沈凤 作品数:5 被引量:32 H指数:2 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 贵州省科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
TET1调节宫颈癌Hela细胞生物学行为的研究 目的:通过CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeat)技术建立敲除TET1(ten-eleven translocation1... 沈凤关键词:宫颈癌 HELA细胞 生物学行为 文献传递 HPV E6/E7 mRNA检测在HPV分型及宫颈疾病筛查中的作用研究 被引量:13 2018年 目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 m RNA检测在女性宫颈疾病筛查中的作用。方法选取2016年9月至2017年9月贵州医科大学附属医院妇产科门诊和住院部就诊的HPV阳性感染者287例,其中宫颈疾病患者267例[包括宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ~Ⅲ、宫颈癌],阳性感染者中体检无疾病表现及病理学检查无宫颈病变者20例。取患者宫颈脱落细胞用支链DNA技术(简称b-DNA技术)检测高危HPV E6/E7 m RNA,患者同时行宫颈液基薄层细胞检测和HPV分型检测,对不同年龄、HPV分型、阴道细胞学分型(简称TBS分型)及疾病分级的HPV E6/E7 m RNA的诊断价值进行效能分析。结果在不同年龄段内E6/E7阳性和阴性所占比例差异有统计学意义,P<0.05,在年龄组≤30岁组和>50~60岁组,E6/E7阳性者所占比例最大,分别为85.40%和84.40%;而HPV E6/E7m RNA拷贝数在不同年龄组内差异没有统计学意义。E6/E7结果在单一感染和混合感染,以及单一感染和多重感染间差异无统计学意义;在不同感染型别中,只有HPV 16型随病变严重程度的增加其感染率呈递增趋势(P<0.05),其余HPV型与病变严重程度无明显相关性(P>0.05)。不同疾病分组间,E6/E7阳性率的分布差异有统计学意义,表现为无宫颈病变组(0)<宫颈炎(15.60%) 闫海洋 闵少菊 沈艳 徐殿琴 沈凤 王焰 丁妍 谭玉洁关键词:宫颈疾病 E6 E7 TET1过表达载体构建及其稳定过表达的宫颈癌HeLa细胞鉴定 被引量:2 2018年 目的构建甲基胞嘧啶双加氧酶1(TET1)过表达载体并对其稳定过表达的宫颈癌HeLa细胞进行鉴定。方法从人宫颈癌组织中扩增出TET1目的片段并将其克隆到pLVX-MYRF载体上,构建真核表达载体pLVX-MYRF-TET1,进行双酶切及测序验证。选择宫颈癌HeLa细胞,随机分为TET1组、阴性对照组,采用脂质体转染法分别转染重组质粒pLVX-MYRF-TET1、空质粒pLVX-MYRF,采用Real-time PCR法和Western blotting法检测两组TET1 mRNA和蛋白表达。结果经双酶切分析及测序验证,成功构建了真核表达载体pLVX-MYRF-TET1。与阴性对照组比较,TET1组TET1 mRNA和蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05)。结论成功构建TET1过表达载体pLVX-MYRF-TET1,并且能在宫颈癌HeLa细胞中稳定过表达。 沈艳 沈凤 闫海洋 徐殿琴 丁妍 谭玉洁关键词:宫颈癌 HELA细胞 脂质体转染 2型糖尿病患者发生肾功能异常与其甲状腺功能的关系研究 被引量:15 2018年 目的探讨2型糖尿病患者肾损伤的发生与甲状腺功能异常发生的关联。方法回顾性分析2016年8月至2017年9月贵州医科大学附属医院内分泌科691例2型糖尿病住院患者性别、年龄、家族史、体重指数(BMI)、病程、并发症、血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT_3)、游离甲状腺素(FT_4)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys C)和尿微量白蛋白(m Alb),根据其甲状腺功能检查结果分为2型糖尿病伴甲状腺功能正常组(正常组)与2型糖尿病伴甲状腺功能异常组(异常组),后者包括甲状腺功能亢进(简称甲亢)、亚临床甲亢、甲状腺功能减低(简称甲减)、亚临床甲减和低T_3。比较两组患者肾脏功能异常情况及其与性别、年龄、家族史、BMI、病程、HbA1c和并发症的关联,并采用二分类Logistic回归分析2型糖尿病患者肾脏功能异常的相关危险因素。结果 (1)异常组BUN(Z=2.945,P=0.003)、Scr(Z=2.685,P=0.007)、Cys C(Z=4.498,P=0.000)、m Alb(Z=6.073,P=0.000)和TSH(Z=8.139,P=0.000)均高于正常组,FT_3(Z=6.297,P=0.000)和FT_4(Z=4.981,P=0.000)低于正常组(P<0.05);(2)2型糖尿病患者中甲状腺功能异常发生率为25.04%,以亚甲减发生率最高,但对肾功能损伤以低T_3明显,且各类型甲状腺甲功异常m Alb水平均升高(P<0.05);(3)异常组中肾脏功能异常发生率75.7%(131/173)高于正常组46.1%(239/518),差异有统计学意义(χ2=45.63,P=0.000),在性别、家族史、年龄、BMI、病程≤20年、血糖、HbA1c≤13%、无并发症和伴一个并发症中,异常组肾脏功能异常发生率均高于正常组(P<0.05);(4)二分类Logistic回归分析,性别(OR=1.463)、年龄(OR=2.171)、病程(OR=1.804)、并发症(OR=5.863)、血糖(OR=1.753)和甲状腺功能异常(OR=3.535)是2型糖尿病患者肾脏功能异常的相关危险因素(P<0.05)。结论 2型糖尿病患者肾脏功能损害的发生与甲状腺功能异常有关,高龄、病� 沈艳 闫海洋 徐殿琴 沈凤 谭玉洁关键词:2型糖尿病 甲状腺功能 TET1基因敲除的宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力观察 被引量:2 2017年 目的观察TET1基因敲除的宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力。方法采用CRISPR/Cas9技术构建TET1敲除的Hela细胞株(观察组),同时选择野生Hela细胞作为对照组。采用实时无标记动态细胞分析技术观察两组细胞增殖能力,计算两组90 h时的细胞指数(CI)值;采用Transwell实验观察两组细胞的侵袭能力。结果观察组、对照组CI值分别为1.04±0.86、1.57±1.01,两组相比P<0.05。观察组、对照组24 h穿膜细胞数分别为(158±6)、(109±4)个,48 h穿膜细胞数分别为(206±12)、(142±7)个,两组相比P均<0.05。结论 TET1基因敲除的宫颈癌Hela细胞增殖能力、侵袭能力增强。 沈凤 丁妍 谭玉洁关键词:宫颈癌 HELA细胞 细胞增殖 细胞侵袭