张宇
- 作品数:21 被引量:42H指数:3
- 供职机构:中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金协和青年科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生自动化与计算机技术环境科学与工程交通运输工程更多>>
- 药物超敏反应的体外检测被引量:1
- 2013年
- 药物引起的超敏反应(drughypersensitivityreactions)约占药物不良反应的15%,分为免疫性及非免疫性机制介导两种。非免疫反应机制为药物直接刺激效应细胞产生过敏介质引起临床症状。免疫性机制由获得性免疫系统介导,可检测到特异的免疫反应细胞及炎症因子,再次暴露于致敏药物后可引发相同症状。因为较难获得准确病史及超敏反应的复杂性,临床诊断药疹困难重重且易被误诊及忽略。
- 张宇姚煦王宝玺
- 关键词:药物不良反应超敏反应体外检测非免疫性免疫反应细胞临床症状
- 细胞周期抑制剂PD0332991对小鼠造血干/祖细胞生物学活性的影响被引量:1
- 2014年
- 目的探讨细胞周期抑制剂PD0332991(C24H29N702)对造血干/祖细胞(HSPC)生物学行为的影响。方法利用多抗体标记,再分别用Hoechst 33342染色和FITC-AnnexinW7-AAD标记流式细胞术检测PD0332991作用前后小鼠骨髓造血干细胞(HSC,Lin-C-kit+Sca-1+表型细胞)及造血祖细胞(HPc,Lin-C-kit’细胞)的周期分布及细胞凋亡率;利用实时荧光定量PCR法分析PD0332991作用后HSC细胞周期相关基因、凋亡相关基因及自我更新相关基因mRNA表达水平;利用极限稀释培养法检测PD0332991作用前后HSC自我扩增水平的变化;用半固体培养法观察PD0332991对小鼠正常HPC集落形成能力的影响。结果与未处理组相比,PD0332991处理后小鼠骨髓HSC的G。期细胞明显增多,由76.3%增加至89.5%(P〈0.05),S、GYM期明显减少,由20.5%降低至7.3%(P〈0.05);HPC的G。期细胞也明显增多,由74%增加至87.4%(P〈0.05),S、G:/M期细胞明显减少,由25.4%降低至11.6%(P〈0.05)。PD033299处理的小鼠骨髓HSPC早期凋亡率均为7%左右,与对照组相比差异无统计学意义(P〉0.05)。小鼠骨髓HSC经PD0332991处理后,细胞周期相关基因CDKl、CyclinA2、CyclinF、p18、p19、p27表达水平与对照组相比分别降低了58.8%、66.4%、56.3%、62.2%、32.3%和36.5%,CDK7表达上调27.3%(P〈0.05),凋亡相关基因及自我扩增相关基因表达均无明显变化。与对照组相比,PD0332991处理过的小鼠骨髓HSC与自我扩增相关的鹅卵石样区域形成细胞出现频率明显下降、HPC的造血集落形成能力下降。结论PD0332991可明显阻滞正常小鼠HSPC的细胞周期进程,抑制其自我扩增,但对其凋亡没有明显影响。
- 纪庆祁瑞哲张丽艳张宇许静袁卫平程涛高瀛岱
- 关键词:造血干细胞细胞周期抑制剂细胞周期
- 特应性皮炎小鼠模型构建方法综述
- 张宇姚煦
- 泛发性发疹性皮肤胶原瘤1例被引量:1
- 2012年
- 临床资料患儿男,19个月。因臀部密集皮色丘 疹19个月,泛发全身6个月,于2011年7月来我院就诊。患者出生时臀部存在大片密集皮色米粒大丘疹,无搔抓等不适,从未消退,后皮疹逐渐增多,渐扩展至躯干、四肢。
- 张宇姚煦刘军
- 关键词:胶原瘤发疹性泛发性皮肤出生时皮色
- C型凝集素受体树突细胞特异性捕获细胞间黏附分子3非整合素细胞表达模型的构建及功能研究被引量:3
- 2014年
- 目的构建C型凝集素受体树突细胞特异性捕获细胞间黏附分子3非整合素(DC—SIGN)细胞表达模型,为后续进行DC—SIGN蛋白受体功能研究提供基础。方法PCR扩增获得DC—SIGN分子的cDNA,克隆入真核表达载体P巨细胞病毒启动子-绿色荧光蛋白重组质粒(PCMV—EGFP),EGFP位于Dc—SIGNN末端,转染人胚肾细胞癌I-IEK293T细胞后,流式细胞仪检测DC—SIGN重组分子的表达,激光共聚焦显微镜检测DC—SIGN—EGFP融合蛋白的细胞定位情况,并进一步检测转染表达的DC—SIGN受体对过敏原抗原的识别和内吞过程。结果构建的荧光融合蛋白重组表达质粒,经PCR及Western印迹证明DC—SIGN表达成功;经流式细胞仪检测转染DC—SIGN融合质粒的HEK293T细胞的DC—SIGN受体表达量增多(约50%)。重组表达质粒转染293T细胞后,激光共聚焦显微镜检测显示,绿色荧光标记的DC—SIGN位于细胞膜上,可结合红色荧光素标记的过敏原抗原Derp2,并可将Derp2内吞人细胞内。结论构建的DC—SIGN—EGFP融合蛋白在293T细胞内表达后具有细胞表面受体分子的特征性分布,可被DC—SIGN特异性抗体识别并具有摄取过敏原功能,是研究DC—SIGN分子功能的理想细胞模型。
- 张宇姚煦顾汉艳王宝玺刘军
- 关键词:受体有丝分裂原重组融合蛋白质类
- 单纯疱疹病毒包膜糖蛋白gC合成及验证被引量:1
- 2014年
- 目的 利用基因工程技术表达单纯疱疹病毒(HSV)包膜糖蛋白(gC)并进行验证.方法 分两段合成gC蛋白,分别合成基因GC-F和GC-R,并分别将基因亚克隆进pSumo-Mut(含Stu Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点)和pCzn1(含Nde Ⅰ和XhoI酶切位点)表达载体,获得pSumo-Mut-GC-F和pCzn 1-GC-R质粒.将两重组质粒转化ArcticExpress^TM(DE3)原核宿主菌,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,经Ni柱亲和纯化,最终获得高纯度蛋白.采用Western印迹法检测重组GC-F和GC-R两段蛋白与HSV IgG的结合情况.结果 应用全基因合成方法获得GC-F和GC-R基因片段,经SDS-PAGE鉴定分析,主要分布于沉淀层,经亲和层析后获得的蛋白纯度在80%以上,并可被人抗HSV-1抗体(IgG)阳性血清识别.结论 利用基因工程技术构建融合表达载体,并经IPTG诱导成功表达gC蛋白,与HSV-1感染血清反应阳性,是后续进行功能研究的理想实验材料.
