搜索到6445篇“ H5N1亚型禽流感病毒“的相关文章
- H{1}N1亚型禽流感病毒HA蛋白在水稻胚乳中的表达及其纯化
- 2024年
- 为制备H{1}N1亚型禽流感病毒HA蛋白并评估其免疫原性,利用水稻表达系统表达H{1}N1亚型禽流感病毒重组HA蛋白。首先构建了重组植物表达载体pCAMBIA1300-HA,该载体具有GT13特有启动子、信号肽SP和终止子,有利于外源基因在水稻中表达。之后将重组质粒pCAMBIA1300-HA通过电转化法导入根癌农杆菌EHA10{1}中,筛选出阳性菌落并侵染水稻愈伤组织。经过暗培养、潮霉素筛选、分化、生根、成苗,采用CTAB法提取水稻叶片DNA,PCR鉴定结果显示,HA基因已插入到水稻基因组中,重组HA基因大小为4660 bp。将阳性植株移植到大田中,4个月后收获水稻种子,提取水稻胚乳蛋白,Wester{21} blot鉴定结果表明,HA蛋白在水稻胚乳中成功表达。重组HA蛋白通过Q阴离子层析、疏水层析和凝胶过滤层析三步分离纯化,其纯度达到90%以上。最后将纯化后的重组HA蛋白与ISA {1}0V佐剂混合并乳化制成疫苗,免疫小鼠,小鼠血清具有较高的特异性抗体水平,表明重组HA蛋白免疫原性较好。综上,成功构建了H{1}N1亚型禽流感病毒HA重组蛋白的水稻表达系统,并分离纯化获得了高纯度和免疫原性良好的重组HA蛋白。
- 屈小天王雅楠许倩茹李雪洋张申立张二芹张改平
- 关键词：H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白蛋白质纯化
- 6株H9{1}2亚型禽流感病毒分子特征及遗传演化分析
- 2024年
- 为了解H9{1}2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的分子变化特征及其跨物种传播的可能性,对实验室保存的6株H9{1}2亚型AIV的8个基因片段进行了序列测定及遗传演化分析,并且对6株病毒与选取的代表毒株进行了HA和{1}A同源性及关键氨基酸位点分析。结果显示,分离的6株病毒均为欧亚系,其中3株为G{15}7基因型;4株病毒的HA蛋白发生了Q226L突变,2株病毒的HA发生了A190V突变。HA和{1}A均有增加或缺失的潜在糖基化位点。6株病毒的{1}A茎部均有62~64位的缺失,红细胞结合位点431~433较为保守,而368和369位变化较大。综上,6株病毒为低致病性AIV,HA和{1}A均含有哺乳动物适应性突变,增大了其跨宿主传播的风险。研究结果为我国H9{1}2亚型AIV的进化提供了参考依据,为其综合防控提供了理论指导。
- 邢燕茹祝宇翔范春燕于海汪秀会
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型分子特征遗传进化
- 2019-2022年中国H6{1}1亚型禽流感病毒的生物学特性分析
- 2024年
- 【背景】H6{1}禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)广泛流行于我国南方地区,是我国家禽中最常见AIV之一。H6N1{1}AIV频繁地与其他野鸟源毒株重配,并且可以作为供体为高致病性AIV提供内部基因片段,产生新型重组病毒,进而威胁人类健康。【目的】通过对我国H6N1{1}AIV的演化动态及其相关生物学特性分析研究,为我国禽流感的综合防控提供数据支持。【方法】采集2019—2022年我国2{15}个省(直辖市、自治区)的活禽交易市场及养殖场家禽喉和泄殖腔拭子,通过接种鸡胚分离到7株H6N1{1}AIVs并对其进行全基因组测序,分析其遗传演化特征、受体结合特性及其对SPF鸡和BALB/c小鼠的感染性。【结果】遗传演化分析表明,7株病毒的基因与分离于北美及东南亚地区的野鸟源病毒基因同源性较高,基因来源复杂,具有明显的遗传多样性。