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水蛭素的HPLC色谱分析条件优化研究被引量：1: 2024年; 为研究水蛭素的HPLC最佳色谱分析条件,通过对比重组水蛭素的HPLC分析方法的洗脱条件、检测波长、色谱柱的分离效果,拟合水蛭素浓度与峰面积的线性方程,优选最佳水蛭素色谱分析条件。结果显示,ODSC18柱分析最佳条件为:采用梯度洗脱,流动相A和B洗脱程序:0~60 min,B:0%~100%,进样量20μL,柱温35℃,流速为1 mL/min,波长205 nm;TSKgelG2000SW柱最佳分析条件为:流动相磷酸缓冲液(0.02 mol/L,pH 7.0),流速0.5 mL/min,检测波长205 nm,进样量20μL。研究表明,水蛭素浓度与峰面积具有良好的直线线性相关关系,采用TSKgelG2000SW色谱柱的分析效果优于ODSC18柱,可为动物活性多肽的分析提供依据。; 黄伟黄伟邓斌陈康陈康杨秀娟; 关键词：水蛭素液相色谱色谱柱色谱条件

载水蛭素聚离子胶束的研究: 2024年; 合成RGD肽修饰的聚(2-乙基-2-噁唑啉)(PEOz)接枝壳聚糖聚离子胶束(RGD-PIC),包载抗凝药物重组水蛭素-2(rHV_(2)),对载药胶束进行药剂学性质、体外释药、抗血栓效果及体内药动学评价。结果表明,RGD-PIC载药胶束的平均粒径为(297.0±23.07)nm,Zeta电位为(-7.36±3.60)mV,包封率为96.66%±0.22%,载药量为6.59%±0.025%;体外释药试验结果表明,载药胶束具有明显的缓释效果;APTT试验结果表明,rHV_(2)-RGD-PIC能显著延长血浆凝固时间。RGD-PIC胶束在抗凝方面大大优于普通胶束,体内循环时间长,可用作rHV_(2)的血小板靶向递送和长循环的载体。; 赵阳光任佩佩杨壮壮张士忠皇甫涵祯杨万成王小宁; 关键词：壳聚糖水蛭素

菲牛蛭水蛭素基因家族种内变异研究: 2024年; 本研究采集7个菲牛蛭种群共70份样品,利用基因组重测序和转录组测序数据,系统分析水蛭素基因在种内水平的变异特征。结果显示,所有水蛭素基因都存在丰富的种内变异,hirudin1和hirudin2变异率较高,hirudin3和hirudin5次之,hirudin4则相对保守。hirudin5存在S型和L型两种长度的转录本,分别具有4个和6个外显子。从选择压力指数(dN/dS)的中位数上看,hirudin2受到强烈正选择(dN/dS=3.288),hirudin5受到微弱正选择(dN/dS=1.110),而其余3个基因整体上受到纯化选择(dN/dS<1)。5个水蛭素基因之间总体表达量差异极显著(P<0.001),其中hirudin2的表达量最高,hirudin1次之,其余3个基因则明显偏低。hirudin2和hirudin5基因的表达量在7个种群间有极显著差异(P<0.01),其余3个基因则未表现出种群之间的差异。本研究结果表明,菲牛蛭5个水蛭素在序列变异、选择压力和基因表达特征上都有巨大差异,为研究水蛭素的进化规律和药物开发提供丰富的遗传资源。; 赵芳唐利洲何波刘子超吴清黄族豪林恭华; 关键词：基因表达

水蛭素对脓毒症大鼠血小板功能的影响: 2024年; 目的研究水蛭素对脓毒症大鼠血小板功能的影响。方法将45只大鼠分为假手术组、模型组和水蛭素组。术后6 h和24 h对三组大鼠进行采血并检测血小板计数、血小板聚集率和P-选择素表达率水平。结果水蛭素组术后6 h血小板计数较模型组下降(P<0.05)。模型组术后24 h血小板计数较水蛭素组和假手术组降低(P<0.05),但假手术组术后24 h血小板计数较水蛭素组明显上升(P<0.05)。模型组术后6 h血小板聚集率较假手术组和水蛭素组升高(P<0.05),而水蛭素组术后6 h血小板聚集率较假手术组明显更高(P<0.05)。假手术组术后24 h血小板聚集率较模型组及水蛭素组明显更高(P<0.05)。水蛭素组术后24 h血小板聚集率较模型组更高(P<0.05)。术后6 h及24 h,模型组P-选择素表达率较假手术组及水蛭素组明显增加(P<0.05)。水蛭素组术后6 h及24 h的P-选择素表达率较假手术组更高(P<0.05)。结论水蛭素能提高脓毒症大鼠的血小板数量,增强聚集功能并下调P-选择素表达水平以发挥抗炎作用。; 龚海林陈明张念清; 关键词：脓毒症水蛭素血小板中医药