- 张宇姚煦顾汉艳王宝玺刘军
- 关键词:湿疹单纯疱疹病毒属包膜糖蛋白
- 继发性冷球蛋白血症1例被引量:1
- 2013年
- 冷球蛋白血症分单克隆性冷球蛋白血症和混合性冷球蛋白血症,是指血清中含有一种或多种免疫球蛋白,这些免疫球蛋白是在温度低于37℃时沉淀,复温后溶解的蛋白。这一现象是体外实验的结果,关于冷沉淀作用的机制目前还不清楚。现将笔者诊治的1例继发性冷球蛋白血症报道如下。
- 张宇温志华靳雅丽姚煦
- 关键词:冷球蛋白血症继发性免疫球蛋白体外实验混合性复温后
- 电子健康档案数据挖掘在临床科研中的应用
- 本文中,首先介绍了一个可开放获取的电子健康档案数据库—MIMIC,之后阐述电子健康档案数据挖掘在临床科学研究中的应用,包括患者分层和患者招募、流行病学研究、预测模型研究、效果对比研究和药物替戒等。最后,我们对电子健康档案...
- 张宇那旭李姣
- 关键词:电子健康档案数据挖掘流行病学
- 海藻糖对过氧化氢诱导M14黑素瘤细胞氧化损伤的保护作用被引量:2
- 2015年
- 目的:确定海藻糖对过氧化氢诱导的M14黑素瘤细胞损伤的保护作用。方法:不同浓度过氧化氢处理后的M14黑素瘤细胞加入0.5μg/mL、1μg/mL、10μg/mL海藻糖,采用MTT法检测各组细胞存活率,嘌呤氧化酶法检测处理前后超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:浓度为1μg/mL的海藻糖抗氧化作用明显,可提高低浓度过氧化氢(小于400μmol/L)损伤后的M14黑素瘤细胞存活率约33%,可提高SOD活力约20%。当过氧化氢浓度大于400μmol/L时,各浓度海藻糖对提高细胞存活率无明显作用。结论:1μg/mL海藻糖对低浓度(小于400μmol/L)过氧化氢诱导的M14黑素瘤细胞损伤具有保护作用。
- 张宇王宝玺姚煦李诚让
- 关键词:过氧化氢氧化应激海藻糖
- C型凝集素受体Langerin的细胞表达模型构建及功能研究
- 2015年
- 目的 构建朗格汉斯细胞特异性C型凝集素受体Langerin体外细胞表达模型.方法 PCR方法获得Langerin分子的cDNA,克隆入真核绿色荧光蛋白(EGFP)表达载体pEGFP-C1(EGFP位于Langerin的N末端),转染人肾胚细胞癌HEK 293T细胞后,激光共聚焦显微镜检测EGFP-Langerin融合蛋白的细胞表达情况,流式细胞仪检测Langerin受体的表达,并进一步检测转染表达的Langerin受体对尘螨抗原(nDerp 2)的识别和内吞情况.结果 构建的荧光融合蛋白重组表达质粒转染HEK 293T细胞后,经PCR及Western印迹检测证明Langerin转染及表达成功.重组表达质粒转染HEK293T细胞后,经流式细胞仪检测转染Langerin融合质粒的HEK293T细胞的Langerin受体表达率较转染前增多约43%,经激光共聚焦显微镜检测显示绿色荧光标记的Langerin成功表达,并可与红色荧光素标记的尘螨抗原(nDerp 2)结合,将nDer p 2内吞入细胞内.结论 构建的EGFP-Langerin融合蛋白在HEK293T细胞内表达后具有细胞表面受体分子的特征性分布,具有结合、内吞过敏原功能.
- 张晓宁张宇罗阳李巍姚煦
- 关键词:树突细胞重组融合蛋白质类HEK293细胞