马建新 作品数:10 被引量:62 H指数:4 供职机构: 中国人民解放军第二炮兵总医院 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
不同基础疾病所致重症肺炎病原体构成及耐药性 被引量:13 2006年 目的 了解不同基础疾病发生重症肺炎病原体构成及对抗菌药物敏感性的差异.方法 2002年1月~2005年6月间,采用VITEK-AMS微生物分析仪检测痰培养阳性的病原菌,纸片法(Kirby-Bauer)检测细菌的体外抗生素药物敏感性.结果 有106例患者,共分离出致病菌173株,结果显示:不同基础疾病的社区获得性重症肺炎病原体构成比与无明显基础疾病的社区获得性重症肺炎有明显不同,吸入性重症肺炎以肺炎克雷伯菌(20.9%)、大肠埃希菌(16.3%)常见;阻塞性重症肺炎以产碱假单胞菌常见(18.9%),铜绿假单胞菌(16.2%)和金黄色葡萄球菌(16.2%)占有一定比例;COPD合并重症肺炎以肺炎克雷伯菌常见(22.6%);金黄色葡萄球菌(18.9%)、铜绿假单胞菌(17.0%)占一定比例,而医院获得性肺炎(HAP)以铜绿假单胞菌(25.0%)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(20.0%)为主.结论 有不同基础疾病所致重症肺炎与无基础疾病的社区获得性肺炎病原体构成比不同,医院获得性肺炎病例中耐药菌显著增加. 闫春连 马建新 张睢扬 王英关键词:重症肺炎 病原体 耐药性 氯霉素抗性融合蛋白报告系统的建立与验证 被引量:1 2005年 利用氯霉素乙酰基转移酶(CAT)N端融合了可溶性蛋白细胞所表现出的氯霉素抗性高于不溶性蛋白这一特点,建立了一种能在大肠杆菌中方便地检测到目的蛋白可溶性的报告系统。以pMalp2X高效表达载体为基础,采用PCR法扩增CAT基因,并通过引物向CAT中引入所需的多克隆位点、终止密码子及linker,将扩增得到的CAT片段插入到pMalp2X中,构建pCAR报道质粒并作测序鉴定;PCR分别扩增IGF1、IL3、Trx基因,连接到pCAR载体上,导入大肠杆菌原核表达系统中进行诱导表达,SDSPAGE分析、氯霉素抗性试验对表达目的蛋白的可溶性和表现出的氯霉素抗性的相关性加以验证。结果显示用该载体表达的重组蛋白的可溶性与氯霉素抗性具有很强的相关性。本报告系统能通过直观的平板氯霉素抗性高低正确指示位于CATN端的目的蛋白的可溶性,为其在生物工程和蛋白质构象相关疾病研究等领域的应用打下了基础。 王爱娥 张睢扬 董书魁 梅开城 马建新 王东霞 王英关键词:蛋白质折叠 可溶性 原核表达 一种亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型的建立 2006年 为建立以多聚谷氨酰胺(polyQ)为靶点的亨廷顿舞蹈症体外药物筛选细胞模型,以随机引物PCR法克隆了不同长度的CAG片段,经序列测定正确后,分别融合到已经建立的氯霉素抗性融合蛋白表达系统pCAR中CAT的N端。重组质粒转化大肠杆菌,并在其中诱导表达,SDS-PAGE和氯霉素抗性平板试验对目的蛋白可溶性与氯霉素活性进行测定。结果显示长度在40以上的polyQ为不溶性包涵体表达,表现为低水平的氯霉素抗性,40以下的polyQ则以可溶形式表达,表现为高水平氯霉素抗性,从而建立起能够模拟亨廷顿舞蹈症病理过程的体外细胞模型。通过检测模型细胞的氯霉素抗性,可以定性、定量地反映polyQ在体内的折叠状态和可溶性,故可以借助该模型对促溶药物或生物活性物质进行高通量筛选,为亨廷顿舞蹈症预防、诊断、治疗提供了新思路。 王爱娥 张睢扬 于新荣 王东霞 王英 马建新 梅开城 闫春莲关键词:蛋白溶解性 细胞模型 经面罩机械通气治疗慢性阻塞性肺病呼吸衰竭 被引量:1 2002年 马建新关键词:呼吸衰竭 经面罩机械通气 慢性阻塞性肺病 NANOGP8基因在肺癌细胞系中甲基化水平与表达研究 2014年 目的:研究NANOGP8基因在肺癌细胞系A549中启动子区域甲基化水平及其与基因表达的相关性。方法:利用MethPrimer甲基化岛预测和甲基化引物设计软件,预测NANOGP8启动子区甲基化位点。分别从人成纤维细胞系和肺癌细胞系中提取基因组DNA,经过亚硫酸氢钠处理后,用针对甲基化位点设计的引物进行PCR扩增,获得相应区段DNA后,连接到pGEM-T载体,转化大肠杆菌鉴定阳性克隆后,测序并与GenBank数据库中NANOGP8基因组DNA序列比对,获得其甲基化水平数据。分别提取两个细胞系的总RNA,RT-PCR获得相应cDNA进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后,经酶切和测序验证,获取其表达水平数据。