水蛭素对糖尿病肾病模型小鼠的作用机制研究: 2024年; 目的本研究旨在探讨水蛭素对糖尿病肾病模型小鼠的治疗作用及机制。方法采用高脂饮食和腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病肾病小鼠模型,将模型小鼠随机分为模型组和水蛭素治疗组。治疗组小鼠给予水蛭素灌胃,连续8周。观察小鼠肾功能指数、尿液指标、炎症因子及炎性蛋白表达水平的变化。结果小鼠造模后,血糖水平显著提高,出现明显肾损伤,说明造模成功。水蛭素治疗后,血尿素氮(BUN)、血清肌酐(CREA)和尿白蛋白与肌酐比值(UACR)水平均显著降低,尿液β2-微球蛋白(β2-MG)和尿肌酐(UCr)水平均显著改善,肾皮质中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和MCP-1的浓度均明显降低。进一步的蛋白印迹实验表明,水蛭素可以显著抑制NLRP3和TLR4蛋白的表达水平。结论水蛭素对糖尿病肾病小鼠有治疗作用,其机制可能与抗炎作用有关。; 谷海林张效丽聂鑫盖辉王瑞; 关键词：水蛭素糖尿病肾病炎性因子链脲霉素

重组水蛭素抗ApoE^(-/-) 小鼠动脉粥样硬化的研究: 2024年; 目的探讨重组水蛭素对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化血脂水平和粥样斑块的影响。方法高脂饲料喂养雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组和重组水蛭素低、中、高剂量给药组,正常饮食的C57BL/6J小鼠作为正常对照组。连续给药8周后,检测血脂水平;HE染色以及Masson染色观察主动脉血管病理学改变;CD68、α-SMA免疫组织化学染色分别观察重组水蛭素对粥样斑块中巨噬细胞浸润和平滑肌肌动蛋白的影响。结果与模型组比较,重组水蛭素各剂量给药组的血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平均有不同程度的降低(P<0.05);各给药组与模型组的高密度脂蛋白胆固醇的差异无统计学意义(P>0.05);Masson染色显示模型组主动脉血管胶原异常增生,而各给药组胶原含量均有不同程度减少;CD68、α-SMA免疫组织化学染色显示,模型组主动脉粥样斑块处有大量CD68表达和少量α-SMA表达,而重组水蛭素各给药组粥样斑块处CD68表达减少(表示巨噬细胞浸润减少)、α-SMA表达增加(P<0.05)。结论重组水蛭素能降低ApoE^(-/-)小鼠血清血脂水平,延缓平滑肌细胞凋亡,抑制血管胶原增生,从而抑制动脉粥样硬化的发展。; 赖宗强赖吴芳韦文兴张晓慧黎渊弘; 关键词：动脉粥样硬化重组水蛭素血脂水平巨噬细胞

水蛭素调节RhoA/ROCK信号通路对脑梗死大鼠神经元细胞凋亡和炎症反应的影响: 2024年; 目的:探讨水蛭素(HRD)调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路对脑梗死大鼠神经元细胞凋亡和炎症反应的影响。方法:将SD大鼠分为Ct组、Model组、低剂量HRD组(HRD-L组,13.33 mg/kg)、高剂量HRD组(HRD-H组,26.66 mg/kg)、阳性对照尼莫地平组(NMDP组,40 mg/kg)、U-46619(RhoA激动剂,0.03 mg/kg)组、HRD-H+U-46619组(26.66 mg/kg+0.03 mg/kg),每组24只。除Ct组外,其他组大鼠均利用改良线栓法构建脑梗死模型,Ct组大鼠仅暴露血管,不进行切口和插线栓。建模成功1 h后,进行给药处理。给药1次/d,持续4周。Zea-Longa法评估大鼠神经功能;干湿重法检测大鼠脑组织含水量;2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTC)染色测定大鼠脑梗死体积;TUNEL染色检测大鼠海马CA1区神经元凋亡;ELISA检测大鼠海马组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平;Western blot检测大鼠海马组织中裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved-Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达。结果:与Ct组比较,Model组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积百分比、神经元凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、Cleaved-Caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高(P<0.05);与Model组比较,HRD-L组、HRD-H组、NMDP组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积百分比、神经元凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、Cleaved-Caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达降低,而U-46619组对应指标变化呈相反趋势(P<0.05);与HRD-H组比较,HRD-H+U-46619组大鼠神经功能评分、脑组织含水量、脑梗死体积百分比、神经元凋亡率、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、Cleaved-Caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达升高(P<0.05)。结论:HRD可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路抑制脑梗死大鼠神经元凋亡及炎症反应。; 那丽莎曲娜于雪栗昭生; 关键词：水蛭素脑梗死炎症细胞凋亡

