国家自然科学基金(30771345)
- 作品数：11 被引量：45H指数：5
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- 小麦-黑麦大穗型衍生后代的分子细胞学鉴定
- 2009年
- 为创制大穗型小麦种质材料,利用具有大穗多小穗性状的小麦-黑麦双二倍体材料"兰小黑"和普通小麦杂交得到一批大穗型衍生后代。综合采用基因组原位杂交(GISH)、SCAR标记、微卫星(SSR)和醇溶蛋白(A-PAGE)技术对这些大穗型后代中的8个单株进行分子细胞学鉴定。结果表明,GISH检测后代含2个外源信号;1RS特异SCAR标记检测后代均含有黑麦1.5 kb的1RS特征条带;醇溶蛋白检测后代都出现了黑麦碱基因Sec-1特征条带。筛选小麦21条染色体长短臂上各6对引物,结果发现只有1BS上的3对引物未扩增出1BS的条带,其余引物均扩增出了各自的相应条带。由此确定这8株小麦-黑麦大穗型衍生后代为1BL/1RS易位材料。
- 杜万里武军赵继新刘淑会杨群慧庞玉辉陈林刚陈新宏
- 关键词：小麦基因组原位杂交SCAR标记
- 滨麦低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因的分离与序列分析被引量：2
- 2011年
- 采用PCR方法,从滨麦(Leymus mollis)基因组中分离出8条LMW-GS基因序列。核苷酸序列分析表明,序列GQ169791在起始密码子上游包含318 bp的启动子序列,该序列包含-300元件、GCN4 motif、种子贮藏蛋白盒等基因特异表达的顺式或反式作用调控元件。推导的氨基酸序列分析表明,8条序列的编码区依次有信号肽,N-末端区,中部重复区和C-末端Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区等典型LMW-GS多肽一级结构特征;序列HQ416909、HQ416914和HQ416915具有单一完整的开放阅读框(ORF);序列GQ169791、HQ416910、HQ416911、HQ416912和HQ416913在中部重复区和C-末端区出现了4个或5个提前终止密码子,推断其为假基因。8条序列都含有8个或9个半胱氨酸残基(C),N-末端区起始氨基酸序列为METSRIPG-或METTRIPG-,推断其为LMW-m型LMW-GS基因。系统进化分析表明,8条序列与华山新麦草(Psathyrostachys huashanica)LMW-GS基因(HM475146,GQ223386)和野大麦(Hordeum brevisubulatum)的B-hordein基因(AY695368)具有相对较近的同源关系。该研究为挖掘利用滨麦LMW-GS的基因提供了理论依据,对小麦品质改良具有一定参考价值。
- 赵继新周博庞玉辉王玉卿武军陈新宏程雪妮刘淑会傅杰
- 华山新麦草α-醇溶蛋白基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2011年
- 【目的】克隆华山新麦草(Psathyrostachys huashanica)的α-醇溶蛋白基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】采用同源克隆法从华山新麦草基因组DNA中分离克隆出α-醇溶蛋白基因并进行序列分析,将克隆的华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5克隆到表达载体pET-28a(+)上,获得重组质粒pET28a-Gli-Ns转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达。【结果】从华山新麦草基因组DNA中克隆了4个α-醇溶蛋白基因:Gli-Ns-2(FJ713595)、Gli-Ns-3(GQ139525)、Gli-Ns-4(GQ139526)和Gli-Ns-5(GQ139527)。序列分析表明,4条序列具有α-醇溶蛋白的典型结构特征,含有8个或9个半胱氨酸残基,序列FJ713595为假基因。利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核系统中特异性表达。Western-blot证实融合蛋白可成功表达。【结论】克隆了4个华山新麦草的α-醇溶蛋白基因序列,基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核表达系统中成功表达,为小麦品质改良提供了新的候选基因。
- 王玉卿赵继新庞玉辉降彦苗陈新宏武军刘淑会