贝叶斯演化分析表明,H6{1}AIV HA基因曾发生过多次的跨洲际传播,欧亚谱系病毒在北美地区也有着较长时间流行。1株病毒HA基因与北美地区毒株基因高度同源,根据贝叶斯演化分析结果,推测该病毒在野鸟体内经历了复杂的基因重配后形成,后经野鸟传入我国。特殊氨基酸位点分析结果显示,病毒HA蛋白裂解位点序列均为PQIETR↓GLF,符合低致病性AIV特征;此外,另有1株病毒的NP蛋白发生Y{15}2H突变,据报道,该突变对AIV获得抵抗人干扰素刺激基因BTN3A3的能力起到关键作用。受体结合特性分析表明,部分毒株具有双受体结合特性,但结合人源受体能力弱于结合禽源受体能力。病毒对SPF鸡的感染性试验表明,鸡感染A/chicken/Jiangxi/S4044{15}/2019(H6N1)后能通过呼吸道及消化道排毒,并且病毒可在鸡群内通过接触传播。鸡感染A/duck/Jiangxi/S10941/2019(H6N1)后仅有少数鸡通过呼吸道排毒,病毒无法在鸡群间通过接触传播。BALB/c小鼠的感染性试验表明,H6N1{1}AIV无需提前适应便�
- 陈源崔鹏飞施建忠张元成于晴晴颜成张亚萍王丛丛张洁王燕邓国华陈化兰
- 关键词：禽流感病毒感染性
- H{1}N8亚型禽流感病毒HA蛋白的原核及真核表达及兔多克隆抗体的制备
- 2024年
- 目的 构建H{1}N8亚型禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV)HA基因的原核和真核表达载体,分别在E.coli Rosetta(DE3)和Sf9中进行表达,并制备兔多克隆抗体。方法 采用RT-PCR扩增H{1}N8亚型AIV的HA基因,并将其克隆至原核表达载体pTac-His-MBP-PreScission中,再转化至Rosetta(DE3)中,利用IPTG诱导表达。通过SDS-PAGE及蛋白免疫印迹(Western blot, WB)鉴定HA蛋白的表达,并优化IPTG浓度、诱导时间和温度以提高表达效率。将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗H{1}N8亚型AIV的HA蛋白多克隆抗体,通过酶联免疫吸附实验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测其特异性和效价。同时,将HA基因克隆到真核表达载体pFastBacHTA中,将其瞬时转染Sf9细胞并扩增3代,最后通过WB和间接免疫荧光试验(Indirect immunofluorescence assay, IFA)验证表达产物。结果 成功构建了HA基因的原核重组质粒pTac-HA-DE3和真核重组质粒pFast-HA。经SDS-PAGE及WB验证该蛋白分子质量约110 ku,最佳表达条件为IPTG浓度为0.8 mmol/L、温度37℃和诱导时间为4 h。ELISA检测显示兔多克隆抗体效价为1∶102 400。成功将真核重组质粒pFast-HA转化入DH10Bac感受态细胞中,证明HA基因成功转座。Bacmid-HA转染Sf9细胞后观察到细胞病变,WB和IFA检测表明重组杆状病毒Bac-HA感染的Sf9细胞能够表达HA蛋白。结论 本研究初步探究了H{1}N8亚型AIV HA蛋白的表达条件及免疫原性,并且具有良好的免疫原性和反应原性,为后续建立ELISA诊断试剂盒及H{1}N8 AIV疫苗的研制提供了一定的参考价值。
- 刘静王聪颖梁志鹏梁昭平刘闰栀张新宇何杰珩陈高婕闫战飞池仕红袁生郭锦玥黄淑坚温峰
- 关键词：禽流感病毒HA蛋白原核表达真核表达多克隆抗体
- 野鸟源与家禽源H{1}N6亚型禽流感病毒致病性与传播风险研究
- H{1}N6亚型禽流感(avian influenza virus,AIV)在野鸟和家禽中流行,不仅给家禽养殖业造成巨大损失,也对人类健康构成威胁。H{1}N6亚型禽流感{13}在中国持续性存在,自2014年到2023年3月,已有8...
