刘伟
- 作品数：10 被引量：43H指数：3
- 供职机构：上海第二医科大学组织工程研究中心更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 自体组织工程化纤维软骨修复半月板缺损的实验研究被引量：19
- 2002年
- 目的 应用组织工程方法在具完全免疫功能的哺乳动物体内修复半月板缺损。方法 15只 4 5日龄的长枫杂交仔猪为实验动物 ,以改良的Klagsbrun酶消化法从左膝半月板获得的自体纤维软骨细胞在体外扩增至一定数量 ,在右膝内侧副韧带前方的内侧半月板造成长 1cm的全层缺损 ,分别将复合聚羟基乙酸 (PGA) 纤维软骨细胞 Pluronic复合物、纤维软骨细胞 Pluronic复合物和单纯PGA植入缺损 ,以正常半月板和旷置缺损作为对照 ,分 9、16和 2 5周取材。标本采用大体观察、组织学、生物化学和生物力学作为评估指标。结果 PGA 细胞 Pluronic复合物在大体形态、组织学结构和压弹性模量 (2 5周为正常组的 5 9 7% )方面均显示形成了最佳的修复组织 ,并使对应股骨髁软骨的糖氨聚糖含量 (2 5周为正常组的 74 5 % )保持相对稳定。结论 自体组织工程化纤维软骨能够修复乃至再造半月板 。
- 崔一民曹谊林商庆新崔磊刘伟
- 关键词：生物医学工程软骨细胞
- 血液流体动力学研究与生物反应器在组织工程血管构建的应用被引量：3
- 2004年
- 利用生物反应器构建组织工程化血管是近年来诞生的一项新技术。本文综述了其理论基础即血液流体动力学的研究进展,生物反应器的原理、结构、应用及评估,同时提出存在的问题并展望其应用前景。
- 许志成商庆新刘伟曹谊林
- 关键词：生物反应器血管构建人工血管
- 端粒酶基因真核表达载体pEGFP-hTRT构建及表达
- 目的:构建具绿色荧光蛋白报道系统的端粒酶基因真核质粒载体,并研究其在293细胞中的表达情况,为基因转染、延长细胞寿命奠定基础。方法:酶切含人端粒酶逆转录酶（hTRT）基因的pGRN145质粒获取hTRT片段,插入经酶切及...
- 周海文周曾同杨雯君刘德莉刘伟曹谊林
- 关键词：端粒酶绿色荧光蛋白基因转染
- 文献传递
- 自体及异体皮肤肌腱细胞中生长因子分子水平的差异研究被引量：1
- 2005年
- 目的:对自体及异体皮肤成纤维细胞和肌腱细胞的生长因子在分子水平的表达差异进行研究。方法:体外培养自体及异体人肌腱细胞和人皮肤成纤维细胞,用基因芯片的方法对两种细胞的生长因子进行检测及比较,并用RT-PCR的方法进一步验证。结果:自体皮肤、肌腱细胞生长因子的分子水平表达无差异,而异体皮肤、肌腱细胞生长因子分子水平的表达略有差异。结论:自体皮肤成纤维细胞与肌腱细胞的生长因子表达相似,证实两种细胞具有同源性,自体皮肤成纤维细胞可以成为构建组织工程化肌腱的种子细胞。而异体皮肤成纤维细胞和肌腱细胞的生长因子表达略有差异,可能为个体差异所致。
- 翟华玲许锋刘伟刘伟
- 关键词：RT-PCR肌腱细胞皮肤成纤维细胞基因芯片
- 真核表达载体pcDNA3.1-h转化生长因子-β1的构建被引量：9
- 2002年
- 目的 为研究软骨细胞基因转染的可行性创造条件 ,从而为基因修饰的软骨组织工程研究奠定基础。方法 应用基因重组技术和限制性内切酶酶切构建并鉴定 pcDNA3 .1 TGF β1真核表达载体 ,经Fugene6介导质粒转染 3T3细胞后应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测hTGF β1mRNA在真核细胞中的表达。结果 重组真核表达载体 pcDNA3 .1 TGF β1经限制性内切酶XhoⅠ和HindⅢ酶切 ,电泳后显示 1 .35kb的hTGF β1目的片段和 5 .40kb的 pcDNA3 .1载体片段 ,证明重组质粒连接正确 ;经RT PCR检测了hTGF β1在转录水平mRNA的表达情况 ,表明质粒转染 3T3细胞后hTGF β1mRNA的表达明显增强。 结论 重组真核表达载体构建正确 ,并能在真核细胞 3T3中表达hTGF β1mRNA 。
- 刘方军曹谊林商庆新崔磊刘伟
- 关键词：真核表达载体转化生长因子-Β1
- 转染端粒酶基因延长人口腔黏膜角化细胞寿命的实验研究
- 目的:将端粒酶基因（hTRT）转染入口腔黏膜角化细胞,延长细胞寿命。方法:hTRT cDNA经逆转录病毒pBABE-tert介导转染人人口腔黏膜角化细胞。RT-PCR检测外源性端粒酶,并检测端粒酶活性;通过细胞生物学一般...