- 关键词：华山新麦草基因克隆原核表达
- 滨麦HMW-GS启动子和编码区基因的分离与序列分析被引量：2
- 2011年
- 为了深入了解滨麦(Leymus mollis)HMW-GS基因的结构特征,采用PCR方法,从滨麦基因组中分离出HMW-GS基因启动子序列(Genbank登录号:FJ600498)和编码区序列(Genbank登录号:GQ169797)。启动子序列(FJ600498)从5′至3′方向依次有E-box、N-box、G-box、HMW谷蛋白特异增强子和TATA-box等麦谷蛋白特异调控元件,推断其为滨麦HMW-GS启动子基因。编码区序列(GQ169797)具有单一完整的开放阅读框(ORF),编码396个氨基酸残基,依次包含信号肽、N-末端区、中部重复区和C-末端区等HMW-GS的典型结构区域;中部重复区主要重复单元为6肽(PQQGQQ)和9肽(GYYPTSPQQ);有6个半胱氨酸残基(Cys),分布在N-末端区(5个)和C-末端区(1个),第3、4个相邻。推断其为滨麦的y-型HMW-GS编码区基因。系统进化分析表明,启动子序列(FJ600498)与异形花草(He.piliferum)和冰草(Ag.cristatum)的HMW-GS启动子基因序列具有相对较近的同源关系;编码区序列(GQ169797)与纤毛鹅观草(Elymus ciliaris)和披碱草(E.glaucus)的HMW-GS编码区基因序列具有相对较近的同源关系。
- 周博陈新宏庞玉辉赵继新武军程雪妮刘淑会
- 关键词：HMW-GS启动子编码区
- 陕西关中地区部分小麦新品种(系)的HMW-GS组成分析被引量：6
- 2008年
- 为了解陕西省小麦新品种（系）的HMW-GS组成情况及优质亚基的分布特点，为陕西省小麦品质改良提供参考，利用SDS-PAGE电泳技术对参加陕西省2006～2007年度小麦品种区域试验和预备试验的60份小麦新品种（系）的HMW-GS组成及其品质得分进行了分析。结果表明，在参试的60份小麦新品种（系）中，共出现了13种亚基和16种亚基组合类型。Glu-A1位点的1（60．0％）和Null（36．7％）亚基、Glu-B1位点的7＋8（38．3％）、7＋9（41．6％）亚基和Glu-D1位点的2＋12亚基（73．3％）是主要亚基；优质亚基14＋15和5＋10的出现频率分别为13．4％和20．0％；亚基组合Null／7＋8／2＋12和1／7＋9／2＋12为主要组合类型，其频率都为18．3％，优质亚基组合1／14＋15／5＋10的出现频率仅为3．3％；出现了一些携带17＋18、6＋8和20等稀有亚基和少见的亚基组合（如1／6＋8／5＋10、1／20／5＋10和Null／7＋9／3＋12等）类型的材料。参试材料的HMW-GS品质评分平均7．1分，8分以上的材料有23个，占总材料数的38．3％。说明陕西省近年新育成的小麦新品种（系）Glu-1位点的遗传基础有所改善，但仍不太理想。在品质育种上，应加强优质亚基种质材料的引进、筛选与利用，同时加强优质亚基的聚合育种。
- 程雪妮赵继新乔森涛武军刘淑会杨群慧陈新宏杨晓玲
- 关键词：小麦高分子量谷蛋白亚基
- 普通小麦-华山新麦草1Ns二体异附加系的农艺性状和品质被引量：11
- 2010年
- 对新培育的普通小麦-华山新麦草1Ns二体异附加系H9021-28-5的农艺性状、面粉加工品质和籽粒矿物质元素含量考察和测定表明,与亲本7182相比,异附加系H9021-28-5的株高、分蘖数、穗粒数、小穗数和结实率等性状值显著降低,籽粒重量和粒径等性状值显著升高,条锈病抗性增强;沉降值、稳定时间、弱化度、拉伸曲线面积等品质指标得到显著改善,籽粒中镁、铜、锌、钼等元素的含量显著提高。华山新麦草1Ns染色体对小麦部分农艺性状、面粉加工品质指标和矿物质元素含量具有正向效应。
- 赵继新武军程雪妮董剑陈新宏刘淑会杜万里庞玉辉杨群慧吉万全傅杰
- 关键词：普通小麦华山新麦草异附加系农艺性状
- 小麦SSR和EST-SSR引物对无芒雀麦的通用性分析被引量：11
- 2014年
- 无芒雀麦(Bromus inermis Leyss.)具有营养价值高、产量大、利用季节长、耐寒耐旱、适应性强等优良品质。为了解小麦SSR和EST-SSR引物在亲缘植物无芒雀麦中的通用性,本研究选用位于普通小麦7个部分同源群的203对SSR引物和46对EST-SSR引物对无芒雀麦基因组DNA进行了扩增。结果显示:有137对(67.49%)SSR和30对(65.22%)EST-SSR引物对无芒雀麦可以有效扩增,平均扩增条带数分别为2.8和2.5,即小麦SSR和EST-SSR引物在无芒雀麦中具有较高的通用性;研究还发现,来自小麦B基因组和第5同源群染色体的引物在无芒雀麦中的有效扩增比率和平均扩增条带数最低。据此推断,小麦B基因组和第5同源群染色体可能与无芒雀麦基因组的亲缘关系较远。该研究对开发无芒雀麦基因组的特异分子标记、进行遗传多样性分析和功能基因定位等具有一定的参考价值。
