%和(64.431±8.32)%,随着大蒜素浓度增加,细胞迁移能力下降,差异有统计学意义,F=345.126,P=0.005。流式细胞术结果表明,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组细胞凋亡率分别为(11.32±1.13)%、(13.51±0.83)%、(21.30±1.56)%、(37.64±2.21)%和(51.31±2.42)%,随着大蒜素浓度增加,细胞凋亡率显著提高,组间均值差异有统计学意义,F=423.012,P=0.008。RT-qPCR结果显示,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组MDR
汪晶李新周筠黄金玲洪莉
关键词:子宫内膜癌大蒜素多药耐药基因1P-糖蛋白
红景天苷对高糖活化Ishikawa细胞株的抑制作用
目的糖尿病是子宫内膜癌的独立危险因素。本研究拟探讨高浓度葡萄糖对Ishikawa子宫内膜癌细胞株迁移、浸润及存活的影响,探讨红景天苷的抑制作用及信号通路。方法大数据分析AMPK/mTOR信号通路在子宫内膜癌组织中的表达变...
雷雨
关键词:红景天苷高糖ISHIKAWA细胞子宫内膜癌

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