公共文化服务平台

巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中miR-486靶基因的研究: 2021年; 【目的】为了深入挖掘巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中miR-486的靶基因,为最终阐明巴什拜羊优良肉质性状形成的分子调控机制奠定基础,同时为巴什拜羊的持续选育提供理论依据。【方法】分别采集了巴什拜羊胎儿期40,50,60,80,100和120 d,以及出生当天,出生后30,60和90 d共计10个不同发育阶段的骨骼肌组织,分别利用胎儿期6个阶段的混合mRNA和出生后4个阶段的混合mRNA构建了胎儿期和出生后骨骼肌中miR-486调控靶基因的cDNA文库,并利用高通量测序技术对cDNA文库中的靶基因信息进行了深入挖掘。在对所得候选靶基因功能分析的基础上,选择10个候选靶基因,使用qRT-PCR检测其在巴什拜羊上述10个不同发育阶段骨骼肌中表达量的变化,结合课题组前期获得的miR-486在巴什拜羊不同发育阶段骨骼肌中的表达规律,对其靶向调控关系及生物学功能进行初步验证和分析。进而选择其中的4个候选靶基因使用荧光素酶报告载体试验和巴什拜羊骨骼肌卫星细胞中的靶向调控试验最终确认其靶向调控关系。【结果】通过对两个cDNA文库高通量测序数据的分析,胎儿期和出生后分别获得了123个和118个miR-486的靶基因,因其靶向调控关系未经实验验证,故暂称为候选靶基因。其中有96个为两个阶段共表达的候选靶基因,其余27个和22个分别为胎儿期和出生后骨骼肌中特异表达的候选靶基因。GO和KEGG分析结果表明所得候选靶基因显著富集于与肌肉分化和肌纤维发育相关的代谢和信号转导通路,诸如PI3k-Akt、MAPK、Wnt、Adherens junction和Regulation of actin cytoskeleton等。qRT-PCR检测结果表明所选10个候选靶基因在不同发育阶段巴什拜羊骨骼肌中均有表达,但其表达变化规律有所不同。PTEN、Foxo1、Dock3、PAX7、IGF1R、PIK3I1和FBN1在胎儿期巴什拜羊骨骼肌中呈高表达,出生后其表达量显著下调,而OLFM4的表达量则�; 张伟张伟王世银高莉杨力伟邓双义刘晓娜石国庆; 关键词：巴什拜羊靶基因骨骼肌 CDNA文库

FABP4基因在阿勒泰羊尾脂沉积与代谢模型中的表达变化规律被引量：16: 2015年; FABP4(Fatty acid binding protein 4)参与细胞内脂肪酸的转运和脂肪酸代谢,是当前研究动物脂肪沉积与代谢的热门候选基因。为了研究FABP4基因在绵羊尾脂沉积与代谢中的作用,文章采用生物信息学方法分析了FABP4氨基酸序列在各物种中的保守性;利用半定量RT-PCR方法检测了该基因在阿勒泰羊主要组织中的表达;采用饥饿法成功建立了模拟阿勒泰羊尾脂沉积与代谢的动物模型,利用q PCR和i TRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation)技术同时验证FABP4基因m RNA和蛋白在阿勒泰羊非饥饿组与饥饿组尾脂中的表达变化。序列分析结果表明,绵羊FABP4氨基酸序列在物种间高度保守,提示FABP4基因可能由于其重要的生物功能而在进化中表现出其物种的保守性。组织表达谱结果显示,FABP4 m RNA在阿勒泰羊肠脂与尾脂中均高丰度表达,暗示FABP4基因可能在脂肪中行驶着重要的生理生化功能。q PCR与i TRAQ结果显示,FABP4 m RNA与蛋白在两种极端条件下尾脂中的表达差异均不显著(P>0.05),表明FABP4基因可能不是绵羊尾脂沉积与代谢两种极端差异表型的决定基因。以上研究结果为进一步研究FABP4基因在绵羊尾脂中的生物功能奠定了基础。; 许瑞霞高磊赵伟利张伟张伟宋广超甘尚权; 关键词：阿勒泰羊

阿勒泰羊PLA2G16基因多态性检测及其对蛋白质高级结构影响的分析: 2015年; 本研究以脂肪沉积能力超强的阿勒泰羊为研究对象，探究绵羊PLA2G16基因多态性并分析其对氨基酸序列和蛋白高级结构的影响，为后续深入研究该基因在绵羊脂肪代谢中的作用机制奠定基础。采用PCR—SSCP技术对阿勒泰羊PLA2G16基因第4外显子的多态性进行了检测，并分析了氨基酸序列和高级结构的变化特征。结果表明，阿勒泰羊PLA2G16基因第4外显子处存在一个G〉A突变，该突变使原来的密码子GAG变为AAG，从而使PLA2G16蛋白第111位的氨基酸残基由谷氨酸变为赖氨酸．蛋白质高级结构预测软件显示该突变可以引起蛋白结构的变化，这可能影响其正常的生物学功能。该结果为进一步探讨PLA2G16基因在阿勒泰羊脂肪代谢中的作用机制，培养低脂肪绵羊品种积淀了数据基础。; 王世银张伟张伟赵伟利刘守仁沈敏周平高磊杨井泉; 关键词：阿勒泰羊 SNP 脂肪沉积

