丁伟
- 作品数：15 被引量：215H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海-联合利华研究与发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- PPARγ2诱导脂肪细胞分化相关基因的克隆及鉴定被引量：5
- 2001年
- 目的分离和克隆小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ2 (mPPARγ2 )诱导脂肪细胞分化的相关基因。方法在体外建立mPPARγ2诱导NIH3T3成纤维细胞分化成脂肪细胞模型基础上 ,采用mRNA差异显示技术分离、克隆PPARγ2诱导的脂肪细胞高表达或低表达的cDNA片段 ,再通过半定量RT—PCR证实。 结果经mRNA差异显示技术分离到 2 0条差异显示片段 ,进一步对差异显示片段进行PCR扩增、T/A亚克隆及测序分析 ,与GenBank基因数据库比较后 ,得到 8个已知基因 ,一条新基因序列 ,2个EST序列和 7个新的EST序列。半定量RT—PCR结果显示UNR基因在PPARγ2诱导的脂肪细胞中表达上调 ,而凋亡抑制因子 5 (API5 )的表达则下调。
- 李果左祥生丁伟骆天红李纪平罗敏
- 关键词：PPARΓ2MRNA差异显示基因克隆CDNA脂肪细胞分化
- 24h尿液18-羟皮质醇ABC-ELISA的建立被引量：3
- 2002年
- 目的建立 2 4h尿液 18-羟皮质醇亲合素 -生物素酶联免疫测定法 (ABC -ELISA)。 方法制备18-羟皮质醇抗血清 ,以此建立 18-羟皮质醇竞争性ABC -ELISA ;同时测定部分正常人、原醛腺瘤、原醛特发性增生病人 2 4h尿液 18-羟皮质醇水平。 结果抗血清的效价为 1∶30 0 0 0 ,交叉反应性除皮质酮为 0 .0 2 % ,其余均小于0 .0 1% ,批内差异为 7.8%～ 8.2 % ,批间差异为 9.9%～ 12 .1% ,平均回收率为 10 1.3% ,平行测定相关系数为 0 .9939(P <0 .0 1) ,最低可测定限为 10nmol/L ,正常参考值为 2 84 .7～ 16 9.2nmol/2 4h。原醛腺瘤组尿液 18-羟皮质醇明显高于原醛增生组、原发性高血压组和正常组 (P <0 .0 5 ) ,后三组之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 结论本方法具有简便、灵敏、稳定等特点 ,可准确反应机体 2 4h
- 刘礼斌丁伟罗伟宓志均许曼音陈家伦
- 关键词：酶联免疫测定原发性醛固酮增多症
- PPARγ2诱导脂肪细胞分化相关基因克隆及鉴定
- 目的:在体外建立PPARγ2诱导脂肪细胞分化模型基础上,分离和克隆与PPARγ2诱导脂肪细胞分化的相关基因,为进一步揭示PPARγ2诱导脂肪细胞分化的分子机制提供理论依据.方法:采用分子克隆、基因转染、逆转录包装及感染靶...
- 李果左祥生骆天红丁伟王晓李纪平刘斌罗敏
- 文献传递
- 甲状腺激素对新生鼠脑NOS基因表达的调节被引量：2
- 2000年
- 目的观察不同日龄新生鼠脑一氧化氮 (NO)含量 ,一氧化氮合酶 (NOS)活性的变化及甲状腺激素对nNOS基因表达的调节。 方法采用丙基硫氧嘧啶 (PTU)灌注孕母鼠造成甲减模型。采用NO、NOS的生化测定法以及半定量逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)。 结果生化测定法显示 ,不同年龄段大鼠随着年龄的增加NO含量上升 (P <0 .0 1) ,NOS的活性上升 (P <0 .0 1) ;同一年龄段仔鼠 ,甲减组较正常组NO含量下降 (P <0 .0 1) ,NOS活性下降 (P <0 .0 1) ;RT -PCR测定显示 ,幼鼠nNOSmRNA水平随着年龄的增加而上升 ;同一年龄组 ,甲减组较正常组nNOSmRNA表达下降。 结论提示甲状腺激素对nNOSmRNA表达有上调作用 ;
- 陈源罗敏蔡东升丁伟陈刚宗阳
- 关键词：甲状腺激素新生鼠脑损害甲状腺机能减退
- IA-2基因的克隆及原核表达研究被引量：1
- 2001年
