陈化兰
所属机构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 所在地区: 黑龙江省 哈尔滨市 研究方向: 农业科学 发文基金: 国家自然科学基金
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邓国华 作品数:227 被引量:724 H指数:14 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 研究主题:禽流感病毒 禽流感 感染性 H5亚型禽流感 鸭源 姜永萍 作品数:152 被引量:348 H指数:11 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 研究主题:DNA疫苗 禽流感 禽流感病毒 H5亚型禽流感 H5亚型 田国彬 作品数:186 被引量:457 H指数:11 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 研究主题:禽流感病毒 禽流感 H5N1亚型 灭活疫苗 流感病毒 施建忠 作品数:126 被引量:260 H指数:9 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 研究主题:禽流感病毒 禽流感 流感病毒 灭活疫苗 H5N1亚型 李雁冰 作品数:155 被引量:588 H指数:13 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 研究主题:禽流感病毒 禽流感 H5N1亚型 流感病毒 灭活疫苗
H5N1亚型禽流感病毒A/Anhui/2/2005活候选疫苗株的构建及其对鸡致病性的研究 2008年 A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)冷适应疫苗供体株具有冷适应性、温度敏感性和致弱性表型。本研究利用基因工程技术体外合成A/Ann Arbor/6/60ca(H2N2)冷适应疫苗株具有冷适应性的内部基因PB2、PB1、PA、NP、M、NS,从A/Anhui/2/2005(H5N1)毒株获得HA、NA,并对HA基因上的多个连续碱性氨基酸基序进行了缺失修饰。将上述8个基因片段分别克隆至pBD双向表达载体中测序鉴定。利用质粒反向遗传操作系统,将构建正确的8个重组pBD质粒转染Vero细胞拯救病毒。经RT-PCR和序列测定鉴定,结果表明本试验成功获得了一株H5N1亚型A/Anhui/2/2005重组病毒,将其命名为AH/AAca,救获的重组病毒具有预期的温度敏感性和冷适应性生物学特性。随后进行了AH/AAca人工感染SPF鸡的感染性和致病性试验,结果表明其对鸡既无感染性,也无致病性。AH/AAca的获得为评价其在小鼠、非人类灵长目等动物模型上的保护效力的研究打下了坚实基础,为我国预防人禽流感的流行建立了技术储备。 樊树芳 许传田 索永兵 陈化兰关键词:禽流感病毒 反向遗传操作 温度敏感性 “流感百年”专题简介 被引量:10 2018年 人类历史是一部同传染病斗争的历史,1918年由甲型H1N1流感病毒引起的“西班牙流感”导致全球数千万人死亡,这是有记录以来人类史上最严重的一次流感疫情.在随后的一百年间又相继发生了3次大的流感疫情,分别是1957年“亚洲流感”(H2N2)、1968年“香港流感”(H3N2)和2009年甲型H1N1流感,给人类健康和社会经济带来灾难性的打击,造成了严重的社会恐慌.一百年来,随着对流感病毒认知的不断深入,全球流感应对能力有了显著提升,我国的流感应对能力同样得到了显著的发展和提高.然而,每年的季节性流感以及不同亚型动物流感的存在仍然是人类健康的严重威胁和全球公共卫生工作的巨大挑战.可以预见,针对流感病毒的研究在当前及未来一段时间仍然是生命科学领域受人关注的焦点之一. 陈化兰关键词:流感病毒 甲型H1N1流感 人类历史 卫生工作 生命科学 鸭病毒性肠炎病毒感染性重组克隆系统及构建方法和应用 本发明涉及一种鸭病毒性肠炎病毒感染性重组克隆系统,其特征在于所述系统包括多个粘粒,每个粘粒中克隆有鸭病毒性肠炎病毒疫苗株基因片段,所述鸭病毒性肠炎病毒疫苗株基因片段含有相互重叠的区域,并拼接覆盖鸭病毒性肠炎病毒疫苗株全基... 陈化兰 柳金雄 步志高 姜永萍检测禽病血清抗体的可视化蛋白芯片及其制备方法和应用 本发明公开了一种检测鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽流感病毒和鸡传染性法氏囊病病毒的血清抗体的可视化蛋白芯片,包括以下方法制备得到:将上述4种病毒全蛋白分别进行纯化,稀释;将阳性对照血清,阴性对照与4种病毒蛋白分别... 王秀荣 包红梅 石林 伍嘉男 陈化兰文献传递 禽流感病毒H5HA、H7HA基因共表达核酸疫苗质粒的构建及其在体外的表达 被引量:7 2004年 为了获得既能对 H5亚型又能对 H7亚型 AIV攻击产生保护的核酸疫苗 ,设计构建了含有双顺反子的真核表达载体 ,用限制性内切酶从 PCIH7HA载体上切得 AIV H7HA基因的c DNA,此 c DNA含有 CMV启动子和 Poly(A)终止序列 ,使用 DNA 连接酶引入载体PCIH5HA中 ,最后获得双顺反子真核表达载体PCI-H5HA-H7HA,其中 H5HA和 H7HA基因都带有自己的 CMV启动子和 Poly(A)终止序列。