巴什拜羊骨骼肌卫星细胞分离培养及诱导分化被引量：5: 2019年; 为了获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,本研究采集出生1日龄巴什拜羔羊后肢骨骼肌组织,采用两步酶消化法结合差速贴壁法分离纯化巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,并对分离获得的骨骼肌卫星细胞进行了鉴定、传代培养及诱导分化等研究。结果表明,本研究采用的分离纯化方法可以高效获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,RT-PCR检测结果表明骨骼肌卫星细胞标志性基因pax7、Myf5、MyoD、desmin和c-Met均呈阳性表达。获得的骨骼肌卫星细胞具有较强的增殖能力,连续传代12代,细胞的形态仍保持正常,且细胞的克隆形成率仍保持在50%以上,但是当细胞传代至第18代时,逐渐表现出较为明显的衰退。细胞的生长符合典型的"S"型生长曲线,且第2代和第8代细胞的生长曲线没有明显的差异,至第14代时细胞的增殖速度逐渐降低。采用低浓度马血清培养体系,可成功诱导巴什拜羊骨骼肌卫星细胞向肌管方向分化,诱导培养至第5天时,骨骼肌卫星细胞分化标志基因MyHC呈阳性表达。由此得出结论,本研究采用的骨骼肌卫星细胞分离纯化体系高效、可靠,可以满足较高纯度巴什拜羊骨骼肌卫星细胞的分离培养。; 张伟张伟王世银邓双义杨力伟刘晓娜; 关键词：巴什拜羊骨骼肌卫星细胞诱导分化增殖能力

7号染色体46765080位点SNP与绵羊尾臀性状相关性研究被引量：4: 2013年; 绵羊尾(臀)脂性状是重要耐逆性状,其脂肪沉积的分子机制不清。旨在研究绵羊脂尾(臀)沉积脂肪的分子遗传机制,以最近文献报道的7号染色体一处SNP位点为候选分子标记,利用PCR-RFLP方法检测该位点在尾型极端差异的阿勒泰羊、哈萨克羊、湖羊、中国美利奴细毛羊以及萨福克羊群体中的多态性,并采用模型分析其与尾(臀)脂性状的相关性。结果表明,7号染色体46765080位点的G等位基因高频出现在表型分值较高的臀脂型阿勒泰羊群体中,A等位基因在长瘦尾绵羊品种中高频出现;等位基因频率G/A的比值与尾臀表型分值相关性模型表明G/A比值随着尾臀表型分值增加呈指数增长。以上结果表明,绵羊7号染色体46765080位点在尾(臀)脂与瘦尾绵羊群体中分布存在显著性差异,该SNP位点可作为一个理想的分子标记应用于高、低脂绵羊品种选育。; 梁耀伟张伟沈敏李欢高磊杨井泉刘守仁甘尚权王新华; 关键词：阿勒泰羊

Kisspeptins/GPR54神经内分泌系统对哺乳动物生殖活动的调控被引量：7: 2014年; 哺乳动物的生殖活动受到神经内分泌系统的精确调控。近年来的研究表明,KISS-1基因的表达产物Kisspeptins及其G蛋白偶联受体(G protein coupled receptor 54,GPR54)在这一调控网络中发挥着重要作用,与哺乳动物青春期启动、发情排卵及季节性繁殖等过程密切相关。该文就近年来Kisspeptins/GPR54系统对哺乳动物生殖活动调控的研究进展进行简述。; 张伟张伟张伟王世银; 关键词：GPR54 KISS-1 生殖调控

绵羊X染色体59194976位点多态分析及其与尾(臀)脂性状相关性研究被引量：6: 2013年; 尾脂沉积能力在脂尾型绵羊和瘦尾型绵羊间存在很大的差异,但其沉积脂肪的遗传特性与分子机制仍不明晰。为此,本研究选择尾型极端差异的阿勒泰羊(巨型脂臀)、湖羊(短脂尾)和黑萨福克羊(长瘦尾),采用PCR-RFLP方法检测绵羊X染色体59194976位点多态性,分析其与尾(臀)脂沉积能力的相关性。结果表明:在阿勒泰羊群体中G等位基因属优势等位基因,其两等位基因比值(G/A)分别是湖羊和黑萨福克羊的6倍和68倍,且G等位基因在阿勒泰羊中趋于纯合。卡方检验结果表明,阿勒泰羊在该位点均处于HardyWeinberg平衡状态(p>0.05),而湖羊和黑萨福克羊在该位点均处于Hardy-Weinberg极不平衡状态(p<0.01)。以上结果提示,绵羊X染色体59194976位点SNP可作为理想的分子标记应用于高、低脂绵羊品种选育。; 王世银张伟张伟张伟沈敏李欢梁耀伟杨井泉高磊; 关键词：等位基因基因型分子标记

一种辅助鉴定绵羊的脂尾性状的方法及其专用分子标记: 本发明公开了一种辅助鉴定绵羊的脂尾性状的方法及其专用分子标记。本发明提供了一种辅助鉴定待测绵羊群体为哪种脂尾性状的群体的方法，包括如下步骤：（1）从待测绵羊群体中随机抽取具有统计意义的待测样本；（2）检测待测样本中X染色...; 王新华刘守仁甘尚权张伟沈敏周平王立民高磊杨井泉梁耀伟宿俊吉李晓兰王开胜吴向未; 文献传递

与绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记及其应用: 本发明公开了与绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记及其应用。本发明的绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记是SEQ ID No.1的第211-246位所示的36bp的DNA片段。本发明的与绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记及鉴别羊毛超细型...; 甘尚权沈敏王新华刘守仁杨建波梁耀伟高磊杨井泉张伟; 文献传递

与绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记及其应用: 本发明公开了与绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记及其应用。本发明的绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记是SEQ ID No.1的第211-246位所示的36bp的DNA片段。本发明的与绵羊羊毛纤维直径相关的分子标记及鉴别羊毛超细型...; 甘尚权沈敏王新华刘守仁杨建波梁耀伟高磊杨井泉张伟; 文献传递

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

张伟

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

张伟

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