- 目的 应用基因工程技术获取足量且具有免疫活性的IA 2重组蛋白 ,为建立IA 2抗体检测方法奠定基础。方法 通过逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)法从小鼠脑组织RNA中扩增编码IA 2胞内结构域的cDNA ,构建表达型重组质粒 ,经DNA序列分析确证后 ,在大肠杆菌中表达 ,用亲和层析纯化融合目的蛋白 ,并以斑点印迹技术 (Dotblot)鉴定其免疫原性。结果 所获特异PCR产物正确重组至PinpointXa 1表达载体中。经异丙基硫代半乳糖苷诱导的原核表达及亲和层析得到了纯度较高、相对分子质量约 5 6 0 0 0的融合目的蛋白 ,表达量约 1mg蛋白 /升菌液 ,且表达产物与谷氨酸脱羧酶抗体阳性的糖尿病患者血清及健康对照血清发生的显色反应差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 原核表达的IA 2融合蛋白具有免疫学活性 ,可用于糖尿病患者血清中相关抗体的检测。
- 宗阳罗敏丁伟金群燕陈源陈刚蔡东升刘优萍谢超
- 关键词：自身抗原基因表达糖尿病DM
- 甲状腺激素对新生期大鼠下丘脑Go蛋白α亚单位的影响被引量：4
- 1999年
- 目的 研究新生期Ｗｉｓｔａｒ 大鼠下丘脑Ｇｏ 蛋白α亚单位（Ｇｏα） 的分布及甲状腺激素对其表达的影响。方法 采用地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术，对新生期正常及甲减Ｗｉｓｔａｒ 大鼠下丘脑ＧｏαｍＲＮＡ 的表达状况进行研究。结果 （１）ＧｏαｍＲＮＡ 主要分布于新生期Ｗｉｓｔａｒ 大鼠下丘脑的弓状核（ＡＲ）、腹内侧核（ＶＭＨ）等部位；（２）２１ 日龄组大鼠下丘脑诸核团ＧｏαｍＲＮＡ 的转录水平明显低于１４ 日龄组；（３） 甲状腺功能低下可引起１４ 日及２１ 日龄大鼠下丘脑ＡＲ、ＶＭＨ 核团ＧｏαｍＲＮＡ水平显著升高。结论 在大鼠下丘脑的发育过程中，信号蛋白Ｇｏα基因呈现特征性分布及表达，甲状腺激素对该基因具有转录下调作用。
- 蔡东升罗敏陈源丁伟陈刚金群燕笪翠娣陈家伦
- 关键词：甲状腺激素原位杂交新生大鼠下丘脑
- 2型糖尿病大鼠模型的建立及其糖代谢特征分析被引量：170
- 2002年
- 目的 建立一种接近于人类普通型 2型糖尿病大鼠模型。方法 8周龄SD大鼠高热量饮食喂养 2个月后给予小剂量STZ建立 2型糖尿病模型 ,然后进行胰岛素 葡萄糖耐量试验、胰岛免疫组化及其图像分析 ,并与大、小剂量STZ、单纯高热量饮食等各组大鼠相应指标比较。结果 高热量饮食一段时间后给予小剂量STZ的大鼠模型外周胰岛素敏感性降低 ,胰岛素合成和分泌相对于单纯高热量饮食组大鼠降低 ,但仍高于正常对照组。结论 该模型大鼠具有外周胰岛素抵抗和胰岛功能仅轻微受损等特征 ,具有类似人类 2型糖尿病的临床表现 。
- 张芳林李果刘优萍丁伟殷峻许光武张迪周文中罗敏
- 关键词：实验性糖尿病糖代谢大鼠模型
- 血浆18-羟皮质醇亲和素-生物素酶联免疫测定方法的建立
- 2000年
- 本文用自制 18-羟皮质醇抗血清 ,建立血浆 18-羟皮质醇竞争性 ABC- EL ISA。同时测定部分正常人、原发性醛固酮增多症 (原醛 )和原发性高血压病人血浆 18-羟皮质醇水平。结果该方法批内变异为 6 .6 %～ 8.1% ,批间变异为 11.3%～ 12 .2 % ,平均回收率为 10 2 .1% ,最低可测定限为 0 .42 nmol.L- 1 ,正常参考值为 3.0± 1.7nmol.L- 1。原醛腺瘤组血浆 18-羟皮质醇明显高于原醛增生组 ,原发性高血压组和正常组 (P<0 .0 5 ) ,后三组之间无显著性差异 (P>0 .0 5 )。鉴于本法具有简便、灵敏、稳定等特点 。
- 刘礼斌丁伟宓志均宓志均许曼音
- 关键词：血清诊断ABC-ELISA
- 正常人和原发性醛固酮增多症病人18-羟皮质醇水平动态变化临床观察
- 目的:观察ACTH和肾素-血管紧张素系统对健康人和原发性醛固酮增多症病人18-羟皮质醇的影响.方法:测定8例健康人和12例原发性醛固酮增多症病人(包括腺瘤和特发性增生)24小时血浆18-羟皮质醇的节律性和1毫克地塞米松试...
- 刘礼斌丁伟宓志均许曼音陈家伦
- 文献传递
- 24小时尿液18-羟皮质醇亲合素-生物素酶联免疫测定方法的建立
- 目的:建立24小时尿液18-羟皮质醇亲合素-生物素酶联免疫测定法(ABC-ELISA).方法:制备18-羟皮质醇-肟和18-羟皮质醇-肟-牛血清白蛋白,通过免疫动物制备18-羟皮质醇抗血清,以些建立18-羟皮质醇竞争性A...
- 刘礼斌丁伟宓志均许曼音陈家伦罗伟
- 文献传递