水蛭素对脓毒症早期大鼠纤溶功能的影响: 2024年; 目的:观察水蛭素对脓毒症早期大鼠纤溶功能的影响。方法:将45只大鼠随机分为假手术组、盲肠结扎组和水蛭素组,每组15只。同时各组均随机抽取10只大鼠用于观察24 h生存情况。术后6 h和12 h时间点取血标本及病理组织,检测抗凝血酶Ⅲ(AntithrombinⅢ,ATⅢ)、纤维蛋白原(Fibrinogen,FIB)、纤溶酶原(Plasminogen,PLG)、纤溶酶抑制剂(Plasmin Inhibitor,PI)、D-二聚体和纤维蛋白原降解产物(Fibrin Degradation Products,FDP)水平。结果:术后24 h,假手术组、模型组和水蛭素组大鼠的存活率分别为100%、40%和80%。与假手术组相比较,盲肠结扎组和水蛭素组大鼠的FIB水平在盲肠结扎穿孔术后12 h明显升高,且水蛭素组大鼠的FIB水平较盲肠结扎组更高(P<0.05)。盲肠结扎组和水蛭素组术后6 h和12 h的ATⅢ较假手术组均明显下降(P<0.05),且盲肠结扎组12 h时的ATⅢ较水蛭素组更低(P<0.05)。盲肠结扎组和水蛭素组大鼠术后12 h的PLG较假手术组明显降低(P<0.05)。与盲肠结扎组相比较,水蛭素组和假手术组大鼠12 h时的PI明显更低(P<0.05)。与盲肠结扎组相比较,假手术组和水蛭素组大鼠的FDP水平均明显更低(P<0.05)。盲肠结扎组大鼠的肠上皮细胞坏死及水肿情况较水蛭素组更重,且炎症细胞浸润更明显。结论:水蛭素可以调节促纤溶及抗纤溶的力量并增强脓毒症早期的抗凝及抗炎作用,从而改善脓毒症早期纤溶功能。; 陈明龚海林胡志华夏冰张念清; 关键词：水蛭素脓毒症纤溶

水蛭素防治脑出血的药理作用研究进展被引量：2: 2024年; 脑出血的发病急、进展迅速、预后较差,成为威胁人类健康的重大疾病之一。水蛭素是从水蛭的唾液腺中分离出来的多肽,可通过抗凝血酶活性、抑制细胞凋亡、减轻氧化应激反应、降低炎症反应、抑制水通道蛋白4的表达、阻止胶质纤维酸性蛋白的上调、抑制血小板反应蛋白表达、调节Na^(+),K^(+)-ATP酶的活性对脑出血发挥防治作用。综述了水蛭素防治脑出血的药理作用研究进展,为水蛭素临床治疗脑出血提供依据。; 孙明燕王怀敏孙明玉刘备; 关键词：水蛭素脑出血水通道蛋白4 胶质纤维酸性蛋白血小板反应蛋白

基于转录组学探讨水蛭素对HK-2细胞的影响机制: 2024年; 目的采用转录组学技术探讨水蛭素对人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)的影响及机制。方法利用CCK-8法检测水蛭素处理之后的HK-2细胞活力,通过转录组学的技术对溶媒对照组和水蛭素组进行转录组测序;通过RSEM的方法计算不同样品中的基因表达水平,差异基因的筛选采用DEseq2方法,筛选标准为|log2FC值|≥1,P<0.05。随后根据差异表达的基因进行富集分析。结果水蛭素5 mg/mL下提高HK-2细胞活力效果最佳,转录组学研究结果表明,与正常HK-2细胞相比,水蛭素处理后的HK-2细胞有1723个基因发生差异表达。GO和KEGG分析结果表明,炎症通路的调控是水蛭素治疗高尿酸血症的主要作用机制。结论水蛭素作用于多条炎症信号通路,进而促进尿酸排泄,促进集体代谢和尿酸排出体外,起到降尿酸的作用,表明水蛭素在治疗高尿酸血症方面效果显著。; 何华梅赵应学吴林秀周维海刘喜华甄汉深; 关键词：水蛭素转录组

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