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大额牛被引量：9: 1998年; 大额牛又称独龙牛，为半野生半家养的珍贵畜类，在我国仅分布于云南省贡山怒族独龙族自治县的独龙江流域。根据形态特征和细胞遗传学的研究，大额牛是Ｂｏｓ属中独立的一个种（Ｂｏｓｆｒｏｎｔａｌｉｓ），很可能起源于雄性野牛和雌性瘤牛的杂交后裔。大额牛在野生放牧条件下，就具有较典型的肉用体型、良好的肉用性能和优良的肉质特性，具有适应性强、抗病力好、耐粗饲、采食力强、体壮力大等特性。但目前大额牛遗传多样性缺乏，严重危胁这一优良畜牧资源的生存。应采取有效措施，充分扩大有效种群的规模，避免过多的近亲繁殖。; 田允波和绍禹葛长荣; 关键词：大额牛体型外貌生物学特性

大额牛瘤胃细菌CMC-1蛋白结构和功能的生物信息学分析被引量：5: 2021年; 为了深入了解大额牛瘤胃细菌CMC-1蛋白的结构和功能,试验利用ProtParam、TMHMM Server 2.0、ProtScale、NCBI Conserved Domains、SignalP 5.0、TargetP、PSORTⅡserver、SOPMA、SWISS-MODEL、NCBI protein BLASTp和MEGA 7.0等在线工具和软件,对CMC-1蛋白的理化性质、跨膜区、亲水性/疏水性、结构域、信号肽及亚细胞定位、二级结构、三级结构、系统进化等内容进行分析。结果表明:CMC-1蛋白的相对分子质量为47 026.01,理论等电点为5.68,带负电荷的残基总数为49个,带正电荷的残基总数为41个,估计半衰期为100 h,属于亲水型稳定的跨膜脂蛋白,定位于线粒体中,含有一个主要由α-螺旋、无规则卷曲、扩展链、β-转角组成的保守结构域,三级结构同源建模有较高的置信度;CMC-1蛋白在进化树中独立成支,与普雷沃氏菌科细菌HUN156糖苷水解酶家族5中的纤维素酶蛋白同源性较高。说明CMC-1蛋白是与普雷沃氏菌科细菌HUN156纤维素酶蛋白有较高亲缘关系的亲水型跨膜脂蛋白,可能来源于一个新的微生物种或一个新的纤维素酶基因。; 张光荣袁再美孙丽媛邓茗月王荣蛟王荣蛟王寒雪毛华明毛华明; 关键词：大额牛瘤胃细菌蛋白质结构蛋白质功能生物信息学分析

大额牛和牦牛胃型LYZ c基因多态性及其对消化功能的适应性分析: 2018年; 【目的】为了阐明大额牛和牦牛胃型LYZ c基因的多态性及其对消化功能的适应。【方法】采用PCR产物直接测序技术,对35头大额牛和33头牦牛样品胃型LYZ c基因完整编码区序列进行了变异检测,并结合已发表的牛科物种同源序列进行了其对消化功能的适应性分析。【结果】在大额牛群体内共发现6个SNP位点,分别为c.196G>A、c.267T>C、c.270C>T、c.396C>T、c.423C>T和c.438C>G。在牦牛群体内共发现10个SNP位点,其中6个与大额牛共享,非共享的SNP位点分别为c.336G>C、c.348T>G、c.351T>C和c.375A>C。SNP196和SNP348为异义替换,引起p.G66S和p.H116Q氨基酸替换,但它们对大额牛和牦牛LYZ c的功能没有影响。在大额牛LYZ c基因中,共定义6种单倍型,确定了2种LYZ c蛋白变异体(Gayal 1和Gayal 2);而在牦牛LYZ c基因中,共定义12种单倍型,确定了3种LYZ c变异体(Yak 1～Yak 3);变异体Gayal 1与Yak 3、Gayal 2与Yak 1相同,而变异体Yak 2为牦牛独有。大额牛、牦牛和普通牛胃型LYZ c变异体之间在氨基酸组成、理化特性与结构上基本一致,但大额牛和牦牛变异体LYZ c等电点比普通牛S3型LYZ c更低。【结论】大额牛和牦牛胃型LYZ c蛋白可能更适合胃中的酸性环境,具有分解胃中微生物的功能。; 范新阳张自芳邱立华钱林东刘丽仙张永云苗永旺; 关键词：C基因消化酶