结果:成功预测NANOGP8的两个区域有甲基化位点,并检测到人成纤维细胞系和肺癌A549细胞系中NANOGP8启动子甲基化水平分别为59.7%和12.5%,表达检测结果显示在A549细胞系中检测到NANOGP8的基因片段,而在人成纤维细胞系中没有扩增到相应产物。结论:在正常成体细胞中NANOGP8基因由于启动子的高度甲基化而沉默,而在肺癌细胞系中NANOGP8基因启动子去甲基化激活其表达。NANOGP8基因的表达与其启动子区域去甲基化密切相关,同时NANOGP8在肺癌细胞分化过程中发挥重要作用。 王爱娥 王英 李朝霞 宋云熙 王东霞 甘乐文 马建新 常艳 张睢扬 江小霞关键词:甲基化 大剂量过敏原对致敏小鼠转录因子T—bet、GATA3表达的作用 被引量:1 2015年 目的观察和比较致敏小鼠及对照小鼠T细胞中T-bet、GATA3两种转录因子mRNA和蛋白表达的差异及大剂量过敏原在体外的作用。方法复制致敏小鼠模型,分离脾脏树突状细胞(Dc)及T细胞。反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)和Western blotting法分别检测致敏小鼠和对照小鼠T细胞转录因子T—bet和GATA3的mRNA及蛋白表达水平。致敏小鼠脾脏DC、T细胞与10g/LOVA或生理盐水共培养后,RT-PCR和Western blotting法分别检测T—bet和GATA3的mRNA及蛋白表达。结果致敏小鼠T细胞T-bet的mRNA及蛋白表达较正常对照小鼠显著降低,而GATA3的表达较对照小鼠显著升高。大剂量过敏原(10g/L的OVA)作用下致敏小鼠T细胞T-bet的mRNA和蛋白表达水平较对照组显著降低,GATA3的mRNA和蛋白表达水平较对照组显著降低。结论致敏小鼠T细胞转录因子T-bet表达减少而GATA3表达增加,大剂量过敏原在体外诱导致敏小鼠T细胞T—bet和GATA3表达减少,其机制可能与诱导调节性T细胞极化等有关。 宋云熙 马建新 王长征关键词:哮喘 GATA3 面罩机械通气效果不佳改气管插管机械通气治疗急性Ⅱ型呼吸衰竭15例临床分析 被引量:2 2004年 目的 探讨面罩机械通气 (MMV)对急性Ⅱ型呼吸衰竭患者疗效不佳的原因。方法 对 15例采用同步间歇性指令通气 (SIMV) +压力支持通气 (PSV) +呼气末正压通气 (PEEP)或PSV +PEEP通气模式进行MMV疗效不佳的急性Ⅱ型呼吸衰竭患者进行气管插管机械通气 (IMV) ,并观测MMV治疗前、IMV治疗前和IMV治疗后动脉血气变化。结果 MMV治疗 15 .7± 12 .7h后患者动脉血气pH进一步下降 ,PCO2 进一步升高 ,与MMV治疗前后比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,但PO2 和SaO2明显回升且差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;改用IMV治疗 8.2± 7.5h后PCO2 明显下降 ,pH、PaO2 和SaO2 明显回升 ,与MMV治疗前、IMV治疗前比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 5~P <0 .0 1)。 11例好转出院 ,4例死亡。结论 面罩机械通气对急性Ⅱ型呼吸衰竭疗效不佳的原因可能与上气道阻塞严重、呼吸频率过快和病情危重有关 。 甘乐文 张睢扬 梅开城 马建新 王东霞 常艳关键词:面罩机械通气 气管插管机械通气 美罗培南在脓毒症及脓毒症休克患者中的PK/PD研究 被引量:16 2013年 目的测定美罗培南在脓毒症和脓毒症休克患者中不同时间的血药浓度,求出不同最小抑菌浓度(minimal inhibitory comentration,MIC)值时%T>4MIC的值及达标概率(probability of target attainments,PTAs),探讨脓毒症及脓毒症休克患者病理生理学的变化对美罗培南药代动力学(pharmacokinetics,PK)的影响。方法选自2012年9月至2013年3月呼吸重症监护病房(respiratory intensive care unit,RICU)中10例脓毒症和脓毒症休克患者,按美罗培南1.0g/2h延长输注法的点滴模型给药。采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定美罗培南给药前和给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8h的血药浓度。按人口学资料中APACHEⅡ评分将10例患者分成轻度和重度脓毒症两组,将测得的时间-血药浓度数据输入药代动力学(PK)软件Winnonlin5.2求出各例患者的药代动力学参数。