- 周海文周曾同黄鹤刘伟
- 关键词：上皮细胞端粒酶基因转染
- 文献传递
- 重组端粒酶pEGFP-hTRT质粒的构建被引量：3
- 2003年
- 目的 构建具有绿色荧光蛋白报道 (GFP)基因的端粒酶真核质粒载体 ,为转染细胞、延长细胞寿命提供基础。 方法 酶切含人端粒酶逆转录酶 (h TRT)基因的 p GRN14 5质粒获取 h TRT片段 ,插入经酶切及磷酸化处理的 GFP载体 p EGFP- C1,形成 8.1kb质粒 ,经 Hind 、Not 酶切电泳筛选、鉴定并测序。 结果 经酶切电泳分析得到3.4 kb及 4 .7kb大小的两片段 ;测序结果显示接头两端序列正确。 结论 重组端粒酶 p EGFP- h TRT质粒的成功构建 ,可用于细胞转染 ,对进一步研究组织工程种子细胞的衰老问题具有重要意义。
- 周海文周曾同杨雯君刘德莉李卿胡洪亮刘伟崔磊曹谊林
- 关键词：端粒酶重组质粒绿色荧光蛋白
- Y染色体ZFY基因检测在组织工程中的应用被引量：1
- 2005年
- 目的探讨人的Y染色体ZFY基因诊断在组织工程中的应用。方法对两种人的组织工程皮肤“替代物”进行RT-PCR检测,从mRNA水平检测Y染色体ZFY基因表达。用三条引物同时扩增,Y染色体可产生两个片断,X染色体产生一个片断。结果取男性细胞构建的表皮膜片修复女性皮肤缺损区的少量组织,可以检测到494bp和294bp两个条带;女性则494bp一个条带。检出率达100％(16／16)。用男性包皮角质干细胞构建的复合皮肤修复雌鼠全层皮肤缺损,取植入处少量组织检测到人的Y染色体494bp和294bp两个条带,且维持创面修复时间长达8个月。结论Y染色体ZFY基因诊断可作为组织工程皮肤替代物性别标记,且可以跟踪检测,具有特异、准确之优点。
- 刘德莉程新建杨军张杰王佳鸣吴娟娟刘伟
- 关键词：RT-PCR
- 骨髓基质干细胞与不同支架材料复合异位成骨能力的实验研究被引量：7
- 2005年
- 目的:研究骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)与不同支架材料复合后的异位成骨能力。方法:将体外诱导培养的成年犬骨髓基质干细胞,以1×106/cm2的密度接种到冻干骨基质(fdDBM)、磷酸三钙(TCP)、孔径分别为200μm及500μm的珊瑚羟磷灰石(CH200、CH500)等支架材料上,分别于体外培养的第4￣7天进行扫描电镜及石蜡切片HE染色,了解细胞在不同支架上的黏附及生长情况,并于1周后将大小为10mm×5mm×2mm的上述细胞支架复合物(fdDBM、TCP、CH200、CH500)分别植入裸鼠(n=8)背部皮下,每只裸鼠均植入4个实验组及1组无细胞的fdDBM空白支架对照组。9周后,取材行石蜡切片及HE染色,以IMAGER-PROPLUS软件测量每组的新生骨小梁量,并采用SAS软件包行单因素方差分析。结果:犬BMSCs与4种支架材料均黏附良好,TCP、CH200及CH5003组各样本均能观察到新骨形成,fdDBM及fdDBM空白对照组分别有75%、25%的样本有新骨形成;其中,TCP组的TBV值(28.2%±2.86%)显著高于CH200组(24.1%±4.12%)及CH500组(18.1%±4.66%)(P<0.01)。结论:BMSCs与4种材料的相容性良好。TCP与BMSCs复合后异位成骨效果显著,是很有希望的骨组织工程支架材料。
- 阎俏梅张富强崔磊刘伟曹谊林
- 关键词：骨髓基质干细胞磷酸三钙
- 体外与体内组织工程肌腱的构建
- 目的探讨体外与体内组织工程肌腱的构建情况;比较皮肤成纤维细胞与肌腱细胞的异同点,为皮肤成纤维细胞作为组织工程肌腱的种子细胞奠定基础。方法取鸡肌腱细胞培养、扩增至第二代,与PGA复合后,用U形弹簧对其施以静态张力并体外培养...
- 刘伟翟华琳徐峰魏娴曹德君陈兵刘永涛
- 文献传递