- 胡静雷
- 关键词：遗传进化分析受体结合
- 2022-2023年长春活禽市场H9{1}2亚型禽流感病毒的分离鉴定及商品疫苗对其的免疫效果评估
- 任永宁
- 鸭H9{1}2亚型禽流感病毒的研究进展
- 2023年
- H9{1}2亚型禽流感病毒目前已经是世界范围内传播最为广泛的人兽共患病毒之一,其感染谱和传染源都在逐渐扩大,引起大众重视H9{1}2对公共卫生安全存在的潜在威胁。鸭H9{1}2病毒普遍认为是以水禽类—陆地禽类—人类的路径实现人的感染,H9{1}2可作为重组病毒的基因供体和其他类型的{14}病毒基因进行重排重组具备感染人的能力。加强禽类饲养管理、做好养禽场的防病管理、加大对禽场工作人员宣传教育的力度可以有效的防控H9{1}2亚型禽流感病毒的传播,疫苗接种、建立准确又灵敏的检测方法是禽流感病毒防控工作的重要手段。
- 杨曾瑜钟芝兰
- 关键词：防控措施
- H{1}N1亚型禽流感病毒适配体筛选与验证
- 禽流感(Avia{1} i{1}flue{1}za viruses,AIV)是一种全球范围内的流行性疾病,而H5N1亚型禽流感病毒更是作为其中主要流行毒株大肆蔓延。自H5N1亚型禽流感病毒爆发以来,不仅仅是给禽类养殖业带来巨大的损失...
- 李想
- 关键词：H5N1亚型禽流感病毒SELEX磁珠适配体
- H9{1}2亚型禽流感病毒的研究进展及防控措施
- 2023年
- 禽流感是一种人、禽共患的急性和高度接触的传染性疾病,是由禽流感病毒的某些亚型毒株所引起,其表现的临床症状随病毒亚型不同而异。按病原体类型分为高致病性、低致病性与非致病性三类,低致病性禽流感是我国动物疫病中的二类传染病,其中主要以H9N2亚型为主,因其感染后症状较温和,且死亡率低,所以在生产中容易被忽略,极易造成快速传播和感染。这不仅影响我国养禽业的发展,也会带来一定的经济损失。因此,对于H9N2亚型禽流感病毒的研究是十分必要的。本文从病毒蛋白结构,复制周期,致病性特点,防控措施等方面进行阐述。
- 陈佳静杨晓霞曹楠张蕾何日升付国平
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒防控措施
- 应用适配体捕获建立H{1}N1亚型禽流感病毒拉曼光谱快速检测技术
- 2023年
- 基于表面增强拉曼散射(surface en{1}anced Raman scattering,SERS)和适配体捕获相结合技术,建立1种H5N1亚型禽流感{10}快速检测方法。本实验室筛选得到2条针对H5N1亚型禽流感{10}具有良好的特异性和灵敏度的适配体,与磁珠偶联建立针对H5N1亚型禽流感{10}捕获试剂,通过对捕获体系进行原位还原生成纳米银颗粒增强拉曼信号,建立了原位、快速、无损的H5N1亚型禽流感{10}拉曼光谱快速检测技术。结果表明:H5N1亚型禽流感{10}在1058 cm^(-1)处有特异性拉曼峰谱,该方法具有良好的特异性、灵敏性和稳定性。该方法的最低检测限达到原{10}液稀释的1010倍。利用本方法可在10 min内快速检测出待测样本中是否有H5N1亚型禽流感{10}的存在,能够在大体积、低浓度样品中快速检测出目标病原,满足H5N1亚型禽流感{10}临场快检的需求。
- 李想崔焕忠李乾学
- 关键词：H5N1亚型禽流感病毒适配体
