董婷婷
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：扬州大学园艺与植物保护学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 莲藕中甘薯潜隐病毒实时荧光定量PCR检测技术的建立及应用被引量：7
- 2020年
- 甘薯潜隐病毒莲藕分离物(sweet potato latent virus-lotus,SPLV-lotus)在江苏省莲藕产区普遍引起发病,并且该分离物序列与已报道的SPLV甘薯分离物存在较大差异。为进一步监测SPLV-lotus在莲藕上的发生情况,针对SPLV-lotus的CP基因设计并优化特异性引物QSPLV-lotus3-F/QSPLV-lotus3-R,通过优化引物浓度和退火温度条件,构建标准曲线,建立了SPLV-lotus实时荧光定量PCR(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测技术。该方法特异性强,可以快速检测出SPLV-lotus,灵敏度为普通PCR的100倍,可广泛应用于脱毒莲藕SPLV-lotus的精确检测。
- 贺振董婷婷吴伟文陈雯李良俊
- 关键词：莲藕实时荧光定量PCR
- 江苏莲藕主产区黄瓜花叶病毒病发生分布调查
- 由黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)等引起的病毒病害是限制莲藕产量和品质的重要因素之一.采用酶联免疫吸附法(ELISA),调查了江苏省莲藕主产区CMV的发生分布状况.调查结果表明,43份莲...
- 董婷婷刘娴朱延达吴伟文贺振李良俊
- 关键词：莲藕黄瓜花叶病毒病
- 甘薯潜隐病毒莲藕分离物辅助成分-蛋白酶基因原核表达及抗血清制备
- 2022年
- 根据已报道的甘薯潜隐病毒莲藕分离物sweet potato latent virus-lotus(SPLV-lotus)核苷酸序列设计引物,采用RT-PCR从感病莲藕样品中扩增获得SPLV-lotus辅助成分-蛋白酶基因(HC-Pro),大小为1375 bp。通过序列测定和分析后,将其克隆到原核表达载体pGEX4T-1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导并纯化获得大小为74 kD的融合蛋白pGEX4T-1-HC-Pro^(SPLV-lotus)。SDS-PAGE结果显示,融合蛋白获得过量表达。以纯化蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备抗血清,采用ELISA和Western blot对抗血清效价和特异性进行检测,当HC-Pro抗血清稀释比为1∶256000时,ELISA显色后OD_(450)读数仍高于0.6,表明所制备抗血清合格;Western blot结果显示,在感染SPLV-lotus植株样品中仍能检测到单一目的条带。这些结果表明,制备的抗血清效价合格且可用于SPLV-lotus的特异性检测。
- 王凌琪董婷婷陈雯甘海锋徐小伟秦朗李良俊贺振
- 关键词：原核表达抗血清
- 江苏莲藕主产区黄瓜花叶病毒病发生分布调查被引量：2
- 2017年
- 由黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)等引起的病毒病害是限制莲藕产量和品质的重要因素之一。采用酶联免疫吸附法(ELISA),调查了江苏省莲藕主产区CMV的发生分布状况。调查结果表明,43份莲藕样品中共检测到28份阳性样品,侵染率达65.12%,其中扬州宝应、邗江及苏州吴中地区的检出率依次为75%、58.6%和100%;表现黄化、花叶及皱缩花叶症状的莲藕叶片中CMV的检出率达100%,黄斑、皱缩、斑驳以及无症莲藕叶片中也均有检出,表明CMV在江苏莲藕上发生普遍,且可能产生多种症状类型。
- 董婷婷刘娴朱延达吴伟文贺振李良俊
- 关键词：莲藕黄瓜花叶病毒酶联免疫吸附法
