康晓楠
- 作品数:56 被引量:204H指数:8
- 供职机构:上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 肝病相关血清蛋白质分子标记物研究和新型稳定同位素标记物在定量蛋白质组研究中的应用评价
- 一、原发性肝癌的早期诊断在提高病人生存率,改善生存质量具有重要意义。差异定量蛋白质组学是从蛋白质水平上发现疾病早期标记的有效方法之一。血清作为最易获得的临床样本蕴含丰富的机体信息分子,利用表面增强激光辅助点理解吸附质谱技...
- 康晓楠
- 关键词:血清蛋白质分子标记物
- 文献传递
- 多重定量抗体芯片检测系统在肝癌早期诊断中的应用被引量:6
- 2012年
- 目的利用多重定量抗体芯片同时检测肝细胞癌(HCC)及肝硬化患者血清中肿瘤相关血清学标志物的水平,建立HCC早期诊断模型,以提高HCC早期诊断的准确度。方法运用双抗体夹心原理建立了相关指标的多重定量抗体芯片检测系统,8种肿瘤相关血清学标志物作为芯片检测目标:甲胎蛋白(AFP)和7种细胞因子包括肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、白细胞介素6、白细胞介素8、白细胞介素10、转化生长因子β1和血管内皮生长因子。应用该系统检测临床确诊的160例HCC和58例肝硬化(LC)患者血清,随机抽取其中60%为训练集(HCC96人;LC36人),40%为测试集(HCC64人;LC22人),通过对结果和临床资料进行回顾性研究,应用SPSS软件做logistic回归分析,利用训练集创建诊断模型,获得受试者工作曲线(ROC曲线下面积以及cutoff值,并在测试集中验证模型的诊断价值。结果AFP联合7种细胞因子在训练集中诊断的敏感度为93.3%,特异度为83.3%,准确度为90.9%;而在测试集中敏感度为89%,特异度为77.3%,准确度为86%,传统血清AFP值(cut off值为20ng/ml)诊断的敏感度为70%,特异度为59%,准确度为64%。结论多重定量抗体芯片检测系统具有较高敏感度和特异度,AFP联合7种细胞因子诊断模型对肝癌早期诊断优于传统AFP,具有潜在的临床应用价值。
- 高东梅孙璐郭坤李岩刘银坤康晓楠
- 关键词:肝细胞甲胎蛋白类
- 噬菌体肽库中筛选NMDA受体抗原表位被引量:1
- 2003年
- 为了获得人N 甲基 D 天冬氨酸受体 (NR)主亚基 (NR1)M3 M4环B细胞表位 ,以人NR1分子M3 M4环单克隆抗体MAB36 3淘筛噬菌体展示随机 12肽库 ,对筛选克隆进行特异性ELISA检测和竞争结合实验分析 .从 30个克隆中得到一个阳性克隆序列“VHTNPSTWQPIL” (克隆 1) ,原核表达的NR1M 3 M 4环可以与克隆 1竞争结合MAB36 3.固相合成 5个表位探针短肽 ,发现其中只有R (2 2 )LRNPSKD可以与M3 M4环竞争结合抗体 ,将NPS三个氨基酸残基逐一敲除 ,缺失N或NP的合成肽和M 3 M 4环竞争抗体的能力减弱 ,缺失NPS的合成肽完全没有竞争能力 ,证明MAB36 3的表位为NPS ,S可能是关键性残基 .
- 康晓楠孙长凯范明薛沿宁邵宁生赵杰韩大跃施广霞
- 关键词:噬菌体肽库NMDA受体抗原表位
- 肝癌时糖蛋白聚糖结构的变化被引量:5
- 2008年
- 蛋白质糖基化是一种常见的翻译后修饰,几乎50%的蛋白质都被认为具有糖基化修饰.糖基化作用产生大量聚糖,其结构变化与许多生理和病理过程相关,恶性肿瘤的发生侵袭就是其中之一.本文对糖蛋白聚糖的结构和功能进行描述,并且举例说明与肝癌相关的某些糖蛋白聚糖结构的变化.