选用 2 93 -T真核表达细胞系 ,用脂质体转染法导入细胞进行瞬时表达 ,转染后 48h用荧光标记的兔抗鸡 Ig G进行间接免疫荧光试验。结果表明双顺反子真核表达载体构建正确 ,且在真核表达细胞系中 H5HA和 H7HA基因都能获得表达 ,且 H5HA 基因的表达效果优于H7HA。 张芳芳 刘光亮 姜永萍 陈化兰 陈怀涛关键词:禽流感病毒 基因表达 核酸疫苗 质粒 间接免疫荧光 复方中药防治禽流感试验 被引量:1 2005年 李艳华 王秀荣 田国彬 李雁冰 陈化兰 佟恒敏 于康震关键词:复方中药 禽流感 细丝蛋白A通过活化Ⅰ型干扰素信号通路抑制H5N6流感病毒复制 被引量:1 2018年 H5N6 A型流感病毒(influenza A virus, IAV)是严重危害公共卫生安全的新发人兽共患病病原,其复制和致病的科学问题需进一步深入研究.细丝蛋白A(filamin A, FLNA)是一种多功能的肌动蛋白结合蛋白,其可作为细胞信号转导中的支架蛋白,广泛参与细胞内的多种重要生物学过程,但其在流感病毒感染与免疫过程中的作用尚未见报道.前期深度测序分析发现H5N6流感病毒感染细胞后可显著下调FLNA的表达水平,而FLNA过表达能够显著抑制流感病毒在细胞中的复制,并且可以活化Ⅰ型干扰素信号通路.通过siRNA或抑制剂阻断Ⅰ型干扰素下游信号通路之后, FLNA对流感病毒复制的抑制作用消失.以上结果表明, FLNA可以通过活化Ⅰ型干扰素信号通路来抑制H5N6流感病毒在细胞中的复制.本文阐明了FLNA蛋白在流感病毒复制过程中的作用,发现了FLNA参与细胞天然免疫反应的新功能,同时为抗流感病毒药物研发提供了理论依据和研究思路. 韩璐 汪亮 曾艳 陈化兰 朱启运 徐帅关键词:细丝蛋白A 流感病毒 山西亚群H5N1亚型HPAIV对鸭及鸭胚的继代感染研究 被引量:2 2010年 2006年从山西省分离获得的H5N1亚型禽流感病毒(AIV)曾引起免疫鸡群的大量死亡,与我国之前分离的病毒抗原差异性较大,称为"山西鸡型"抗原变异株。本研究应用该亚群代表毒株CK/SX/2/06(H5N1),研究该病毒对SPF鸭和鸭胚的致病性,并通过病毒在鸭和鸭胚内的连续传代,探讨该亚群病毒在鸭和鸭胚中的进化规律。结果表明,病毒对3周龄鸭呈低致病性,在各脏器中的复制能力较弱;鸭感染病毒后无明显临床症状,排毒水平较低并且不能感染同居鸭。病毒在3周龄鸭和10日龄鸭胚中分别继代感染3代和5代后,对3周龄鸭仍呈低致病性且HA基因未发生氨基酸位点变化。病毒不能致死3周龄鸭和1日龄雏鸭,但能致死10日龄~23日龄鸭胚,而且对鸭胚的致病性随着鸭胚日龄的增长逐渐减弱,致死鸭胚时间从对10日龄鸭胚24h致死到对23日龄鸭胚72h致死直至对25日龄鸭胚只感染但不致死。病毒对鸭呈低致病性且在鸭群传播中保持着基因水平和致病性上的相对稳定,对不同日龄鸭胚、1日龄和3周龄鸭致病性的不同表现,与目前存在于我国的其他亚群H5N1HPAIV对鸭致病性和进化特点上呈现出明显的差异,并对家禽养殖业存在威胁。 张翼 段振华 刘丽玲 施建忠 田国彬 曾显营 陈化兰 李雁冰关键词:禽流感病毒 鸭胚 一株H4亚型禽流感病毒全基因组序列测定及遗传演化分析 被引量:5 2011年 2008年对我国南方活禽市场进行流行病学监测时从鸭体内分离鉴定一株H4亚型禽流感病毒(AIV),命名为A/duck/Guangxi/912/2008(H4N2)(缩写为DK/GX/912/08)。为了解该株H4亚型AIV的来源、特征及其分子演化规律,本研究对其全基因序列进行测定,并与GenBank登录的相关病毒进行遗传演化分析。结果表明:DK/GX/912/08HA基因切割位点附近的氨基酸序列(PEKASR↓GLF)符合低致病力AIV的特征,其分子遗传演化关系属于东半球谱系的欧亚分支;NA基因与A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)在同一分支内,核苷酸同源性为98.1%;PB2基因与A/duck/Nanchang/4-165/2000(H4N6)处于同一分支;而NS基因与A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)同源性最高。因此,推测DK/GX/912/08可能是不同来源的基因在鸭体内经过复杂重组演变的一株重组病毒。 刘丽玲 李雁冰 张翼 段振华 施建忠 田国彬 曾显营 刘娣 华育平 陈化兰关键词:禽流感病毒 遗传演化分析 H5N1亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:4 2011年 为制备抗H5N1禽流感病毒(AIV)的单克隆抗体(MAb),本研究以灭活的H5N1亚型A/Chicken/Guangdong/S2261/2009(H5N1GD261)株免疫4周龄~6周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA及HI筛选获得了3株能稳定分泌抗HA的MAb杂交瘤细胞,分别命名为1A4、2F5和3D3。MAb亚类鉴定表明,2F5为IgM类,其它为IgG2a亚类,轻链均为κ链。经血凝抑制检测,3株MAb均能与H5亚型的AIV结合,并具有较好的型广谱性。 崔佳莹 李印 于扬 张文亮 邓国华 陈化兰关键词:禽流感病毒 血凝素 单克隆抗体 血凝抑制