影响大额牛精液质量主要因素的研究被引量：3: 2017年; [目的]大额牛为我国地方畜禽遗传资源濒危品种,为了加强大额牛的保种力度,提高保种效率;本研究对影响大额牛精液质量的主要因素如采精方法、季节、个体遗传等进行了比较研究。[方法]大额牛用电刺激法和假阴道法采精,按照牛冷冻精液国家标准GB4143-2008的方法测定大额牛的采精量,精子密度,原精活力和冷冻精液解冻活力,用程控冷冻仪冷冻大额牛精液。[结果]大额牛冷冻精液解冻效果较好,采精量为5.009±2.239m}(n=226),原精活力为54.184±15.760%(n=223),精子密度为7.207±6.387亿/mL(n=225),解冻活力为36.007±2.092%(n=136)。精子冷冻解冻复苏率达50%以上。大额牛电刺激采精成功率高。[结论]迁地保护条件下大额牛电刺激法采精获得很好效果,也能用假阴道法采精,精液冷冻解冻效果较好,有利于大额牛遗传物质的保存。; 毛翔光赵家才杨彩云高玉琼何永富李雯张洁; 关键词：大额牛冷冻精液濒危

独龙牛瘤胃细菌纤维素酶基因克隆被引量：7: 2017年; 【目的】从分子生物学水平对独龙牛的瘤胃纤维素酶基因资源进行筛选及酶学特性研究,为后续开发利用新的纤维素酶提供参考依据,也为揭示瘤胃微生物降解纤维素的作用机理打下基础。【方法】提取独龙牛瘤胃微生物中的大片段基因组DNA,构建瘤胃微生物基因组文库,并进行纤维素酶活性筛选,筛选获得的高活性基因经测序后进行生物信息学分析与酶学性质研究。【结果】从独龙牛瘤胃中共获得20352个阳性克隆,白斑率达92%,构建的瘤胃微生物基因组文库容量899.6 Mb,空载率1.82%。从瘤胃微生物基因组文库筛选获得2个具有纤维素酶活性的阳性克隆(B1和B2),其中,B1基因序列长1230 bp,编码409个氨基酸,基因编码产物与来自Ruminococcus albus纤维素酶基因编码产物(β-1,4-内切葡聚糖酶,Gen Bank登录号P23661.1)的覆盖率高达99%,其同源性高达97%;B2基因序列长1002bp,编码333个氨基酸,基因编码产物与Uncultured microorganism纤维素酶基因编码产物(纤维糊精酶,Gen Bank登录号ADB80112.1)的覆盖率高达99%,其同源性为83%。B1和B2基因可在Rosetta原核表达宿主菌中成功诱导表达,B1纤维素酶的最适pH为6.0,最适温度40℃;B2纤维素酶的最适pH为6.0,最适温度40~50℃。【结论】从构建的独龙牛瘤胃微生物基因文库中筛选获得2株具有较高活力的纤维素酶(B1和B2),其中,B1为β-1,4-内切葡聚糖酶,而B2为新的纤维糊精酶,可为纤维素的体外降解提供新型材料。; 杨天龙王淑玲顾招兵朱仁俊刘旭川张春勇杨舒黎毛华明冷静; 关键词：基因文库纤维素酶克隆

Screening and characterization of a novel ruminal cellulase gene(Umcel-1) from a metagenomic library of gayal(Bos frontalis)被引量：3: 2016年; Gayal is a rare semi-wild bovine species found in the Indo-China. They can graze grasses, including bamboo leaves, as well as reeds and other plant species, and grow to higher mature live weights than Yunnan Yellow cattle maintained in similar harsh environments. The aim of this study was to identify specific cellulase in the gayal rumen. A metagenomic fosmid library was constructed using genomic DNA isolated from the ruminal contents of four adult gayals. This library contained 38400 clones with an average insert size of 35.5 kb. The Umcel-1 gene was isolated from this library. Investigation of the cellulase activity of 24 random clones led to the identification of the Umcel-1 gene, which exhibited the most potent cellulase activity. Sequencing the Umcel-1 gene revealed that it contained an open reading frame of 942 base pairs that encoded a product of 313 amino acids. The putative gene Umcel-1 product belonged to the glycosyl hydrolase family 5 and showed the highest homology to the cellulase （GenBank accession no. YP_004310852.1 ） from Clostridium lentocellum DSM 5427, with 44% identity and 62% similarity. The Umcel-1 gene was heterologously expressed in Escherichia coil BL21, and recombinant Umcel-1 was purified. The activity of purified recombinant Umcel-1 was assessed, and the results revealed that it hydrolyzed carboxymethyl cellulose with optimal activity at pH 5.5 and 45~C. To our knowledge, this study provides the first evidence for a cellulase produced by bacteria in gayal rumen.; LI Bi-fengZHU Ya-xinGU Zhao-bingCHEN YuanLENG JingGOU XiaoFENG LiLI QingXI Dong-meiMAO Hua-mingYANG Shu-Li; 关键词：GAYAL