- 张舒康晓楠刘银坤
- 关键词:糖基化癌症肝癌
- 肝癌转移相关的骨桥蛋白表达及其糖基化的改变被引量:5
- 2011年
- 目的检测骨桥蛋白(OPN)在不同转移潜能肝癌细胞株及肝癌组织中的蛋白表达水平及其糖基化水平,探讨OPN糖基化改变与肝癌转移的相关陛及其意义。方法用免疫组织化学和Westemblot法检测人肝癌组织(非转移组6例、转移组7例)及不同转移潜能人肝癌细胞株(L02、Hep3B、MHCC97L、MHCC97H、HCCLM3、HCCLM6)中OPN蛋白水平l采用免疫沉淀技术纯化肝癌组织中的OPN蛋白,并采用多重凝集素印迹技术检测转移与非转移肝癌组织中OPN糖基化水平差异。数据统计采用t检验和方差分析。结果OPN在不同转移潜能肝癌细胞株的表达差异具有统计学意义(F=5.04,P〈0.01)。在肝癌组织中,转移组OPN蛋白表达水平明显高于非转移组(t=2.447,P〈0.05),相对吸光度值分别为0.69±0.21和0.45±0.14。免疫沉淀技术成功纯化肝癌组织中的OPN蛋白,后续的凝集素印迹结果显示:与非转移组相比,转移组OPN蛋白对凝集素朝鲜槐、红腰果E型、蔓陀罗、刀豆素A的亲和力较低(P值均〈0.05)。结论OPN蛋白表达水平与肝癌转移潜能增强呈正相关;OPN蛋白的α2,3-唾液酸、平分型GlcNAc、多天线、偏二天线的糖链、高甘露糖型N一糖等糖基化水平改变可能与肝癌转移潜能增高有关。
- 孙海艳李岩郭坤康晓楠孙淳王存刘银坤
- 关键词:肿瘤转移糖基化凝集素类骨桥蛋白
- 应用SELDI-TOF-MS技术初步建立子宫内膜异位症诊断模型被引量:2
- 2008年
- 目的:分析子宫内膜异位症(EMs)患者血清差异蛋白谱,初步建立EMs的诊断模型。方法:采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,用弱阳离子交换芯片(WCX2)和分析软件对79例EMs(EMs组)及72例非EMs妇女(对照组)血清样品进行检测,在不同的月经周期中分别筛选差异蛋白,建立诊断模型并进行盲法验证。结果:在质荷比(m/z)2000-30000的范围内,得到16个有统计学差异(P<0.01)的差异蛋白,进一步按月经周期分期分析,增生期和分泌期分别得到3个和6个有统计学差异的蛋白峰。增生期所建的诊断模型敏感性和特异性分别为94.3%和97.1%。盲筛结果敏感性为90.7%,特异性为93.0%,阳性预测值为92.9%,阴性预测值为90.9%。结论:利用增生期血清样品建立的诊断模型敏感性和特异性高,对EMs临床诊断和发病机理的理解具有重要意义。
- 胡芬张炜康晓楠刘银坤
- 关键词:蛋白芯片蛋白质组
- N-甲基-D-门冬氨酸受体重组肽抗血清对谷氨酸兴奋毒性导致神经元坏死和凋亡的保护作用被引量:2
- 2003年
- 目的 观察N 甲基 D 门冬氨酸受体 (NMDAR ,NR)主亚基 (NR1)M3M4环重组肽自身抗血清对不同浓度谷氨酸诱导的神经元死亡的保护作用。方法 用NR1M3M4环重组肽免疫Balb/C(H 2 d)小鼠制备抗血清 ,用锥虫蓝染色法和原位末端标记 (TUNEL)法观察抗血清对原代培养海马神经元兴奋毒性坏死和凋亡的保护效应。结果 在高浓度谷氨酸 (5 0 0 μmol/L)条件下 ,阳性抗血清可以使神经元坏死减少 16 % ;在低浓度谷氨酸 (5 0 μmol/L)作用下 ,阳性抗血清保护可使神经元凋亡率减少 13%。结论 NMDAR重组肽自身免疫抗血清具有抗兴奋毒性作用 ,这一结论为免疫防治兴奋毒性脑损伤策略的建立提供了坚实的体外基础。
- 康晓楠孙长凯朱克范明丁爱石马清钧石成华赵杰韩大跃王耀山施广霞包礼平
- 关键词:N-甲基-D-门冬氨酸受体谷氨酸兴奋毒性神经元
- 傅里叶变换红外光谱分析NMDA受体单克隆抗体抗兴奋毒损伤机理被引量:3
- 2003年
- 人N 甲基 D 门冬氨酸受体 (NMDAR ,NR)单克隆抗体MABN1具有明确的抗兴奋毒保护作用 ,但其机制不明 .以MABN1和MK 80 1分别预处理海马细胞 ,拮抗谷氨酸兴奋毒损伤作用 ,采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)技术 ,对不同处理后的海马细胞红外光谱特性进行比较 .将去卷积的酰胺Ⅰ带进行曲线拟合后发现 ,MABN1组与MK 80 1组的蛋白质二级结构有明显不同 。
- 康晓楠孙长凯范明宋占军赵杰王吉庆施广霞
- 关键词:NMDA受体单克隆抗体海马神经元中枢神经系统
- 一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法
- 本发明提供了一种三维转移性肝癌类组织体外模型的构建方法,其特征在于,具体步骤为:将高转移人肝癌细胞系MHCC97H在RWV生物反应器与生物支架PLGA(聚乙醇酸-乳酸共聚物)结合的三维旋转培养体系中连续培养15天形成转移...
- 崔杰峰刘银坤唐建华陈荣新徐长德康晓楠郭坤
- 文献传递
- 应用SELDI-TOF-MS技术建立小肾癌的血清蛋白质谱筛选模型被引量:1
- 2008年
- 目的探讨SELDI-TOF-MS技术在小肾癌的筛查诊断中的应用。方法收集了111例血清标本,分别为小肾癌患者30例,肾脏良性肿瘤34例,健康人47例。应用SELDI-TOF-MS技术获得所有患者的IMAC-Cu2+蛋白芯片的表达图谱,随机采用19例小肾癌患者和26例健康人的血清蛋白质谱建立决策树模型,并用其余11例小肾癌患者和21例健康人进行双盲验证;再随机采用21例小肾癌患者和16例肾脏良性肿瘤患者的血清蛋白质谱建立决策树诊断模型,并用余下9例小肾癌和18例肾脏良性肿瘤患者的血清标本进行双盲验证。结果小肾癌与健康人的决策树诊断模型的敏感性和特异性均为100%,双盲验证后的敏感性和特异性分别为81.8%(9/11)和100%(21/21)。小肾癌与肾脏良性肿瘤的决策树诊断模型的敏感性为95.2%(20/21),特异性为100%(16/16),双盲法验证后的敏感性为77.8%(7/9),特异性为88.9%(16/18)。结论本次试验中建立的两个决策树有望通过进一步的验证用于肾癌的早期诊断和鉴别诊断中。在质荷比分别为15282.4、4215.96这2个蛋白峰中可能会发现肾癌的特异性肿瘤标记物。
- 徐罡项翠琴陆晔康晓楠王文静廖萍张元芳
- 关键词:肾癌蛋白质组学血清