使用CrystalBall软件按PK/PD(药效学)模型进行蒙特卡罗模拟(monte carlo simulation,MCS)计算出美罗培南%T>4MIC的值及达标概率(PTAs)。结果当MIC分别为0.5、1、2、4、8μg/ml时,10例患者的平均%T>4MIC(%)值分别为124.04±39.02、99.83±32.01、73.26±24.67、46.97±16.87、14.85±8.31。轻度脓毒症组分别为172.19±11.51、138.88±8.79、105.57±7.41、71.70±5.59、36.93±4.37;重度脓毒症组分别为81.77±13.20、63.31±10.34、45.37±7.07、26.70±4.33、6.82±1.75。不同MIC值时总体组的达标概率分别为100%、99.7%、96.0%、62.5%、0.93%。轻度组达标概率分别为100%、100%、100%、100%、24.5%;重度组分别为100%、99.8%、75.7%、0.9%、0.0%。结论脓毒症和脓毒症休克患者病理生理的变化改变了抗生素的药代动力学和药效学,轻度组和重度组的药代动力学有明显差异,当MIC=4.0μg/ml时,重度组%T>4MIC的值仅为26.70±4.33,需要加大药物剂量或/和增加药物给药次数。当MIC=8.0μg/ml时无论轻、重组均不达标,需加大药物剂量或/和增加药物给药次数。 牛莎 张睢扬 王英 王东霞 马建新关键词:美罗培南 病理生理 蒙特卡罗模拟法 成人脓毒血症患者不同负荷剂量的亚胺培南/西司他丁药动学/药效学参数差异的研究 被引量:16 2013年 目的比较成人脓毒血症患者2h静脉泵入负荷量1.0g与2.0g亚胺培南/西司他丁的%T>4×最低抑菌浓度(MIC),为制定亚胺培南/西司他丁在成人脓毒血症患者的合理用药方案提供参考。方法对10位脓毒血症的患者随机分为实验组和对照组各5例。实验组受试者接受方案1给药即1.0g亚胺培南/西司他丁2.0h静脉泵入;对照组受试者接受方案2给药即2.0g亚胺培南/西司他丁2h静脉泵入。在给药前和给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8h抽取静脉血标本测定血药浓度。结果试验组对病原菌MIC为4、2、1mg/L的%T>4×MIC分别为分别为(19.89±4.10)%,(44.66±5.56)%,(68.97±7.47)%。对照组对病原菌MIC为4、2、1mg/L的%T>4×MIC分别为(53.34±7.54)%,(79.45±8.66)%,(105.87±11.14)%。结论①结果提示2h静脉泵入负荷量2.0g亚胺培南/西司他丁的%T>4×MIC值超过静脉泵入1.0g;②随MIC值增加,%T>4×MIC呈下降趋势,对于MIC=4.0mg/L的高病原菌感染,可采用亚胺培南/西司他丁负荷剂量2.0g2h给药。 张娟娟 王英 张睢扬 马建新 王东霞 甘乐文关键词:脓毒血症 亚胺培南 西司他丁 慢性阻塞性肺疾病急性加重机械通气治疗后酸碱平衡状态及电解质的变化 被引量:15 2013年 目的研究机械通气后代谢性碱中毒及电解质紊乱的发生状况,探讨恰当的处理方法,旨在提高慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)机械通气技术的临床应用水平,并提高AECOPD抢救的成功率和改善慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的预后。方法回顾性分析伴Ⅱ型呼吸衰竭的AECOPD并使用机械通气的患者62例,并分为无创通气(35例)和有创通气(27例)二组,观察比较二组患者使用机械通气前、机械通气后1h、2h、3h、24h、72h及通气结束后的动脉血气及Na+、K+、Ca2+变化。结果二组患者使用机械通气后呼吸性酸中毒明显改善。无创通气组通气3h时出现6例失代偿期碱中毒(17.14%),通气72h后有22例(62.86%)患者出现代谢性碱中毒(包括代偿期和失代偿期),其中失代偿期碱中毒7例(25.93%),达碱中毒高峰。有创通气组在通气2h出现7例失代偿期碱中毒(25.93%),通气3h后即出现21例(77.77%)代谢性碱中毒,其中失代偿期碱中毒9例(33.33%)。二组在通气前Na+低于正常,且K+高于正常值,通气结束后恢复正常。比较24h时碱中毒者与无酸碱平衡紊乱者的电解质,发现碱中毒者K+、Ca2+低于无酸碱紊乱者。结论机械通气用于治疗伴II型呼吸衰竭的AECOPD患者疗效肯定。机械通气后由于二氧化碳排出过快往往导致高碳酸血症呼出后代谢性碱中毒的发生,同时引起电解质钾、钙的降低。有创机械通气较无创机械通气代谢性碱中毒出现早。 李慧平 张睢扬 王英 马建新 王东霞关键词:肺疾病 慢性阻塞性 急性加重 无创机械通气 有创机械通气 代谢性碱中毒 电解质紊乱