李莉
- 作品数:4 被引量:7H指数:2
- 供职机构:中国人民解放军第一军医大学热带医学研究所更多>>
- 发文基金:广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 恶性疟原虫(FCC1/HN)谷氨酸脱氢酶(GDH)融合蛋白的复性及纯化的研究
- <正> 近几年来发展的以单克隆抗体为基础的免疫层析技术,以其快速、简便、可靠等优点在疟疾诊断中显示了广阔的应用前景,发现具有诊断价值的靶抗原及制备高亲和力、高特异性的单克隆抗体是建立该项技术的前提。恶性疟原虫的谷氨酸脱氢...
- 李妍宁云山郝文波李莉李明
- 关键词:恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶
- 文献传递
- 蛋白质组学及其在新药研究中的应用被引量:2
- 2004年
- 李莉劳海苗吴英松郝文波李明
- 关键词:新药研究全序列分析大肠埃希菌蛋白质组学人类基因组计划遗传密码
- 恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶融合蛋白复性及纯化的研究被引量:5
- 2003年
- 目的建立恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)融合蛋白质的复性和纯化方法。方法将含有恶性疟原虫GDH全长基因的融合蛋白表达质粒GDH/ pGEX-4T-1转化到宿主菌BL21,该GDH/GST融合蛋白在IPTG的诱导下获得高水平的表达,经SDS-PAGE分析表达产物主要为不溶性的包涵体。经超声酶解法、离心、变性剂/去污剂洗涤后获得包涵体。包涵体经8 mol/L尿素变性后分别采用分子筛柱层析、透析和稀释3种方法复性,并通过浊度分析、非还原SDS-PAGE等方法比较、优化复性方法和条件。复性后的GDH/GST融合蛋白经过不同柱层析方法进行纯化。结果经SDS-PAGE分析表明,GDH/GST融合蛋白表达量可占到菌体总蛋白的25%左右;浊度分析表明:稀释复性法优于其它两种方法,同时20 mmol/L Tris-HCl、1 mmol/L EDTA、pH8.5及GSSG/GSH=1∶10为该融合蛋白稀释复性的最佳条件,其复性回收率可达90%以上。复性产物采用二步阴离子交换层析可获得较好的纯化效果。结论通过稀释复性,二步阴离子交换层析可获得高纯度、具有天然空间构象的重组GDH/GST融合蛋白。
- 李妍宁云山郝文波李莉李明
- 关键词:恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶复性纯化包涵体
- 重组恶性疟原虫乳酸脱氢酶的纯化及免疫活性测定
- 2004年
- 目的 研究恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDH)重组蛋白纯化和复性的最佳条件。方法 重组质粒PGEX-4T-1-LDH在E.coli BL21中表达,表达产物用酶裂解法洗涤、变性、复性、Q-Sepharose High Performance离子交换层析方法纯化。结果 获得具有生物活性的蛋白,其纯度达到95%。结论 此方法操作简便,纯化效果好。
- 李莉宁云山吴英松李明
- 关键词:恶性疟原虫乳酸脱氢酶蛋白纯化