- 程雪妮王颖庞玉辉陈新宏武军赵继新
- 关键词：无芒雀麦小麦SSREST-SSR
- 几种小麦族亲缘植物麦谷蛋白和醇溶蛋白研究被引量：8
- 2008年
- 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）技术，对近年收集到的几种小麦亲缘植物的麦谷蛋白和醇溶蛋白进行了研究。麦谷蛋白的SDS—PAGE电泳结果表明：在高分子量区，2种披碱草、旱麦草、华山新麦草、大赖草、簇毛麦、节节麦、黑麦都有HMw—GS条带存在；拟鹅观草、纤毛鹅观草、无芒雀麦、二棱大麦和燕麦没有HMW—GS条带。在低分子量区，除无芒雀麦、纤毛鹅观草和黑麦没有LMW—GS条带以外，其它亲缘植物都有1～7条LMW—GS条带；醇溶蛋白的A—PAGE电泳结果表明：20份材料共分离出28条醇溶蛋白带纹，其醇溶蛋白多态性达100％，表明所分析的材料问具有丰富的醇溶蛋白遗传多样性。对20份材料的遗传距离进行聚类分析，其遗传距离在0．27～0．72之间，在遗传距离为0．61时，所有材料被聚为6类，其中普通小麦品种中国春、纤毛鹅观草和黑麦分别单独成类，纤毛鹅观草和黑麦与其它小麦及其亲缘植物具有较远的亲缘关系，无芒雀麦与簇毛麦之间、拟鹅观草和披碱草之间、旱麦草与大麦之间具有相对较近的亲缘关系。
- 赵继新武军陈新宏程雪妮董剑刘淑会杨群慧朱建楚
- 关键词：小麦麦谷蛋白醇溶蛋白
- 簇毛麦HMW-GS及其启动子基因的克隆与序列分析被引量：5
- 2009年
- 利用2对特异引物,从簇毛麦(Dasypyrum villosum)基因组中分离克隆出一个簇毛麦HMW-GS基因VHG-2(GenBank登录号为FJ600492)及其启动子序列VHGp-1(GenBank登录号为FJ600489).VHGp-1序列长度为1099bp,从5′至3′方向依次有E-box、N-box、G-box、HMW谷蛋白特异38bp增强子和TATA-box等典型的HMW-GS基因启动子作用调控元件,说明VHGp-1为簇毛麦HMW-GS的启动子基因.VHG-2序列长度为1572bp,具有单一完整的、可编码498个氨基酸的开放阅读框(ORF),该ORF推导的氨基酸序列结构分析表明,编码区依次包含由21个氨基酸残基组成的信号肽、105个氨基酸残基组成的N-末端区、330个氨基酸残基组成的中部重复区和42个氨基酸残基组成的C-末端区;中部重复区主要重复单元为6肽(PQQGQQ)和9肽(GYYPTSP/LQQ);有6个半胱氨酸残基(Cys),其中5个分布在N-末端区,1个分布在C-末端区,第3、4个相邻.这些特征与报道的y-型HMW-GS多肽结构基本一致,说明VHG-2是簇毛麦的y-型HMW-GS基因.系统进化分析表明,簇毛麦HMW-GS启动子序列(VHGP-1)与智利大麦(H.chilense)H基因组的D-hordein基因、拟鹅观草和阿拉善鹅观草St基因组的HMW-GS基因的启动子具有比较近的同源关系,簇毛麦HMW-GS基因(VHG-2)与冰草、拟鹅观草和中间偃麦草的y-型HMW-GS基因具有较近的同源关系.
- 庞玉辉陈新宏赵继新武军程雪妮刘淑会杨群慧杜万里陈林刚
- 关键词：启动子进化树
- 华山新麦草(Psathyrostachys huashanica)LMW-GS基因的克隆和序列分析
- 2008年
- 为了挖掘和利用华山新麦草(Psathyrostachys huashanicaKeng)的优良基因,应用PCR技术对华山新麦草低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因进行了分子克隆和序列分析。结果表明,华山新麦草LMW-GS基因(HS-LMW-1)长度为866 bp,通过提交NCBI进行同源性比较,HS-LMW-1与小麦属LMW-GS基因序列的同源性在83%以上,其中与Thinopyrum intermedium的LMW-GS基因序列(GenBank登录号:AY214454)相似性达92%,进一步将其翻译为氨基酸序列,分析结果显示它具有小麦属LMW-GS序列的典型特征,具有完整的编码区,能够编码274个氨基酸的成熟蛋白,与小麦属Glu-B3和Glu-D3位点编码的LMW-GS基因有很高的一致性,表明HS-LMW-1基因可能由华山新麦草的Glu-Ns3位点编码。
- 王建伟陈新宏赵继新武军程雪妮刘淑会杨群慧吉万全
- 关键词：华山新麦草克隆