大额牛×婆罗门(GBF_1)牛与云岭牛肉品质比较研究被引量：3: 2015年; 研究旨在比较大额牛和婆罗门杂交后代(GBF1)与云岭牛肉品质,评估大额牛杂交利用潜能。选择年龄相近、性别相同的GBF1牛和云岭牛进行育肥、屠宰,采集100个肉样冻存。以肉质较好的云岭牛肉为对照,检测GBF1牛肉的剪切力、失水率、系水力、蒸煮损失。结果表明,GBF1牛肩峰剪切力显著高于云岭牛(P<0.05),其他部位肉剪切力两品种间没有显著差异(P>0.05)。GBF1牛10个部位肉的平均剪切力、失水率、蒸煮损失分别为3.50kg、24.15%、27.56%,低于云岭牛;平均系水力64.60%,高于云岭牛,但差异均不显著(P>0.05)。由此可知,GBF1牛肉品质与云岭牛相似,且均较好。; 王喆赵志军李天平王安奎和霁恬高月娥和占星黄必志; 关键词：大额牛种间杂交肉品质

大额牛(Bos frontalis)与黄牛(Bos taurus)的种间杂交研究被引量：4: 2015年; 【目的】探讨大额牛(Bos frontalis)与黄牛(Bos taurus)种间杂交利用及杂交育种前景。【方法】以云南黄牛(大理黄牛、德宏黄牛,n=379)和西本杂(西门塔尔牛♂×云南黄牛♀,n=136)为母本,大额牛为父本,采用人工授精进行种间杂交。母牛在输精后约60 d,通过直肠检查进行妊娠诊断,并对妊娠母牛进行跟踪调查,统计产犊数,测定云南黄牛及杂种牛的初生、6月龄、12月龄、18月龄和24月龄体重、体尺,观察调查杂种牛的主要外貌特征。【结果】1用大额牛冷冻精液累计输精515头母牛,平均受胎率和产犊率分别达73.98%和92.13%,其中黄牛母本的平均受胎率和产犊率分别为68.87%和90.81%,西本杂母本的受胎率和产犊率分别达88.24%和95.00%。2大西本杂(大额牛♂×西本杂♀)的初生、6月龄、12月龄、18月龄和24月龄体重分别为22.86、103.86、142.40、176.21和243.25 kg,比云南黄牛的11.73、82.42、108.37、124.60和132.10 kg提高94.89%(P<0.01)、26.01%(P<0.01)、31.40%(P<0.01)、41.42%(P<0.01)和84.14%(P<0.01),比大本杂(大额牛♂×云南黄牛♀)的17.70、102.19、134.81、161.43和201.91 kg提高29.15%(P<0.01)、1.63%(P>0.05)、5.63%(P>0.05)、9.16%(P<0.05)和20.47%(P<0.01);大本杂的初生、6月龄、12月龄、18月龄和24月龄体重亦分别比云南黄牛提高50.90%(P<0.05)、23.99%(P<0.01)、24.40%(P<0.01)、29.56%(P<0.01)和52.85%(P<0.01);大西本杂初生到24月龄的平均日增重为301.90 g,极显著高于大本杂的264.67 g和黄牛的164.89 g(P<0.01),大本杂平均日增重亦极显著高于云南黄牛(P<0.01);大本杂的初生、12月龄和24月龄体重的杂种优势率分别为28.21%、3.87%和4.20%,以初生重的杂种优势率最高。3初生时,大西本杂的体高和胸围分别比同龄云南黄牛提高8.38%(P<0.05)和8.34%(P<0.05),大本杂的体高和胸围分别比云南黄牛提高11.48%(P<0.05)和7.23%(P<0.05)。在6月龄,大西本杂的体高、胸围、腹围和管围分别比云南�; 和占星王朋武罗在仁李春梅尹以昌亐开兴王安奎张继才黄必志袁希平; 关键词：大额牛黄牛种间杂交杂种优势

大额牛研究及保护利用被引量：2: 2014年; 大额牛是我国惟一一种半野生半家养的珍稀物种资源。研究论证了大额牛的起源和种质特性(生活习性、外貌与体质特征、生理生化指标、生产性能),并就大额牛的遗传多样性研究进展和保护利用前景进行了展望。; 刘万洪苏八七赵东勇陈学礼李强飞郝甜甜席冬梅; 关键词：大额牛种质特性

云南大额牛瘤胃宏基因组Fosmid文库的构建与分析被引量：4: 2013年; 为研究云南大额牛瘤胃中丰富的降解纤维素类物质的基因，采用包埋法和脉冲场电泳技术直接从云南大额牛瘤胃内容物提取总DNA，经不完全酶切获得DNA片段，大小为23-48 kb，与pcc2 FOS vector连接，转化至E.coli EPI 300宿主细胞，构建瘤胃微生物宏基因组Fosmid文库。该文库共保存38400个克隆，平均插入片段大小约35.5 kb，空载率小于2%，库容达1363 Mb。通过对该文库进行部分纤维素酶活力筛选，获得具有羧甲基纤维素酶活性的克隆95个，木聚糖酶活性的克隆52个，同时具有这2种酶活性的克隆23个，这为进一步研究大额牛瘤胃内纤维素酶基因奠定了基础。; 李碧凤朱雅新苟潇冷静毛华明李清冯励杨舒黎; 关键词：大额牛瘤胃微生物 FOSMID文库

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