王洋
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
- 供职机构：哈尔滨市食品药品检验检测中心更多>>
- 发文基金：中医药行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 哈蟆油药材基因组DNA提取方法的比较被引量：3
- 2018年
- 目的：建立一种适合于哈蟆油药材基因组DNA的提取方法,为该药材的后续分子鉴定奠定基础。方法：采用十二烷基硫酸钠（SDS）法,改良SDS法,Chelex-100法,异硫酸氰胍（Gu SCN）法,试剂盒法及改良试剂盒法提取哈蟆油基因组DNA,利用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法及细胞色素C氧化酶Ⅰ（COⅠ）序列的引物聚合酶链式反应（PCR）扩增对DNA产量及质量进行检测。结果：Chelex-100法,改良SDS法,Gu SCN法及改良试剂盒法均能从哈蟆油药材中提取得到基因组DNA,SDS法和试剂盒法提取不到。其中改良SDS法得到的DNA质量良好,得率高,但操作繁琐;改良试剂盒方法得到的DNA质量较好,但得率低,成本高;Chelex-100法操作简单快速、得率高,但得到的DNA质量较差;Gu SCN法提取的DNA含有较多杂质,会抑制PCR反应。结论：Chelex-100法、改良SDS法及改良试剂盒法均可得到满足PCR扩增要求的DNA,实践中可根据条件选择适宜方法来提取哈蟆油基因组DNA。
- 刘建辉石林春唐先明王洋王姝
- 关键词：哈蟆油基因组DNA聚合酶链式反应
- 快速PCR方法在哈蟆油真伪鉴别中的应用研究被引量：15
- 2017年
- 该研究依据哈蟆油Cyt b基因155位SNP位点设计位点特异性PCR引物,采用碱裂解法提取基因组DNA,2步循环PCR程序进行PCR反应,并对PCR反应条件进行优化,从而建立起一种哈蟆油及其4种常见混伪品的快速PCR鉴别方法。该方法在90℃变性3 s,62℃退火延伸20 s进行32个循环时,加入2μL 100×SYBR GreenⅠ染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。该方法准确、简便,40 min内即可完成鉴别,为哈蟆油药材现场快速鉴定提供技术支持。
- 何志一唐先明刘建辉袁媛蒋超赵玉洋王洋
- 关键词：哈蟆油分子鉴定荧光检测
